利用噬菌体肽库淘选玉米赤霉烯酮的模拟表位

食品科学 ›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (8): 241-243.

利用噬菌体肽库淘选玉米赤霉烯酮的模拟表位

何庆华, 刘仁荣, 许杨

南昌大学中德联合研究院食品科学教育部重点实验室；江西科技师范学院生命科学院；南昌大学中德联合研究院食品科学教育部重点实验室江西南昌330029；江西南昌330013；江西南昌330029；

出版日期:2007-08-15 发布日期:2011-10-24

Biopanning of Zearalenone Mimotope by Phage Displayed Peptide Bank

HE Qing-Hua, LIU Ren-Rong, XU Yang

1.Key Laboratory of Food Science, Ministry of Education, Nanchang University, Nanchang 330029, China; 2.School of Life Science, Jiangxi Science and Normal University, Nanchang 330013, China

Online:2007-08-15 Published:2011-10-24

摘要/Abstract

摘要： 目的:利用噬菌体肽库淘选玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)模拟表位。方法:以抗ZEN单克隆抗体为配体,利用噬菌体七肽库淘选ZEN的模拟表位,采用了逐轮减少抗体包被浓度,交换使用封阻液中蛋白质种类的方法,经三轮淘选后,随机挑取20个克隆测序并以ELISA方法及竞争ELISA实验,以确定阳性克隆。结果:获得10种序列,ELISA显示其中两种序列为阳性克隆,抑制率达90%以上,其氨基酸序列分别为DAVILLM,HHCHWWH。结论:噬菌体展示技术可淘选到ZEN的模拟表位,淘选到的噬菌体粒子可作为毒素的替代品建立免疫学检测方法。

关键词: 噬菌体展示肽库, 玉米赤霉烯酮, 模拟表位, 单克隆抗体

Abstract: Objective: To obtain mimotope of zearalenone (ZEN) by phage displayed peptide bank. Methods: The anti-ZEN monoclonal antibody was used as target for biopanning from a heptapeptide phage display bank. The concentration of antibody was reduced step by step, and different blocking buffer was alternated every round. After 3 rounds of biopanning, 20 clones were randomly selected for DNA sequencing, and assayed by ELISA and ZEN competition experiments to indentify the postive clones. Results: Ten sequences are obtained, two of which are proved to be positive. Inhibition percentages are up 90% and the amino acid sequences are DAVILLM, HHCHWWH respectively. Conclusion: The phage display technique can be successfully applied to panning the mimotope of ZEN.The aquired phages may be used as the surrogate of the toxin to establish immunoassay.

Key words: phage display peptide library, zearalenone, mimotope, monoclonal antibody

何庆华, 刘仁荣, 许杨. 利用噬菌体肽库淘选玉米赤霉烯酮的模拟表位[J]. 食品科学, 2007, 28(8): 241-243.

HE Qing-Hua, LIU Ren-Rong, XU Yang. Biopanning of Zearalenone Mimotope by Phage Displayed Peptide Bank[J]. FOOD SCIENCE, 2007, 28(8): 241-243.

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