摘要: 摘 要:利用PCR扩增出地皮菜中一种新型水应激蛋白(water stress protein ,WSP)的基因(Gene bank 序列号:KF003026),连接到原核表达载体pET28a上,测序鉴定后转化入大肠杆菌BL21,获得一种新型水应激蛋白表达工程菌;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达及镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化后,得到了带6×His标签、分子量大小为40kD的可溶性目的蛋白,称其为water stress protein 1(WSP1)。MTT实验结果表明,WSP1蛋白可以抑制结肠癌细胞SW480的生长,而对正常结肠上皮FHC细胞无明显作用;DAPI细胞核染色结果表明,该蛋白能够诱导SW480细胞凋亡小体的形成;Western blot结果显示,WSP1蛋白能够促进procasepase-3和procaspase-8的活化剪切。以上结果表明,WSP1蛋白能够明显的抑制结肠癌SW480细胞的生长,其机制与其诱导该细胞凋亡有关。
中图分类号: