食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (1): 215-218.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201001050
陈世琼1,唐卿雁2
CHEN Shi-qiong1,TANG Qing-yan2
摘要:
为认识和应用极端嗜热细菌腾冲嗜热厌氧杆菌(T. tengcongensis MB4T)产生的葡聚糖磷酸化酶(Tte-GlgP)的性质,用电喷雾质谱法(ESI-MS)测定Tte-GlgP 的底物谱。结果表明:纯化后的Tte-GlgP 有较广的底物范围,能将可溶性淀粉、麦芽糊精、糖原、麦芽七糖、麦芽五糖和麦芽三糖底物转化为1- 磷酸葡萄糖(G-1-P)。用改进后的双酶法测定Tte-GlgP 对上述底物的转化效率,以产生的G-1-P 的量为指标(μmol/L),在相同的实验条件下,以麦芽七糖和麦芽五糖为底物时,转化效率相对高,分别为86.83μmol/L 和85.79μmol/L;糊精和可溶性淀粉次之,分别为82.9μmol/L G-1-P 和69.68μmol/L G-1-P;最低的分别为糖原和麦芽三糖,产生的G-1-P 分别为45.81μmol/L 和43.60μmol/L。两种分析方法均证明麦芽寡糖、麦芽糖糊精和淀粉为Tte-GlgP 的最适底物。以上述双酶法为酶活性测定方法,测得在体系pH8.0 时,Tte-GlgP 的活性最高;在最适pH 值条件下以可溶性淀粉为底物时Tte-GlgP 催化反应的最适温度为60℃;在60℃保温6h 后,Tte-GlgP 仍然有90% 的活性残留,说明Tte-GlgP 具有热稳定性。
中图分类号: