谷氨酸棒杆菌3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶基因的克隆与过量表达

doi:10.7506/spkx1002-6630-200905037

食品科学 ›› 2009, Vol. 30 ›› Issue (5): 162-165.doi: 10.7506/spkx1002-6630-200905037

谷氨酸棒杆菌3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶基因的克隆与过量表达

王玉华，于含松，刘加欢，刘回民，胡耀辉*

吉林农业大学食品科学与工程学院

收稿日期:2008-04-11 修回日期:2008-10-21 出版日期:2009-03-01 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 胡耀辉 E-mail:huyaohui@vip.163.com
基金资助:
吉林省农业科技发展重大计划项目(20065006)

Cloning and Over-expression of 3-Deoxy- α-arobino-heptulosonate -7-phosphate Synthase Gene in Corynebacterium glutamicum

WANG Yu-hua，YU Han-song，LIU Jia-huan，LIU Hui-min，HU Yao-hui*

(College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China)

Received:2008-04-11 Revised:2008-10-21 Online:2009-03-01 Published:2010-12-29
Contact: HU Yao-hui* E-mail:huyaohui@vip.163.com

摘要/Abstract

摘要：

本实验对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum) AS10111及其亚硝基胍诱变获得的丙氨酸和酪氨酸双营养缺陷型、抗3- 甲基色氨酸突变菌株JLC1 中3- 脱氧- α- 阿拉伯庚酮糖酸-7 磷酸合成酶(DS)基因进行克隆和序列分析，将突变体来源DS 基因构建pZ8-1-DSM 重组质粒，在谷氨酸棒杆菌突变株JLC1 中进行表达，重组菌株JLC1(pZ8-1-DSM)DS 酶活力分别是宿主菌和野生型菌株DS 酶活力的5.9 和7.3 倍，色氨酸产量达到14.90g/L，较宿主菌提高了65%。这表明通过在谷氨酸棒杆菌中过量表达3- 脱氧- α- 阿拉伯庚酮糖酸-7 磷酸合成酶基因可以有效提高该酶活力和色氨酸的产量。

关键词: 谷氨酸棒杆菌, L- 色氨酸 3- 脱氧- α- 阿拉伯庚酮糖酸-7 磷酸合成酶, 过量表达

Abstract:

Two 3-deoxy- α -arobino-heptulosonate-7-phosphate synthase (DS) genes from Corynebacterium glutamicum AS10111, and its alanine and tyrosine auxotrophic and anti-trimethyl-tryptophane mutant C. glutamicum JLC1 were cloned and sequenced. The recombinant plasmid pZ8-1-DSM was constructed by using the DS gene from C. glutamicum JLC1 and expressed in transformed C. glutamicum JLC1. The results showed that the DS activity of recombinant C. glutamicum JLC1 (pZ8-1-DSM)is 5.9 and 7.3 times of that of the host and C. glutamicum wild-type strains, respectively, and its L-tryptophan yield reaches 14.9 g/L, highter 65% than that of the host strain. In conclusion, the DS activity and L-tryptophan yield can be effectively improved by over-expression of DS gene in Corynebacterium glutamicum.

Key words: Corynebacterium glutamicum, L-tryptophan, 3-deoxy-α-arobino-heptulosonate-7-phosphate synthase (DS), over-expression

中图分类号:

王玉华，于含松，刘加欢，刘回民，胡耀辉*. 谷氨酸棒杆菌3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶基因的克隆与过量表达[J]. 食品科学, 2009, 30(5): 162-165.

WANG Yu-hua，YU Han-song，LIU Jia-huan，LIU Hui-min，HU Yao-hui*. Cloning and Over-expression of 3-Deoxy- α-arobino-heptulosonate -7-phosphate Synthase Gene in Corynebacterium glutamicum[J]. FOOD SCIENCE, 2009, 30(5): 162-165.

[1]	赵兰，刘诗梦，秦汉雄，王亚南，樊占青，闵伟红. 代谢工程改造谷氨酸棒杆菌生产甲硫氨酸[J]. 食品科学, 2020, 41(18): 98-104.
[2]	徐达，梅漫莉，徐庆阳,，陈宁. 生物素对L-缬氨酸发酵的影响[J]. 食品科学, 2019, 40(22): 213-218.
[3]	何继龙，李英滋，韩世宝，满德恩，郭脉海，战俊杰，张成林. 组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响及其发酵培养基的响应面优化[J]. 食品科学, 2019, 40(14): 91-98.
[4]	温冰，麻杰，李智祥，张成林，徐庆阳，陈宁. 基于基因转录和代谢物分析的异亮氨酸生产菌谷氨酸棒状杆菌YILW的理性改造[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 32-38.
[5]	高雪楠，张婵，尹胜，张秋晨，王成涛，徐宝财. 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的Candida tropicalis过量表达及其对木糖醇合成代谢的影响[J]. 食品科学, 2014, 35(7): 102-106.
[6]	张媛媛1,2，李家洲1. 基因组改组快速提高谷氨酸棒杆菌L-鸟氨酸产量[J]. 食品科学, 2012, 33(15): 206-209.
[7]	陈雪岚, 许正宏, 陶文沂. 谷氨酸棒杆菌argB基因的克隆及其在大肠杆菌中表达的初步研究[J]. 食品科学, 2005, 26(1): 31-35.
[8]	袁振远. 食品工业生化技术进展[J]. 食品科学, 1984, 5(5): 1-4.

谷氨酸棒杆菌3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶基因的克隆与过量表达

Cloning and Over-expression of 3-Deoxy- α-arobino-heptulosonate -7-phosphate Synthase Gene in Corynebacterium glutamicum

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 8

编辑推荐

Metrics

本文评价