基于罗丹明B磺酸钠脂质体生物传感器检测免疫球蛋白

doi:10.7506/spkx1002-6630-201318028

食品科学

基于罗丹明B磺酸钠脂质体生物传感器检测免疫球蛋白

严喜鸾，肖竦，曾哲灵

1.南昌大学环境与化学工程学院，江西南昌 330031；2.贵阳医学院化学教研室，贵州贵阳 550004；
3.南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌 330047

出版日期:2013-09-25 发布日期:2013-09-27

Detection of Human IgG with Biosensor Based on SRB-Encapsulated Liposomes

YAN Xi-luan，XIAO Song，ZENG Zhe-ling

1. School of Environment and Chemical Engineering, Nanchang University, Nanchang 330031, China；
2. Chemistry Teaching and Research Section, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, China；
3. State Key Laboratory of Food Science and Technology, Nanchang University, Nanchang 330047, China

Online:2013-09-25 Published:2013-09-27

摘要/Abstract

摘要：

目的：基于罗丹明B磺酸钠负载的荧光脂质体构建生物传感器，实现对人免疫球蛋白(hIgG)的高灵敏分析检测。方法：以磁性微球作为分离和富集载体，采用薄膜水化法将荧光物质罗丹明B磺酸钠盐(SRB)包裹在脂质体的内水相中，结合免疫夹心反应模式，构建基于荧光脂质体的人免疫球蛋白生物传感器；免疫反应结束后，加入无水乙醇破脂质体膜，从而瞬间释放出脂质囊内的大量SRB分子，实现对hIgG抗原的高灵敏度荧光分析。考察SRB脂质体在10d内的稳定性，优化磁性微球和生物素化抗体用量等条件。结果：荧光脂质体稳定性较好，hIgG的测定线性范围为1～200ng/mL，最低检出质量浓度为1ng/mL(即6.25pmol/L)。结论：该方法无需标记、快速、简便、灵敏，为免疫球蛋白的高灵敏度检测提供了一种新途径。

关键词: 脂质体, 磁性微球, 免疫球蛋白, 生物传感器, 荧光分析

Abstract:

Purpose: To fabricate a biosensor based on sulforhodamine B sodium salt (SRB)-encapsulating liposomes
for highly sensitive detection of human IgG (hIgG). Methods: An immunoliposome encapsulating SRB was prepared
and used to develop a fluorescent biosensor by the film dispersion method. Magnetic beads (MB) were employed as
the immobilization and separation carrier. By enzyme-linked immunospecific assay (ELISA) method, MB modified
anti-IgG antibodies were linked to SRB-encapsulating liposomes, which instantaneously released a great quantity of
SRB molecules upon alcohol addition, resulting in highly sensitive fluorescent detection of hIgG. SRB-encapsulating
liposomes had good stability in 10 days. The optimized condition was as follows: 60 μg of MB modified anti-IgG
antibody and 0.2 μg of biotin-labeled anti-IgG antibody Results: The lowest detectable concentration of hIgG was 1 ng/mL (6.25
pmol/L), and the linear range was 1 to 200 ng/mL. Conclusions: This lable-free protocol can provide a rapid, simple and
sensitive approach to detecting IgG.

Key words: liposomes, magnetic beads, immunoglobulin, biosensor, fluorescent analysis

严喜鸾，肖竦，曾哲灵. 基于罗丹明B磺酸钠脂质体生物传感器检测免疫球蛋白[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201318028.

YAN Xi-luan，XIAO Song，ZENG Zhe-ling. Detection of Human IgG with Biosensor Based on SRB-Encapsulated Liposomes[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201318028.

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