采用自克隆技术构建高SOD、低双乙酰的啤酒酵母工程菌

doi:10.7506/spkx1002-6630-200919057

食品科学 ›› 2009, Vol. 30 ›› Issue (19): 248-251.doi: 10.7506/spkx1002-6630-200919057

采用自克隆技术构建高SOD、低双乙酰的啤酒酵母工程菌

母茜 1，蔡勇 1，王肇悦2，张博润2，任正隆1 ,*

1. 四川农业大学植物遗传育种省级重点实验室
3. 中国科学院微生物研究所酵母遗传育种实验室

收稿日期:2008-01-21 出版日期:2009-10-01 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 任正隆 E-mail:qianqian84119@sina.com

Construction of Industrial Brewing Yeast with High-SOD and Low-diacetyl Productivity Using Self-cloning Technique

MU Qian1，CAI Yong1，WANG Zhao-yue2，ZHANG Bo-run2，REN Zheng-long1,*

1. State Key Laboratory of Plant Breeding and Genetics, Sichuan Agricultural University, Ya'an 625014, China；2. Laboratory of
Molecular Genetics and Breeding of Yeast, Institute of Microbiology of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China

Received:2008-01-21 Online:2009-10-01 Published:2010-12-29
Contact: REN Zheng-long E-mail:qianqian84119@sina.com

摘要/Abstract

摘要：

用来源于啤酒酵母自身的超氧化物歧化酶基因SOD1、铜抗性基因CUP1、3-磷酸甘油酸激酶基因PGK1启动子和α-factor基因取代α-乙酰乳酸合成酶基因ILV2内部约1.1kb的片段，得到重组质粒pMC572，采用同源重组的方法将用内切酶酶切质粒pMC572得到的含有SOD1、CUP1、PGK1和α-factor以及ILV2两端序列的片段转化啤酒酵母工业菌株YSF31，并通过铜抗性、PCR和AHAS酶活测定筛选得到转化子。结果表明啤酒酵母工程菌胞内的SOD能够分泌到胞外，乙偶姻的含量也只有受体菌的50%，而其他发酵指标并没有发生变化。

关键词: 啤酒酵母, 超氧化物歧化酶, 乙偶姻, 自克隆

Abstract:

A recombinant plasmid pMC572 was constructed through replacing internal fragment of -acetohydroxyacid synthase (AHAS) gene (ILV2) with a fused gene that contained a copper resistant gene (CUP1), PGK1 promoter, -factor sequence and open reading frame of SOD gene from Saccharomyces cerevisiae. An industrial brewing yeast strain, YSF31, was transformed with plasmid pMC572. The self-cloning strains were selected in terms of resistance ability to CuSO4, PCR amplification assay and AHAS activity. The engineered industrial strain exhibited fermentation performance and growth properties similar to the wild type in 500 ml conical flask under identical condition of beer fermentation. Moreover, SOD produced in this industrial strain was detected in fermenting liquor and acetoin was 50% lower than that of the control. Due to DNA manipulation without heterogeneous DNA, the self-cloning strain may be acceptable.

Key words: Saccharomyces cerevisiae, SOD , acetoin , self-cloning

中图分类号:

母茜 1，蔡勇 1，王肇悦2，张博润2，任正隆1,*. 采用自克隆技术构建高SOD、低双乙酰的啤酒酵母工程菌[J]. 食品科学, 2009, 30(19): 248-251.

MU Qian1，CAI Yong1，WANG Zhao-yue2，ZHANG Bo-run2，REN Zheng-long1,*. Construction of Industrial Brewing Yeast with High-SOD and Low-diacetyl Productivity Using Self-cloning Technique[J]. FOOD SCIENCE, 2009, 30(19): 248-251.

[1]	杨铭，郝晓娜，罗天淇，姜云芸，杨贞耐，朱宏，张健. 功能基因分析辅助筛选产双乙酰和乙偶姻乳酸菌[J]. 食品科学, 2020, 41(10): 117-123.
[2]	田勇，周督，邹双忆，孙星宇，郅琦，李福香，明建. 昆仑雪菊水溶性黄酮提取物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用[J]. 食品科学, 2019, 40(1): 162-168.
[3]	王建栋，吴越，陶阳，韩永斌，周剑忠，叶晓松，叶淑娴，邬超，叶明儒. 超声波辅助废啤酒酵母吸附蓝莓渣中花色苷的特性[J]. 食品科学, 2018, 39(21): 102-108.
[4]	任璐，王莹钰，杨沫，蔡天娇，雷宏杰. 啤酒高浓酿造中氨基酸对酵母发酵性能和啤酒色值的影响[J]. 食品科学, 2018, 39(14): 119-124.
[5]	高原，王福玲，贾琦，刘微，周艳岩，张晓萌，咸玥桐. 降香内生真菌代谢产物对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤保护作用[J]. 食品科学, 2018, 39(11): 196-200.
[6]	杜杰，郭彩霞. 废啤酒酵母菌对苹果汁中展青霉素的吸附作用[J]. 食品科学, 2016, 37(5): 56-61.
[7]	张佰清，孙栏梦. 脉冲强光对啤酒酵母的诱变效应[J]. 食品科学, 2015, 36(7): 153-157.
[8]	张丽媛1，马红丹1，赵邯郸1，徐丹丹1，曲静2，关淑艳1,，王丕武2,. 利用低温聚合酶链式反应技术提高大豆超氧化物歧化酶活性[J]. 食品科学, 2015, 36(5): 126-130.
[9]	王亚娜，夏杨毅，张丹，尚永彪，李洪军. 啤酒酵母细胞液脱腥处理对兔肉物理化学性质的影响[J]. 食品科学, 2015, 36(23): 89-94.
[10]	黄雅琴，李尽哲，段鸿斌，殷东林. 蛹虫草对紫外诱导果蝇氧化损伤的保护作用[J]. 食品科学, 2015, 36(21): 258-262.
[11]	李梅青1,2，张瑜1，代蕾莉1，孔祥淋1，杜晓妹1. Plackett-Burman试验设计及响应面法优化超声辅助提取明绿豆SOD工艺[J]. 食品科学, 2015, 36(2): 69-74.
[12]	赵洪源，贠建民，邵晓庆，齐丹. 凉州熏醋酿造中高产乙偶姻醋酸菌菌株筛选及其发酵条件优化[J]. 食品科学, 2015, 36(15): 98-105.
[13]	马红丹1，张丽媛1，赵邯郸1，徐丹丹1，曲静2，关淑艳1,，王丕武2,. 大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达[J]. 食品科学, 2015, 36(1): 135-139.
[14]	曾丽，李诚*，彭海鑫，于洋洋，周凤鸣，付刚. 酸奶中超氧化物歧化酶对模拟胃肠道消化液的稳定性[J]. 食品科学, 2014, 35(9): 274-278.
[15]	李居宁，易庆平. 青岛啤酒酵母和高浓酵母原生质体融合选育高浓酿造菌株[J]. 食品科学, 2014, 35(3): 173-177.

采用自克隆技术构建高SOD、低双乙酰的啤酒酵母工程菌

Construction of Industrial Brewing Yeast with High-SOD and Low-diacetyl Productivity Using Self-cloning Technique

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价