食品科学 ›› 2018, Vol. 39 ›› Issue (3): 222-228.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201803034
张贤益1,李文娟1,钟 亮1,潘 猛1,汤小芳1,姚于飞2,*
ZHANG Xianyi1, LI Wenjuan1, ZHONG Liang1, PAN Meng1,TANG Xiaofang1, YAO Yufei2,*
摘要: 目的:模拟体内环境,研究白扁豆多糖(dolichos bean seed polysaccharide,DBSP)对胎鼠大脑 皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护机制。方法:原代培养胎鼠大脑皮层神经细胞;建立缺氧/复氧(anoxia/ reoxygenation,A/R)损伤模型;实验分4 组:对照组、A/R组、白扁豆多糖预处理组(DBSP+A/R组)、阻断剂组 (LY294002+DBSP+A/R组);用比色法检测细胞活性与乳酸脱氢酶的释放水平;流式细胞仪分析测定Ca2+ 相对浓度、活性氧、线粒体膜电位和细胞凋亡的变化;Western blot法检测总蛋白激酶B(total protein kinase B, T-Akt)和磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)蛋白表达。结果:从细胞活性来看,A/R组比 对照组明显降低(P<0.01),表明A/R对神经细胞产生了损伤。同时,与A/R组相比,DBSP+A/R组细胞活性显著 上升、细胞凋亡明显减少(P<0.01),乳酸脱氢酶的释放水平下降,表明DBSP对受A/R损伤的神经细胞产生保护 作用,进一步结果显示,与A/R组相比,DBSP+A/R组中Ca2+相对浓度和活性氧生成显著降低、显著增加线粒体膜 电位和p-Akt蛋白表达(P<0.01)。而与DBSP+A/R组相比,LY294002+DBSP+A/R组中p-Akt蛋白表达显著减少 (P<0.01),同时细胞活性与线粒体膜电位下降,且LDH的释放水平、Ca2+相对浓度、活性氧、细胞凋亡明显增加 (P<0.05),表明DBSP对神经细胞的保护作用受到PI3K-Akt信号通路抑制剂LY294002的抑制作用而被削弱。结 论:DBSP可通过PI3K-Akt信号转导通路抑制神经细胞的缺氧性凋亡。
中图分类号: