菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析

doi:10.7506/spkx1002-6630-201623035

食品科学

菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析

侯进慧，张翔，乔高翔

徐州工程学院食品工程学院，江苏徐州 221111

出版日期:2016-12-15 发布日期:2016-12-21

Cloning, Expression and Activity of an Endo-1,4-β-D-Glucanase from Pantoea ananatis

HOU Jinhui, ZHANG Xiang, QIAO Gaoxiang

College of Food Engineering, Xuzhou Institute of Technology, Xuzhou 221111, China

Online:2016-12-15 Published:2016-12-21

摘要/Abstract

摘要： 利用分子克隆的方法，对一种源于菠萝泛菌的内切葡聚糖酶（即β-1,4-内切葡聚糖酶）基因进行克隆、原核表达，利用Ni-NTA吸附柱对表达的重组内切葡聚糖酶进行纯化，分析重组酶的活性。研究结果显示，此重组内切葡聚糖酶含1 个1 002 bp的开放阅读框，编码334 个氨基酸序列，重组酶在大肠杆菌细胞中的表达量占可溶性蛋白的50%以上，经过纯化获得了纯度高于95%的内切葡聚糖酶蛋白，酶活力可以达到2 245 U/mL。

关键词: 内切葡聚糖酶, 原核表达, 活性分析

Abstract: The endo-1,4-β-D-glucanase gene from Pantoea ananatis was cloned and expressed in Escherichia coli. The
recombinant enzyme was purified with Ni-NTA affinity chromatography and its activity was analyzed. The results showed
that the recombinant glucanase gene contained a 1 002 bp-length open reading frame encoding two putative peptides of
334 amino acids. The expression of the recombinant enzyme in E. coli reached up to 50% of the total soluble protein. After
purification, the purity was higher than 95% and glucanase activity was as high as 2 245 U/mL.

Key words: endo-1,4-β-D-glucanase, prokaryotic expression, activity analysis

中图分类号:

Q939.9

侯进慧，张翔，乔高翔. 菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201623035.

HOU Jinhui, ZHANG Xiang, QIAO Gaoxiang. Cloning, Expression and Activity of an Endo-1,4-β-D-Glucanase from Pantoea ananatis[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201623035.

[1]	夏小雨，李晗，王震宇，谭晓怡，程述震，杜明. 人源重链铁蛋白纯化及其纳米粒制备[J]. 食品科学, 2020, 41(12): 91-98.
[2]	田万帆，刘骥，赵燕英，唐俊妮. 金黄色葡萄球菌新型肠毒素SEK原核表达、纯化及溶液构象分析[J]. 食品科学, 2019, 40(4): 138-145.
[3]	李柳，郑喆，吴凤玉，郝一江，赵笑，曹永强，余志坚，陈超，杨贞耐,. 甲醇芽孢杆菌凝乳酶的重组表达及其结构特性[J]. 食品科学, 2019, 40(22): 39-46.
[4]	赵建华，李浩霞，尹跃，王亚军，李彦龙，樊云芳，安巍，曹有龙. 枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2019, 40(10): 77-83.
[5]	戴杰雨，姜永华，张玉洁，王豪杰，刘潇然，刘翠华，任小林. 苹果转录因子MdHB1的原核表达与多克隆抗体制备[J]. 食品科学, 2018, 39(8): 69-76.
[6]	张玉梅，李鹏鹏，张牧焓，王晶晶，王道营，徐为民. 麻鸭HSP90α基因的原核表达、纯化及磷脂结合活性的鉴定[J]. 食品科学, 2018, 39(2): 99-104.
[7]	孙莹，潘思安，李萌萌，邓威威，张正竹. 酿酒酵母和大肠杆菌鸟嘌呤脱氨酶基因的克隆、原核表达及活性测定[J]. 食品科学, 2018, 39(18): 139-144.
[8]	韩艳文，廉双秋，韩云云，池明，闫师杰. 鸭梨POD基因的原核表达及成熟度和降温方法对其表达量的影响[J]. 食品科学, 2017, 38(9): 40-45.
[9]	刘骥，杨帆，田万帆，龙虎，孙思雨，周玉珊，赵燕英，唐俊妮. 金黄色葡萄球菌M型肠毒素原核表达、纯化、鉴定及溶液构象分析[J]. 食品科学, 2017, 38(24): 40-46.
[10]	杨菊梅，马建忠，王永刚，邓子兵，魏艳，潘博，李印武. 草莓轻型黄边病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及其免疫原性分析[J]. 食品科学, 2017, 38(16): 71-78.
[11]	陈信全，都立辉，鞠兴荣，吴学友，袁建，何荣. 乳酸片球菌素PA-1在大肠杆菌中的表达与纯化[J]. 食品科学, 2016, 37(3): 97-102.
[12]	丁承超，谢曼曼，曾海娟，刘箐. 弧菌外膜蛋白Ompk基因序列分析及其多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2016, 37(23): 141-146.
[13]	陈鹏，封雪，王磊，邓丹丹，李学俊. 苦荞10 kD过敏原的重组表达及部分性质分析[J]. 食品科学, 2014, 35(3): 128-133.
[14]	陈海，姜海洋，吴睿，肖安蓬，何杰，李冉，马璐阳，任阳阳，李树红. 鲢鱼重组Cystatin的原核表达、鉴定及对铜绿假单胞菌的抑制作用[J]. 食品科学, 2014, 35(21): 133-137.
[15]	刘回民，程国栋，陈方奇，郑明珠，詹冬玲，刘景圣. 玉米半胱氨酸蛋白酶突变体W308C的原核表达和酶学性质表征[J]. 食品科学, 2014, 35(15): 122-126.

菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析

Cloning, Expression and Activity of an Endo-1,4-β-D-Glucanase from Pantoea ananatis

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价