HPLC法测定牛奶中游离唾液酸和与低聚糖结合的唾液酸含量

食品科学 ›› 2008, Vol. 29 ›› Issue (5): 355-357.

HPLC法测定牛奶中游离唾液酸和与低聚糖结合的唾液酸含量

冯君, 杨国宇, 李宏基, 韩立强, 林茂旺

河南农业大学牧医工程学院；河南农业大学牧医工程学院

出版日期:2008-05-15 发布日期:2011-08-26

Determination of Contents of Free and Oligosaccharide-bound Sialic Acid in Milk by HPLC

FENG Jun, YANG Guo-Yu, LI Hong-Ji, HAN Li-Qiang, LIN Mao-Wang

College of Animal Husbandary and Veterinary,Henan Agricultural University

Online:2008-05-15 Published:2011-08-26

摘要/Abstract

摘要： 利用酸水解法把牛奶中的唾液酸释放出来,以邻苯二氨盐酸盐(10mg/ml)为衍生化试剂,在80℃水浴锅中衍生40min。采用Symmetry C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为1.0%的四氢呋喃水溶液(含0.2%磷酸)-乙腈(92:8);流速为1.0ml/min,柱温35℃,紫外检测波长为230nm。结果表明,唾液酸在10～320μg/ml范围内线性良好,平均回收率为95.7%。本方法具有灵敏度高,重复性好等特点,可准确测定牛奶中游离的唾液酸和与低聚糖结合的唾液酸含量。

关键词: 牛奶, N-乙酰神经氨酸, 高效液相色谱法

Abstract: Sialic acid in milk was released by acid hydrolysis,and then was derivated with O-pheny-lenediamine:2HCl(10mg/ml)at 80℃for 40 min.The conditions of HPLC were:Symmetry C18 column(250 mm×4.6 mm,5μm),the mobile phase 1.0% tetraphdrofuran(containing 0.2 % phosphoric acid)-acetonitrile(92:8),the flow rate 1.0ml/min,the column temperatue 35 ℃,and the detection wave length 230 nm.The results indicated that the linear rang of sialic acid was 10～320μg/ml.The average recovery was 95.7 %.The method has the characteristics of good reproducibility and high sensitivity.It can be used to determine the contents of the free and oligosaccharide-bound sialic acid in milk.

Key words: milk, N-acetylneuraminic acid, high performance liquid chromatography

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