食品科学 ›› 2018, Vol. 39 ›› Issue (14): 99-105.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201814015
王玲1,2,年益莹1,2,薛鹏1,2,季晓彤1,2,崔钰婷1,2,张公亮1,侯红漫1,孙黎明1,2,*
WANG Ling1,2, NIAN Yiying1,2, XUE Peng1,2, JI Xiaotong1,2, CUI Yuting1,2, ZHANG Gongliang1, HOU Hongman1, SUN Liming1,2,*
摘要: 对刺参体内2?种天冬氨酸蛋白酶——组织蛋白酶D(cathepsin?D,Cat?D)和组织蛋白酶E(Cat?E)的酶学性质进行探讨,并考察两者可能在刺参自溶中的参与作用。先用Tris-HCl缓冲溶液提取刺参体壁中的粗酶,采用特异性荧光底物法测定Cat?D和Cat?E的酶学性质。结果表明,Cat?D和Cat?E的最适pH值分别为5.0和4.0,分别在60?℃和40?℃呈现最大酶活性,两者在20~40?℃活性均较为稳定。Zn2+、Cu2+、Fe2+、Fe3+、Mn2+可抑制Cat?D的活性,抑制率分别为86%、76.3%、29.2%、56.5%和48.5%。Fe3+、Fe2+、Cu2+可抑制Cat?E的活力,抑制率分别为99.1%、82.2%和28.6%。Pepstatin?A、Z-Leu-Leu-Leu-H、苯甲基磺酸氟、1,10-菲啰啉能够抑制两者活性,抑制率分别约为98%~99%、65%~78%、30%~35%、19%~23%。二硫苏糖醇、L-Cys和乙二胺四乙酸则可将两者活性分别提升30.4%~31.1%、7.58%~9.64%、6.6%~7.9%。结果表明,刺参Cat?D和Cat?E为2?种具有一定金属离子敏感性和依赖性的天冬氨酸蛋白酶,其活性中心有丝氨酸和半胱氨酸参与其活性调节,且两者很有可能参与刺参自溶过程中蛋白质的降解。
中图分类号: