食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (19): 309-312.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201019067
王淑军1,吕明生1,李华钟2,徐金利1 , 2,焦豫良1,房耀维1,刘 姝1
WANG Shu-jun1,LU Ming-sheng1,LI Hua-zhong2,XU Jin-li1,2,JIAO Yu-liang1,FANG Yao-wei1,LIU Shu1
摘要:
根据NCBI 上公布的普鲁兰酶基因的保守序列设计简并引物,以Thermococcus siculi HJ21 基因组DNA 为模板进行PCR,得到T. siculi HJ21 普鲁兰酶的基因,测序后通过Blast(NCBI)数据库比对和分析表明扩增基因有一个4056bp、编码1351 个氨基酸的开放阅读框,为一新的普鲁兰酶基因。将该基因插入表达载体pET28a,并转化Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG 诱导,测定普鲁兰酶比活力。重组转化子的细胞破碎液有高温普鲁兰酶活性,SDS-PAGE 电泳结果显示出分子质量约为150kD 的特异性条带。
中图分类号: