基于HRP标记抗体的黄曲霉毒素M1的直接竞争-ELISA快速检测方法

doi:10.7506/spkx1002-6630-201118048

食品科学 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (18): 221-224.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201118048

基于HRP标记抗体的黄曲霉毒素M1的直接竞争-ELISA快速检测方法

裴世春1，肖理文2

1. 齐齐哈尔大学食品与生物工程学院
2. 上海优你生物技术股份有限公司

出版日期:2011-09-25 发布日期:2011-09-24
基金资助:
黑龙江省留学归国人员项目(Lc05c11)

Rapid Detection of Aflatoxin M1 by Anti-AFM1 mAb-HRP Based Dc-ELISA

PEI Shi-chun1，XIAO Li-wen2

(1. College of Food and Biological Engineering, Qiqihar University, Qiqihar 161006, China； 2. Shanghai Uni Biotech Co. Ltd., Shanghai 201616, China)

Online:2011-09-25 Published:2011-09-24

摘要/Abstract

摘要： 为构建快速检测乳制品中黄曲霉毒素M1(AFM1)的直接竞争-酶联免疫吸附(dc-ELISA)体系，将辣根过氧化物酶(HRP)与高纯度抗AFM1单克隆抗体进行偶联后对其与AFM1竞争性反应条件进行优化，并利用AFM1污染标准物质ERMI-BD282(0)、ERMI-BD 283(0.11μg/kg)、ERMI-BD 284(0.44μg/kg)等对检测体系的灵敏度和精确性进行验证。结果当AFM1-BSA包被质量浓度0.25μg/L、抗AFM1 mAb-HRP稀释2000倍时dc-ELISA检测AFM1的IC50为0.75μg/L，检测范围为0.015～4.05μg/L，添加AFM1至0.45μg/L的鲜奶样品中检测回收率平均为80%，dc-ELISA可满足鲜乳中AFM1国家残留限量标准0.5μg/kg的检测要求。该体系可应用于鲜奶制品中AFM1大于0.5μg/kg污染样品的快速初筛。

关键词: 直接竞争-酶联免疫法(dc-ELISA), 黄曲霉毒素M1(AFM1), 乳品, 检测

Abstract: A rapid and sensitive direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using anti-AFM1 mAb with horseradish peroxidase (HRP) to measure aflatoxin M1 (AFM1) in milk was described. Using AFM1 contaminated milk ERMI-BD282 (zero), ERMI-BD 283 (0.11 μg/kg) and ERMI-BD 284 (0.44μg/kg), the sensitivity and accuracy of the developed assay was validated. The optimized assay conditions regarding sensitivity and stability were found to be: coating AFM1-BSA antigen concentration 0.25 μg/kg and dilution factor of anti-AFM1 mAb-HRP conjugate 2000. Assays of ERMI-BD282 samples spiked with AFM1 at the level of 0.45 μg/L revealed an average recovery of around 80%. The developed method showed an IC50 of 0.75μg/L and a linear range of 0.015－4.05 μg/L. This assay may be used in rapid screening of contaminated milk at AFM1 ＞0.5μg/L.

Key words: direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay (dc-ELISA), aflatoxin M1 (AFM1), milk, detection

中图分类号:

R446.61

裴世春,肖理文. 基于HRP标记抗体的黄曲霉毒素M1的直接竞争-ELISA快速检测方法[J]. 食品科学, 2011, 32(18): 221-224.

PEI Shi-chun，XIAO Li-wen. Rapid Detection of Aflatoxin M1 by Anti-AFM1 mAb-HRP Based Dc-ELISA[J]. FOOD SCIENCE, 2011, 32(18): 221-224.

[1]	田林双，顾鹏程，吴存兵，徐澳，豆雪梅，史凤珍，陈飞. 小麦粉及其制品中偶氮甲酰胺检测方法研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(9): 347-354.
[2]	李伊宁，黄昆仑，姚志轶. 用于叶酸检测的荧光传感器构建及应用研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(9): 214-221.
[3]	宁亚维，刘茁，杨正，马俊美，范素芳，李强，张岩. UPLC-MS/MS法同时检测食品中3种主要牛奶过敏原[J]. 食品科学, 2021, 42(8): 270-276.
[4]	王玥，邵琳，李乾学，易乐，曲晗，王洪利，沈明浩. 适配体结合量子点技术同时检测金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7方法[J]. 食品科学, 2021, 42(8): 305-312.
[5]	田景升，李东东，赵玲钰，高文惠. 喹乙醇印迹传感器的制备及其在喹噁啉类药物残留快检中的应用[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 316-324.
[6]	刘娜，曹强，肖雨诗，黄蓉，程雷，刘欢，韩刚，李晋成，李梦龙，吴立冬. 基于多巴胺及其衍生物的传感器在食品快速检测中的研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(5): 332-339.
[7]	陈巧莉，杨兵，洪晴悦，魏鲟钰，方楚楚，阚建全. 海洋生物毒素的分类、毒害作用机制及检测技术研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(5): 321-331.
[8]	赵非，陈宝英，李克峰，王旭. 高效液相色谱-荧光检测法测定红肉及其加工肉中唾液酸含量[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 313-318.
[9]	黄佳茵，周雅琪，陈美玉，李苑，吴甜甜，胡亚芹. 基于甲基纤维素改性聚乙烯醇指示膜的制备、表征及对南美白对虾的鲜度指示[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 194-203.
[10]	吴有雪，吴美娇，田亚晨，王政，郭亮，刘程，方水琴，刘箐. 沙门氏菌检测生物传感器研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 339-345.
[11]	付瑞杰，周静，田风玉，焦必宁，何悦. 基于纳米材料的光学适配体传感器在农药残留检测中的应用研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 330-338.
[12]	山珊，黄昭鸿，黄艳梅，刘道峰，刘成伟，黄运红，龙中儿. 不对称PCR技术结合免疫层析法快速检测产志贺毒素大肠埃希氏菌[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 312-318.
[13]	山珊，黄艳梅，赵雪龙，陈文瑶，刘成伟，龙中儿，刘道峰. 级联信号转导系统结合免疫层析法检测大肠埃希氏菌O157:H7[J]. 食品科学, 2021, 42(18): 314-320.
[14]	杨建飞，马倩，左勇，黄雪芹，徐佳，王定丽，周耀进，杨柯怡. 亚硝酸盐快速检测试剂研究及其在酱腌菜中的应用[J]. 食品科学, 2021, 42(18): 321-328.
[15]	黄栋玮，谷贵章，胡科娜，高兴杰，张进杰，杨文鸽，徐大伦. 基于D152树脂吸附蛋白质结合SERS测定鱼肉中的鸟嘌呤含量[J]. 食品科学, 2021, 42(18): 298-305.

基于HRP标记抗体的黄曲霉毒素M1的直接竞争-ELISA快速检测方法

Rapid Detection of Aflatoxin M1 by Anti-AFM1 mAb-HRP Based Dc-ELISA

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价