抗羟基红花黄色素A抗血清的制备

doi:10.7506/spkx1002-6630-200903033

食品科学 ›› 2009, Vol. 30 ›› Issue (3): 150-154.doi: 10.7506/spkx1002-6630-200903033

抗羟基红花黄色素A抗血清的制备

侯世斌，吕芳，苏幼红，张富春，李江伟﹡

新疆大学生命科学与技术学院，新生物资源与基因工程重点实验室

收稿日期:2008-01-18 修回日期:2008-05-15 出版日期:2009-02-01 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 侯世斌 E-mail:hsbyzy121@sina.com
基金资助:
科技部省部共建新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金项目(XJDX0201-2006-04)

Preparation of Hydroxysafflor Yellow A Antiserum

HOU Shi-bin，LU Fang，SU You-hong， ZHANG Fu-chun，LI Jiang-wei*

(Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering of Xinjiang, College of Life Science and Technology,
Xinjiang University,Urumqi 830046,China)

Received:2008-01-18 Revised:2008-05-15 Online:2009-02-01 Published:2010-12-29
Contact: HOU Shi-bin E-mail:hsbyzy121@sina.com

摘要/Abstract

摘要：

目的：通过人工抗原的构建，制备抗羟基红花黄色素A(HSYA)的特异性抗血清。方法：采用直接合成法将HSYA 与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的共价偶联，分别合成免疫抗原HSYA-BSA 和包被抗原HSYAOVA，并进行相关鉴定；用合成的人工抗原免疫家兔，制得抗羟基红花黄色素A 的特异性抗血清，采用酶联免
疫法鉴定。结果：根据建立的标准曲线方程计算得HSYA 和BSA 的结合比是50:1，HSYA 和OVA 的结合比是112.8:1；理想的包被抗原的浓度为4μg/ml，抗血清和二抗的工作浓度分别为1:200 和1:2000；交叉反应实验表明，该抗体与芦丁、金合欢素的反应率均接近于零；亲和性实验结果表明，在0.25～2μg/ml 浓度范围内，抑制率与浓度呈线性关系，线性回归方程为y= － 16.213lgx+102.47(r=0.9575)，抑制中浓度IC50 为1.5μg/ml，最低检测限为0.250μg/ml。结论：通过直接偶联法可以成功制备出具有抗羟基红花黄色素A 的特异性抗血清。

关键词: 羟基红花黄色素A, 半抗原, 抗血清, 酶联免疫吸附测定

Abstract:

Objective: To construct artificial immunogen and prepare specific antiserum of hydroxysafflor yellow A (HSYA). Method Immunogen HSYA-BSA and coating antigen HSYA-OVA were prepared by immediate coupling method, and the characterizations of artificial antigen were conducted in color change, ultraviolet and infrared radiation spectrum shift.The polyclonal antiserum was produced from two rabbits immunized with conjugates HSYA-BSA, and then the antiserum was assayed with indirect ELISA method. Results: The ideal coating antigen concentration is 4μg/ml, the available anterium dilution 1:200, and the ideal IgG-HRP dilution is 1:2000. The affinity studies showed that the real detection limit of ELISA for standards is 250 ng/ml with an I50 value of 1.5μg/ml. The linear regression equation is as following: y=－16.213lgx+102.47(r=0.9575), with the linear range from 0.25 to 2μg/ml. Conclusion: The artificial immunogen can be synthesized by immediate coupling method and the polyclonal anti-HSYA antibodies with specificity have been obtained.

Key words: hydroxysafflor yellow A, hapten, antiserum, ELISA

中图分类号:

R927.2

侯世斌，吕芳，苏幼红，张富春，李江伟﹡. 抗羟基红花黄色素A抗血清的制备[J]. 食品科学, 2009, 30(3): 150-154.

HOU Shi-bin，LU Fang，SU You-hong， ZHANG Fu-chun，LI Jiang-wei*. Preparation of Hydroxysafflor Yellow A Antiserum[J]. FOOD SCIENCE, 2009, 30(3): 150-154.

[1]	张秋月，王刚，陈坤朋，潘道东，曾小群，吴振，郭宇星. 嗜酸乳杆菌在初始弱酸碱条件下对HT-29细胞免疫因子的调节作用[J]. 食品科学, 2020, 41(19): 191-197.
[2]	江东健，罗秀儿，何庆华. 基于噬菌体展示纳米抗体的绿色免疫PCR检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 256-261.
[3]	谢曼曼，李建武，王广彬，曾海娟，翟绪昭，丁承超，刘武康，刘箐. 副溶血性弧菌单克隆抗体的制备及特性鉴定[J]. 食品科学, 2017, 38(8): 63-68.
[4]	王静，马宁宁，宋洋. 杂环胺人工抗原的合成以及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 45-50.
[5]	赵勇娟，翁凌，颜龙杰，刘孟琦，张凌晶，曹敏杰. 竞争性ELISA检测鱼糜制品中蛋清含量[J]. 食品科学, 2017, 38(14): 284-289.
[6]	谢雪钦，刘舟. 免疫学方法在食源性副溶血性弧菌检测中的应用研究进展[J]. 食品科学, 2017, 38(13): 299-305.
[7]	王晓芬，鄢爱平，谭婷，毛雪金，刘俊俊，郭岚，万益群. 多效唑人工抗原的合成与鉴定[J]. 食品科学, 2016, 37(7): 134-139.
[8]	肖石妹，鄢爱平，肖芳，万益群，郭岚. 氯吡脲人工抗原的合成与鉴定[J]. 食品科学, 2016, 37(21): 183-188.
[9]	艾散江·艾海提，王瑾，关明. 高效液相色谱法分离分析药食同源红花中羟基红花黄色素A[J]. 食品科学, 2016, 37(12): 152-155.
[10]	薛艳锋，罗毅皓，刘祥军，谢凤莲，蒋国斌，孙万成. 金属硫蛋白基因表达水平评估青海不同地区的重金属污染程度[J]. 食品科学, 2015, 36(18): 177-181.
[11]	石贤爱1,2，裴世锋1，李向楠1，朱秋享1，叶小军3，樊海平3. 基于不同半抗原的呋喃唑酮代谢物免疫检测方法的建立与比较[J]. 食品科学, 2014, 35(8): 174-180.
[12]	吴春生，马良，胡媛媛，张宇昊. 真菌毒素人工抗原制备方法研究进展[J]. 食品科学, 2014, 35(5): 239-245.
[13]	刘儒彪，胡骁飞，张改平，王方雨，邓瑞广，刘璐，贾国超，刘玺. 甲硝唑人工抗原的合成及鼠源多抗的制备[J]. 食品科学, 2014, 35(19): 185-188.
[14]	王吕，邵辉峰，张斌，陈雪岚. 人工抗原苯并芘的化学合成与分析[J]. 食品科学, 2014, 35(19): 53-56.
[15]	陈波，何庆华，许杨. 小分子物质的非竞争免疫分析方法最新研究进展[J]. 食品科学, 2014, 35(15): 310-313.

抗羟基红花黄色素A抗血清的制备

Preparation of Hydroxysafflor Yellow A Antiserum

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价