芴完全抗原和多克隆抗体制备与鉴定

doi:10.7506/spkx1002-6630-201509020

食品科学

芴完全抗原和多克隆抗体制备与鉴定

王男男，李岩松，孟星宇，周玉*，乔斌，孙宇，胡盼，卢士英，任洪林，柳增善

人兽共患病研究教育部重点实验室，吉林大学动物医学学院，人兽共患病研究所，吉林长春 130062

出版日期:2015-05-15 发布日期:2015-05-11

Preparation and Characterization of Fluorene Complete Antigen and Anti-fluorene Polyclonal Antibody

WANG Nannan, LI Yansong, MENG Xingyu, ZHOU Yu*, QIAO Bin, SUN Yu, HU Pan, LU Shiying, REN Honglin, LIU Zengshan

Key Laboratory of Zoonosis, Ministry of Education, Institute of Zoonosis, College of Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China

Online:2015-05-15 Published:2015-05-11

摘要/Abstract

摘要：

以9-芴乙酸（fluorene-9-aceticacid，FLU）为原料，经活性酯法合成完全抗原FLU-牛血清白蛋白（bovineserum albumin，BSA）和FLU-卵清白蛋白（ovalbumin，OVA），偶联产物通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及紫外扫描法鉴定。使用FLU-BSA足垫免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体，间接酶联免疫吸附实验（enzyme linkedimmunosorbent assay，ELISA）测得多克隆抗体效价为51 200，间接竞争ELISA方法测得芴多克隆抗体的特异性，与荧蒽的交叉反应率为12%，与其他14 种多环芳烃交叉反应不明显。

关键词: 9-芴乙酸, 完全抗原, 多克隆抗体, 酶联免疫吸附实验

Abstract:

Fluorene-9-acetic acid (FLU) was chosen as the hapten and was coupled with bovine serum albumin (BSA)
and ovalbumin (OVA) respectively to prepare complete antigens by active ester method. The complete antigens were
characterized by native polyacrylamide gel electrophoresis and ultraviolet spectrum. FLU-BSA was used to obtain
polyclonal antibody through footpad injection of BALB/c mice. The titer was 51 200 as measured by indirect enzyme linked
immunosorbent assay (ELISA), and the cross-reactivity with fluoranthene was measured by indirect competitive ELISA
to be 12% while having no obvious cross-reaction with 14 other kinds of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs). This
ELISA method for fluorene can lay the foundation for further experimental research.

Key words: fluorene-9-acetic acid, complete antigen, polyclonal antibody, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)

中图分类号:

TS201.6

王男男，李岩松，孟星宇，周玉*，乔斌，孙宇，胡盼，卢士英，任洪林，柳增善. 芴完全抗原和多克隆抗体制备与鉴定[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201509020.

WANG Nannan, LI Yansong, MENG Xingyu, ZHOU Yu*, QIAO Bin, SUN Yu, HU Pan, LU Shiying, REN Honglin, LIU Zengshan. Preparation and Characterization of Fluorene Complete Antigen and Anti-fluorene Polyclonal Antibody[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201509020.

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