应用依赖解旋酶DNA扩增技术检测转基因大豆

doi:10.7506/spkx1002-6630-201604029

食品科学

应用依赖解旋酶DNA扩增技术检测转基因大豆

章晶晶1，王赞1，张翠侠1，马超峰1，周巍1,2,*，张岩1

1.河北省食品检验研究院，河北省食品安全重点实验室，河北石家庄 050071；
2.河北农业大学食品科技学院，河北保定 071000

出版日期:2016-02-25 发布日期:2016-02-23
通讯作者: 周巍
基金资助:
国家自然科学基金面上项目（31401584）

Detection of Genetically Modified Soybean by Helicase-Dependent Isothermal DNA Amplification Assay

ZHANG Jingjing1, WANG Zan1, ZHANG Cuixia1, MA Chaofeng1, ZHOU Wei1,2,*, ZHANG Yan1

1. Hebei Food Safety Key Laboratory, Hebei Food Inspection and Research Institute, Shijiazhuang 050071, China;
2. College of Food Science and Technology, Agricultural University of Hebei, Baoding 071000, China

Online:2016-02-25 Published:2016-02-23
Contact: ZHOU Wei

摘要/Abstract

摘要：

目的：基于依赖解旋酶DNA恒温扩增（helicase-dependent isothermal DNA amplification，HDA）技术，建立快速检测转基因大豆的方法。方法：采用以CaMV35S、NOS、CP4-EPSPS 3 种外源基因和内源基因Lectin（大豆凝集素基因）为目的片段设计4 对特异引物，建立反应体系，通过HDA方法对内源基因和3 种外源基因的检测特异性和灵敏度进行实验，并对结果进行同源性分析。结果：建立了转基因大豆HDA检测法，检测特异性良好，3 种外源基因的检出限为0.2%。结论：转基因大豆的HDA检测方法具有普通聚合酶链式反应的特异、灵敏等特点，并且对仪器要求更低，极适合基层实验室使用，具有广阔的应用前景。

关键词: 依赖解旋酶DNA扩增, 转基因大豆, 检测

Abstract:

Objective: To establish a new rapid method to detect genetically modified soybean based on helicase-dependent
isothermal DNA amplification (HDA). Methods: With four highly specific sets of primers synthesized to target genes
including Lectin in soybean and CaMV35S, NOS and CP4-EPSPS foreign genes, PCR reaction system was established. The
specificity and sensitivity of the PCR method were tested based on HDA and homology analysis was performed. Results: The
helicase-dependent isothermal DNA amplification method for the rapid detection of genetically modified soybean has been
established. The detection limits of CaMV35S, NOS and CP4-EPSPS genes in genetically modified soybeans by HDA were
all 0.2%. Conclusion: HDA is a rapid, user-friendly, specific and sensitive method for the detection of genetically modified
soybean, and is very suitable for use in grassroots laboratories with a broad prospect.

Key words: helicase-dependent isothermal DNA amplification (HDA), genetically modified soybean, detection

中图分类号:

TS207.3

章晶晶，王赞，张翠侠，马超峰，周巍，张岩. 应用依赖解旋酶DNA扩增技术检测转基因大豆[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201604029.

ZHANG Jingjing1, WANG Zan1, ZHANG Cuixia1, MA Chaofeng1, ZHOU Wei1,2,*, ZHANG Yan1. Detection of Genetically Modified Soybean by Helicase-Dependent Isothermal DNA Amplification Assay[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201604029.

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Detection of Genetically Modified Soybean by Helicase-Dependent Isothermal DNA Amplification Assay

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