廖海君,李蕊伽,陶 敏,白亚娟,唐 菁,唐云明*
LIAO Haijun, LI Ruijia, TAO Min, BAI Yajuan, TANG Jing, TANG Yunming*
摘要:
将杂优-2平菇菌丝进行液体培养,发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)-Sepharose fastflow层析和Superdex-200 prep grade层析等方法纯化,获得了电泳纯的杂优-2平菇漆酶,并对纯化的漆酶进行了部分酶学性质研究。结果显示,杂优-2平菇漆酶比活力为115 U/mg,分子质量约为244.0 kD,亚基分子质量约为85.6 kD。最适反应pH值和最适反应温度分别为5.0和55 ℃,在pH 6.0~8.0及40~55 ℃范围内稳定性较好;最适条件下,以2,2’-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)为底物的Km值为2.1 mmol/L,最大反应速率(vmax)为0.117 μmol/(min·L)。Fe2+、抗坏血酸对该酶活性具有完全抑制作用,乙二胺四乙酸、Ag+、Mg2+、Li+对该酶活性影响较小;草酸、甲醇、正丁醇、K+、Ca2+、Ba2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Mn2+、Co2+对该酶活性有不同程度的抑制作用;Cu2+激活作用不明显;尿素、乙醇、异丙醇对该酶活性具有激活作用。
中图分类号: