酪氨酸酶特异性卵黄抗体Fab’片段的制备及其对酶活力的抑制性能

doi:10.7506/spkx1002-6630-201802019

食品科学 ›› 2018, Vol. 39 ›› Issue (2): 119-123.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201802019

酪氨酸酶特异性卵黄抗体Fab’片段的制备及其对酶活力的抑制性能

钟欣欣，曹立民，林洪，史佩玉，隋建新*

（中国海洋大学食品科学与工程学院，山东?青岛 266003）

出版日期:2018-01-25 发布日期:2018-01-05
作者简介:钟欣欣，曹立民，林洪，史佩玉，隋建新
基金资助:
中央高校基本科研业务费专项（201413061）；山东省农业应用创新专项

Production and Inhibitory Effect of Specific Egg Yolk Antibody Fab’ Fragment against Tyrosinase

ZHONG Xinxin, CAO Limin, LIN Hong, SHI Peiyu, SUI Jianxin*

(College of Food Science and Engineering, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)

Online:2018-01-25 Published:2018-01-05

摘要/Abstract

摘要： 针对导致黑色素沉淀的酪氨酸酶，制备了特异性卵黄抗体Fab’片段，研究其对酶活力的抑制效果并从动力学角度进行分析。结果表明，胃蛋白酶法制备Fab’片段的最适条件为：pH?4.0、反应比（卵黄抗体-胃蛋白酶）1∶150（mg/U）、反应时间8?h。经免疫亲和柱纯化后可得理化性质稳定、纯度大于95%的Fab’片段；该片段通过非竞争性结合抑制酪氨酸酶活力，IC50为11.16?μmol/L，结合常数为5.79×105，抑制效果相比完整的卵黄抗体分子大大提高。本研究可为卵黄抗体Fab’片段作为潜在的酶活力抑制剂在食品、化妆品和医药等行业中应用提供理论参考。

关键词: 酪氨酸酶, 卵黄抗体, 蛋白酶解, Fab’片段, 活性抑制

Abstract: The production of Fab’ fragment from specific egg yolk antibody against tyrosinase and its inhibitory activity on tyrosinase were investigated in this paper. The optimal conditions were obtained as follows: pH 4.0, ratio of egg yolk antibody to pepsin 1:150 (mg/U), and reaction time 8 h. Fab’ fragment purified by immunoaffinity column chromatography to a purity of over 95% exhibited good physicochemical stability. It was demonstrated as a non-competitive inhibitor with an IC50 value of 11.16 μmol/L and a binding constant of 5.79 × 105, whose inhibitory effect was much higher than that of IgY. The results of this study can provide a theoretical basis for the application of egg yolk antibody Fab’ fragments in food, cosmetics and pharmaceutical industries as a potential enzyme inhibitor.

Key words: tyrosinase, egg yolk antibody, enzymatic proteolysis, fragment antigen binding (Fab’ fragment), enzyme activity inhibition

中图分类号:

TS201.6

钟欣欣，曹立民，林洪，史佩玉，隋建新. 酪氨酸酶特异性卵黄抗体Fab’片段的制备及其对酶活力的抑制性能[J]. 食品科学, 2018, 39(2): 119-123.

ZHONG Xinxin, CAO Limin, LIN Hong, SHI Peiyu, SUI Jianxin. Production and Inhibitory Effect of Specific Egg Yolk Antibody Fab’ Fragment against Tyrosinase[J]. FOOD SCIENCE, 2018, 39(2): 119-123.

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