食源性沙门氏菌磁性纳米粒子RT-PCR检测方法的研究

doi:10.7506/spkx1002-6300-200922069

食品科学 ›› 2009, Vol. 30 ›› Issue (22 ): 293-297.doi: 10.7506/spkx1002-6300-200922069

食源性沙门氏菌磁性纳米粒子RT-PCR检测方法的研究

张弛¹，楮庆华²，孟瑾³，杨捷琳²，顾鸣²，韩奕奕³，沈鹤柏⁴，赵渝⁴，郭鲁申⁴，李敏³，支援⁴，包建强^1,*

1.上海海洋大学食品学院 2.上海出入境检验检疫局 3.上海德诺产品检测有限公司 4.上海师范大学生命与环境科学学院

收稿日期:2009-07-03 出版日期:2009-11-15 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 包建强 E-mail:baojq@shou.edu.cn
基金资助:
上海市科学技术委员会资助项目(08391910900)；上海市教育委员会科研创新项目(09YZ169)；上海师范大学校基金项目(DKL835；SK200906)

Detection of Food-borne Salmonella by RT-PCR with Magnetic Nanoparticles

ZHANG Chi1，CHU Qing-hua2，MENG Jin3，YANG Jie-lin2，GU Ming2， HAN Yi-yi3，SHEN He-bai4，ZHAO Yu4，GUO Lu-shen4，LI Min3，ZHI Yuan4，BAO Jian-qiang1,*

1. College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China；2. Shanghai Entry-Exit
Inspection and Quarantine Bureau, Shanghai 200135, China；3. Shanghai Nod Product Testing Service Co. Ltd., Shanghai
200436, China；4. College of Life and Environment Sciences, Shanghai Normal University, Shanghai 200234, China

Received:2009-07-03 Online:2009-11-15 Published:2010-12-29
Contact: BAO Jian-qiang E-mail:baojq@shou.edu.cn

摘要/Abstract

摘要：

建立适合食源性沙门氏菌的RT-PCR 检测体系。根据沙门氏菌的转录起始因子rpoD 设计引物Salmrpod2/5，以rpoD 基因的mRNA 为检测对象，在样品制备时采用新型的磁性纳米粒子分离mRNA 技术，建立快速检测食品中沙门氏菌的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法。结果表明，Salmrpod2/5 引物能有效地将沙门氏菌与其他亲缘关系较近的肠杆菌科细菌区分开来。样品中沙门氏菌添加实验表明，该方法对沙门氏菌的检测下限为10CFU/25ml，检测时间少于18h。该方法具有灵敏、特异、快速的特点，适宜于在食品卫生行业中进行推广及应用。

关键词: 沙门氏菌, 磁性纳米粒子, 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)

Abstract:

The main object of this work was to establish a RT-PCR system suitable for Salmonella detection in foodstuffs. A primer Salmrpod2/5 based on the major sigma factor of Salmonella Methods was designed and mRNA in rpoD gene was analyzed. mRNA from bacteria was isolated by magnetic nanoparticles technique. A sensitive, time saving and specific method of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) combined with magnetic nanoparticle was developed to detect Salmonella. The results indicated amplification on the site of 260bp in Salmonella-specific gene fragment using the primer Salmrpod2/5. Signals from Salmonella were obtained and no cross-reaction was observed with other members of the Enterobacteriaceae. The detection limit of RT-PCR method was less than 10 CFU in 25 ml samples. The whole analysis took less than 18 h. In summary, this method shows advantages with highly specific, sensitive and quick in detection. It would be very useful for the rapid detection of Salmonella spp. in the food and the health industry.

Key words: Salmonella, magnetic nanoparticles(MNPs), reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)

中图分类号:

张弛1，楮庆华2，孟瑾3，杨捷琳2，顾鸣2，韩奕奕3，沈鹤柏4，. 食源性沙门氏菌磁性纳米粒子RT-PCR检测方法的研究[J]. 食品科学, 2009, 30(22 ): 293-297.

ZHANG Chi1，CHU Qing-hua2，MENG Jin3，YANG Jie-lin2，GU Ming2， HAN Yi-yi3，SHEN He-bai4，ZHAO Yu4，GUO Lu-shen4，LI Min3，ZHI Yuan4，BAO Jian-qiang1,*. Detection of Food-borne Salmonella by RT-PCR with Magnetic Nanoparticles[J]. FOOD SCIENCE, 2009, 30(22 ): 293-297.

[1]	郎晨晓，张一敏，朱立贤，梁荣蓉，毛衍伟，杨啸吟，韩广星，罗欣，董鹏程. 牛肉低温贮藏环境中沙门氏菌诱导耐酸响应的存在程度及其产生机制[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 68-74.
[2]	连玉晶，周一冉，孙欣，陈佳楠，郑振佳，王明林. 基于胺基功能化磁性纳米粒子改进QuEChERS方法结合GC-MS/MS检测果蔬中7 种农药残留[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 297-304.
[3]	吴有雪，吴美娇，田亚晨，王政，郭亮，刘程，方水琴，刘箐. 沙门氏菌检测生物传感器研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 339-345.
[4]	杨其乐，丁一峰，张宇，聂若男，李亚萌，王佳，王小红. 沙门氏菌噬菌体LPST144尾纤维gp38的序列分析及其结合活性[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 66-73.
[5]	李琳琼，洪静，张丽君，高瑀珑. 酸胁迫对鼠伤寒沙门氏菌抗酸性、细胞膜及膜蛋白的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(15): 27-36.
[6]	王虎虎，何淑雯，胡海静，白云，邵良婷，徐幸莲. 沙门氏菌生物菌膜形成的分子调控研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(13): 259-264.
[7]	闫玉卿，张一敏，董鹏程，毛衍伟，梁荣蓉，朱立贤，罗欣. 次氯酸钠对德尔卑沙门氏菌生物被膜的抑制作用及机制[J]. 食品科学, 2021, 42(13): 1-9.
[8]	李琳琼，洪静，张爱静，王鹏杰，高瑀珑. 酸胁迫处理对鼠伤寒沙门氏菌抗酸性的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(1): 33-40.
[9]	王虹懿，刘芳，孙芝兰，苏萌萌，诸永志，王道营，徐为民，彭景. Helveticin-M与绿原酸复配对大肠杆菌和肠炎沙门氏菌的抑菌效果及其机制[J]. 食品科学, 2020, 41(3): 68-74.
[10]	盛焕精，李怡谰，王泽维，牛沁雅，孟令缘，曹晨阳，李伟，廉鲁昕，杨保伟. IncI1和IncN质粒阳性沙门氏菌耐药及质粒接合转移特征[J]. 食品科学, 2020, 41(18): 77-84.
[11]	彭亚博，李晓婷，方婷，李长城，魏钊异，田裕心，陈沁雯，刘万宁. 鸡肉中沙门氏菌和背景菌群生长动力学模型[J]. 食品科学, 2019, 40(9): 7-15.
[12]	田牧雨，张一敏，董鹏程，毛衍伟，梁荣蓉，朱立贤，罗欣. 沙门氏菌和单增李斯特菌诱导性耐酸响应机制的研究进展[J]. 食品科学, 2019, 40(5): 316-322.
[13]	田牧雨，张一敏，董鹏程，毛衍伟，梁荣蓉，朱立贤，罗欣. 乙酰丙酸对沙门氏菌诱导性耐酸响应[J]. 食品科学, 2019, 40(23): 91-96.
[14]	黄巾凌，王嘉炜，牛沁雅，廉鲁昕，尹明远，武运，杨保伟. 沙门氏菌中与萘啶酮酸和环丙沙星抗性相关基因及突变的检测分析[J]. 食品科学, 2019, 40(22): 320-330.
[15]	刘立兵，耿云云，姜彦芬，刘思颖，孙晓霞，南汇珠，王建昌,. 沙门氏菌重组酶聚合酶检测方法的建立及应用[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 298-303.

食源性沙门氏菌磁性纳米粒子RT-PCR检测方法的研究

Detection of Food-borne Salmonella by RT-PCR with Magnetic Nanoparticles

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价