大豆过氧化物酶基因的克隆及其表达载体的构建

doi:10.7506/spkx1002-6300-201005044

食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (5): 197-200.doi: 10.7506/spkx1002-6300-201005044

大豆过氧化物酶基因的克隆及其表达载体的构建

曾家豫¹,袁红霞¹,廖世奇²,周思彤¹,梁琼¹

1.西北师范大学生命科学学院 2.甘肃省医学科学研究院

收稿日期:2009-05-31 修回日期:2009-10-30 出版日期:2010-03-01 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 廖世奇 E-mail:yuanhongxia520@163.com
基金资助:
甘肃省教育厅科研项目(0601-28；0501B-16)；甘肃省自然科学研究基金计划项目(096RJZA035)

Cloning and Plasmid Construction of Soybean Peroxidase Gene for Prokaryotic Expression System

ZENG Jia-yu1，YUAN Hong-xia1，LIAO Shi-qi2,*，ZHOU Si-tong1，LIANG Qiong1

(1. College of Life Science, Northwest Normal University, Lanzhou 730070, China；
2. Gansu Province Institute of Medical Sciences, Lanzhou 730050, China)

Received:2009-05-31 Revised:2009-10-30 Online:2010-03-01 Published:2010-12-29
Contact: LIAO Shi-qi2 E-mail:yuanhongxia520@163.com

摘要/Abstract

摘要：

大豆过氧化物酶(soybean peroxidase，sbp)基因的克隆及其表达载体的构建将有利于人们更深入的从分子生物学角度研究sbp 基因的结构与功能。首先从大豆根中获取总RNA，通过RT-PCR 获得sbp 基因。再将sbp 基因与表达载体pPICZα-A 双酶切后连接，构建重组表达载体pPICZα-A-sbp。将pPICZα-A-sbp 转化大肠杆菌筛选阳性克隆体并测序。结果表明：获得的sbp 基因序列与已报道的sbp[U51191(GmEpa1)]基因序列有92% 的同源性。重组表达载体pPICZα-A-sbp 的成功构建为其在毕赤酵母中表达奠定了基础。

关键词: 大豆过氧化物酶, 基因克隆, 表达载体

Abstract:

The cloning and plasmid construction of soybean peroxidase (sbp) for prokaryotic expression system will provide more information to study the structure and function of soybean peroxidase by means of molecular biology. Total RNA was extracted from soybean root. Soybean peroxidase gene was obtained by RT-PCR technique and transferred into pPICZα-A vector through restriction endonuclease digestion. The resulting recombinant pPICZα-A-sbp expression vector was transformed into E. coli and the amplified recombinant pPICZα-A-sbp expression vector was selected and sequenced. Results indicated that cloned DNA sequence from soybean root exhibited 92% homology to the reported sbp (U51191 (GmEpa1) DNA sequence. Therefore, pPICZα-A-sbp was successfully constructed, which will provide base for its expression in Pichia pastoris (Gs115).

Key words: soybean peroxidase, gene cloning, expression vector

中图分类号:

Q785

曾家豫1，袁红霞1，廖世奇2,*,周思彤1，梁琼1. 大豆过氧化物酶基因的克隆及其表达载体的构建[J]. 食品科学, 2010, 31(5): 197-200.

ZENG Jia-yu1，YUAN Hong-xia1，LIAO Shi-qi2,*，ZHOU Si-tong1，LIANG Qiong1. Cloning and Plasmid Construction of Soybean Peroxidase Gene for Prokaryotic Expression System[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(5): 197-200.

[1]	陈思敏，罗彤晖，费永涛，吴健锋，刘冬梅. 蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus LJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达和纯化[J]. 食品科学, 2018, 39(6): 69-74.
[2]	吴京，王文文，熊蓉露，吴振，潘道东，曾小群，郭宇星. 嗜酸乳杆菌ATCC4356分选酶A基因克隆、表达及功能分析[J]. 食品科学, 2018, 39(4): 76-81.
[3]	梁新红，冉军舰，孙华迪，赵瑞香，焦凌霞，卢艳清. 1 株水开菲尔粒中植物乳杆菌的鉴定及产细菌素基因分析[J]. 食品科学, 2018, 39(18): 145-151.
[4]	王健，刘媛，张俊花，韩正政，兰凤英. β2肾上腺素受体基因在Sf9细胞中的表达及纯化[J]. 食品科学, 2017, 38(20): 34-39.
[5]	侯洁，李琴，熊科，徐友强，李秀婷. 微紫青霉酸性木聚糖酶xynA基因的克隆与序列分析[J]. 食品科学, 2017, 38(14): 9-16.
[6]	詹少德，邱昌将，朱盼，吴志华，陈红兵. 花生过敏原蛋白Ara h 6基因克隆和原核表达[J]. 食品科学, 2016, 37(3): 125-130.
[7]	冉军舰，徐剑宏，胡晓丹，史建荣. 1株产脂肽类抗生素芽孢杆菌的鉴定及脂肽类抗生素相关基因克隆[J]. 食品科学, 2016, 37(17): 127-132.
[8]	程雅韵，王新，郑琳1，李官浩，崔虎山，金清. 假肠膜明串珠菌甘露醇脱氢酶基因的克隆及表达[J]. 食品科学, 2016, 37(13): 153-156.
[9]	崔月倩，王菁蕊，王艳萍*. 乳酸菌基因表达载体及其应用研究进展[J]. 食品科学, 2015, 36(9): 224-229.
[10]	陈文拴1，黄乾明1,*，陈华萍1，杨泽身2，王安逸2，苏光灿2. 油橄榄查尔酮合酶与查尔酮异构酶基因全长的克隆及序列分析[J]. 食品科学, 2015, 36(9): 117-124.
[11]	陈文拴1，黄乾明1,*，陈华萍1，杨泽身2，王安逸2，苏光灿2. 油橄榄苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J]. 食品科学, 2015, 36(7): 124-130.
[12]	马红丹1，张丽媛1，赵邯郸1，徐丹丹1，曲静2，关淑艳1,，王丕武2,. 大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达[J]. 食品科学, 2015, 36(1): 135-139.
[13]	白羽嘉1,2，王敏2，陶永霞2，徐乐3，冯作山1,2,*. 甜杏仁和苦杏仁野黑樱苷水解酶基因的克隆[J]. 食品科学, 2014, 35(23): 226-231.
[14]	叶红红，尹明安*，朱敏，任小林. 番茄果实特异表达载体pBI121-2A11-HB-1的构建及其对农杆菌的转化[J]. 食品科学, 2014, 35(19): 174-179.
[15]	王政，谭小力，张志燕，顾守来，李冠英. 甘蓝型油菜表皮特异硫蛋白(ESP)的序列分析及其诱导表达[J]. 食品科学, 2012, 33(7): 209-214.

大豆过氧化物酶基因的克隆及其表达载体的构建

Cloning and Plasmid Construction of Soybean Peroxidase Gene for Prokaryotic Expression System

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