傅 婷,王 丹,万 骥,唐云明*
FU Ting, WANG Dan, WAN Ji, TANG Yunming*
摘要:
新鲜猪肝经匀浆、缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析及Superdex-200凝胶过滤层析,获得电泳纯的乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)。纯化结果显示:该酶比活力为1 622.33 U/mg,回收率为29.05%,纯化倍数为34.58;该酶分子质量约为171.79 kD,亚基分子质量约为43.68 kD。ADH酶学性质研究显示:最适反应温度和pH值分别为45 ℃和10.0;在25~45 ℃及pH 7.5~9.0范围内稳定性较好;最适条件下测得该酶对乙醇的Km值为19 mmol/L;正丁醇、氯仿、异丙醇、十二烷基硫酸钠、草酸、Zn2+、Cu2+、Ag+对该酶的抑制作用最强,Mg2+对该酶有激活作用,EDTA对该酶有双重作用。
中图分类号: