β-Casomorphin-7的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立

摘要/Abstract

摘要： β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7)是一个有代表性的乳源外啡肽,有调节动物消化道运动和采食、内分泌、免疫等多种生物学功能。本研究以β-Casomorphin-7与人血清白蛋白(HSA)经戊二醛交联的复合物作为包被抗原;一抗为鸡抗β-Casomorphin-7与牛血清白蛋白(BSA)交联复合物的抗血清;酶标二抗为兔抗鸡IgG经戊二醛与辣根过氧化物酶(HRP)交联的复合物。包被抗原和一抗的稀释度经方阵稀释实验确定。本实验所建立的竞争ELISA方法的孔间差异为3.3%,板间差异为8.6%,检测灵敏度20ng/ml,检测范围20～320ng/ml,在实验浓度范围内。β-Casomor-phin-7的抗血清与β-内啡肽、脑啡肽、强啡肽、精氨酸降压素和神经降压素等活性肽未显示免疫交叉反应。表明所建立的方法有较高的特异性,可用于酪啡肽的体内功能研究。

关键词: &beta, -Casomorphin-7, ELISA, 多克隆抗体

Abstract: Casomorphin -7,as one of representative exorphins derivedfrommilk,functioned physiologically on regulating food intake and gastroin testinal mobility,endocrine and im munity of animal.We tried to establi sh ELISA detection method forβ-Casomorphin -7.Nunc96-well microtiter plate was used as so lid -phase.The coating antigen on solid -phase wasβ-Casomorphin -7/HSA conjugation complex.The conce ntration for coating antigen and antibody were determined by dilu tion experiment.The result showed t hat detection forβ-Casomorphin -7with competitive inhibition ELISArepea table with lowbackground OD,inter well variation was about 3.3%,inter plate variation about 8.6%,detection sensitivity20ng /ml and the detectionrange20-320ng /ml.There was no immuno -across reactionofβ-Casomorphin -7,antibodies withβ-EP,EK,Dyn,AVPand NP.The results showedth at the methodwas of highspecificity and co uldbe used for studying onβ-Casomorphin -7s function.

Key words: Casomorphin -7, ELISA , Polyclonal antibody

张源淑, 钟海涛, 邹思湘, 陈伟华. β-Casomorphin-7的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立[J]. 食品科学, 2002, 23(2): 94-97.

ZHANG Yuan-Shu, ZHONG Hai-Tao, ZOU Si-Xiang, CHEN Wei-Hua. Establishment of Enzyme -Linked Immunoso bent Assay(ELISA)forβ-Casomorphin -7[J]. FOOD SCIENCE, 2002, 23(2): 94-97.

[1]	王晓瑞，邱红玲，王寿利，朱海华，周莉，平洋，谭静，王永，王慧. 抗副溶血弧菌OMPK单克隆抗体的制备及其ELISA双抗体夹心检测方法建立[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 319-325.
[2]	张彪，黄娜，张万利，王硕，生威. 基于上转换纳米材料与磁分离的荧光免疫分析方法检测食品中酪胺[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 270-275.
[3]	靳登鹏，周雄，刘焕，杨娇，黄卓权，卜玲玲，柯倩华，柳春红. 基于免疫亲和层析和ProteoMiner处理的母乳乳清蛋白质组学分析[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 54-60.
[4]	姚添淇，劳翠瑜，王士峰，胡桂平，张世伟. 糖皮质激素广谱特异性单克隆抗体的制备及其ic-ELISA方法的建立[J]. 食品科学, 2019, 40(14): 186-191.
[5]	赵建华，李浩霞，尹跃，王亚军，李彦龙，樊云芳，安巍，曹有龙. 枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2019, 40(10): 77-83.
[6]	戴杰雨，姜永华，张玉洁，王豪杰，刘潇然，刘翠华，任小林. 苹果转录因子MdHB1的原核表达与多克隆抗体制备[J]. 食品科学, 2018, 39(8): 69-76.
[7]	刘姚，韦倩妮，王弘，杨金易，孙远明，徐振林，沈兴，李向梅，雷红涛. 直接竞争ELISA法检测蜂蜜中氯霉素残留[J]. 食品科学, 2018, 39(16): 336-342.
[8]	易晓男，任清华，程炜，孙姜，齐斌，王立梅. 高产β-葡萄糖苷酶工程菌株的构建及其在2,6-二甲氧基对苯醌发酵制备中的应用[J]. 食品科学, 2017, 38(8): 69-73.
[9]	李姝静，周自若，周威，王心蕊，袁丽. 根皮素与两种β-环糊精衍生物的包合作用及性质[J]. 食品科学, 2017, 38(7): 11-16.
[10]	周立华，李艳. 自选高产β-D-葡萄糖苷酶酿酒酵母KDLYS9-16的酿酒性能[J]. 食品科学, 2017, 38(6): 123-129.
[11]	朱帆，李焕婷，王弘，杨金易，徐振林，雷红涛，肖治理，孙远明，沈玉栋. 间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测番茄酱和果汁中异细交链孢菌酮酸[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 250-254.
[12]	王静，马宁宁，宋洋. 杂环胺人工抗原的合成以及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 45-50.
[13]	翟绪昭，曾海娟，王广彬，董庆利，谢曼曼，丁承超，刘武康，王淑娟，李杰，刘箐. 阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体的制备及其间接竞争-ELISA检测方法[J]. 食品科学, 2017, 38(20): 268-272.
[14]	陈其玲，任晓宁，王玲，田雨，赵美静，宋巧智，刘树文. 酒酒球菌β-葡萄糖苷酶活性与耐酸胁迫能力的相关性分析[J]. 食品科学, 2017, 38(2): 115-120.
[15]	刘二伟，杨绍青，闫巧娟，江正强. 泡盛曲霉液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件优化[J]. 食品科学, 2017, 38(16): 29-35.

β-Casomorphin-7的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立

Establishment of Enzyme -Linked Immunoso bent Assay(ELISA)forβ-Casomorphin -7

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价