食品科学 ›› 2017, Vol. 38 ›› Issue (14): 9-16.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201714002
侯洁,李琴,熊科,徐友强,李秀婷
HOU Jie, LI Qin, Xiong Ke, XU Youqiang, LI Xiuting,
摘要: 基于酸性木聚糖酶在饲料及酿酒行业良好的应用前景,通过基因组步移的方法克隆得到微紫青霉酸性木聚糖酶的全长基因xynA,然后采取重叠延伸PCR技术进行内含子的切除获得xynA的cDNA序列,并对其进行了生物信息学分析。序列分析结果显示xynA基因全长720?bp,内含子63?bp,cDNA全长657?bp。推测该木聚糖酶编码信号肽28?个氨基酸,成熟肽190?个氨基酸;预测该蛋白为分子质量20.61?kD、等电点7.0的亲水性蛋白,且分子内不含二硫键。与其他真菌来源的GH11族耐酸性木聚糖酶进行序列比对,结果显示该酶的相应位置具有特征天冬氨酸残基Asp,且具有糖苷水解酶11?族的保守区域特征以及典型的“右手半握”状结构,重组木聚糖酶基因xynA能够在大肠杆菌中成功表达,比酶活力达220.5?U/mg。
中图分类号: