食品科学 ›› 2019, Vol. 40 ›› Issue (6): 151-158.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20180125-317
牛潇迪1,李天明1,刘金雷1,杨天勇1,李子怡2,冯惠勇1,*
NIU Xiaodi1, LI Tianming1, LIU Jinlei1, YANG Tianyong1, LI Ziyi2, FENG Huiyong1,*
摘要: 建立CRISPR-Cas9介导的在Saccharomyces cerevisiae双倍体细胞中进行基因敲除的方法。以can1基因敲除后的表型验证该CRISPR-Cas9系统的有效性,can1基因的失活效率达到4%。利用该系统又分别敲除了pdc、adh3、adh2、adh1、 pdh等基因,单基因编辑效率分别为4/48、3/48、1/48、3/28、1/16。确定了基因连续敲除的方法流程,pdc、adh3、adh2三个基因全部敲除,整个过程用时17 d。探索了双基因一次转化同时敲除的方法,将adh5、lip两个基因同时敲除用时6 d,基因编辑效率分别为9/32和10/32。
中图分类号: