蒜苗过氧化氢酶的分离纯化及部分性质研究

doi:10.7506/spkx1002-6630-201309051

食品科学 ›› 2013, Vol. 34 ›› Issue (9): 250-255.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201309051

蒜苗过氧化氢酶的分离纯化及部分性质研究

胡瑞斌，孙芳，任美凤，唐云明*

西南大学生命科学学院，重庆市甘薯工程研究中心，三峡库区生态环境教育部重点实验室，重庆 400715

收稿日期:2012-06-21 修回日期:2013-03-26 出版日期:2013-05-15 发布日期:2013-05-07
通讯作者: 唐云明 E-mail:tbright@swu.edu.cn
基金资助:
重庆市科委重点攻关项目(CSTC2011AB1027)

Isolation, Purification and Some Characterization of Catalase from Garlic Seedlings

HU Rui-bin，SUN Fang，REN Mei-feng，TANG Yun-ming*

Key Laboratory of Eco-environments in Three Gorges Reservoir Region, Ministry of Education,
Chongqing Sweet-potato Engineering Research Center, School of Life Science, Southwest University, Chongqing 400715, China

Received:2012-06-21 Revised:2013-03-26 Online:2013-05-15 Published:2013-05-07
Contact: TANG Yun-ming E-mail:tbright@swu.edu.cn

摘要/Abstract

摘要：

新鲜蒜苗经匀浆、缓冲液浸提、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析，获得电泳纯的过氧化氢酶。该酶比活力达到25975.36U/mg，酶活回收率为40.05%，纯化倍数为125.97。该酶的全分子质量为234.93kD，亚基分子质量为59.16kD；最适温度为45℃，最适pH值为7.2，该酶在25～45℃及pH5.0～10.0的范围内有较好的稳定性；在最适条件下测得其Km值为38.2mmol/L；甲醇、乙醇、异丙醇及SDS、KSCN、Ag+、Cu2+、Mn2+、Co2+、Cd2+、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Ba2+对该酶有抑制作用，Li+、Pb2+及低浓度K+对该酶具有一定的激活作用。

关键词: 蒜苗, 过氧化氢酶, 分离纯化, 性质

Abstract:

Electrophoresis-purity catalase from fresh garlic seedlings was obtained through homogenization, buffer solution
extraction, ammonium sulfate precipitation, DEAE-Sepharose ion exchange chromatography and Superdex-200 gel filtration
chromatography. The specific activity of purified CAT was 25975.36 U/mg with a recovery of 40.05% and a purification
factor of 125.97. The molecular and subunit molecular weight of this enzyme was 234.93 kD and 59.16 kD, respectively.
It was relatively stable in the range of 25—45 ℃ and pH 5.0—10.0 Its optimum temperature and pH were 45 ℃ and 7.2,
respectively. Furthermore, its Km was 38.2 mmol/L under the optimum conditions. Its activity was inhibited by methanol,
ethanol, isopropanol, SDS and KSCN as well as some metal ions such as Ag+, Cu2+, Mn2+, Co2+, Cd2+, Zn2+, Ca2+, Mg2+ and
Ba2+, but was activated by Li+ and Pb2+ as well as low concentration of K+.

Key words: garlic seedlings, catalase, isolation and purification, characterization

中图分类号:

Q946.5

胡瑞斌，孙芳，任美凤，唐云明*. 蒜苗过氧化氢酶的分离纯化及部分性质研究[J]. 食品科学, 2013, 34(9): 250-255.

HU Rui-bin，SUN Fang，REN Mei-feng，TANG Yun-ming*. Isolation, Purification and Some Characterization of Catalase from Garlic Seedlings[J]. FOOD SCIENCE, 2013, 34(9): 250-255.

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