食品科学 ›› 2017, Vol. 38 ›› Issue (10): 18-23.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201710004
乔超超,王新侠,李鹤宾,倪 辉,肖安风,朱艳冰
QIAO Chaochao , WANG Xinxia , LI Hebin , NI Hui , XIAO Anfeng , ZHU Yanbing
摘要: 利用易错聚合酶链式反应技术引入随机诱变,构建一个Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶 突变体库。经过筛选,获得一个芳香基硫酸酯酶热稳定性提高的突变株4-153。序列分析表明,该突变体有2 个氨基 酸替换,包括D84A和H260L。以对硝基苯硫酸钾为底物,突变酶4-153(M4-153)的最适反应温度为55 ℃,在45、 50、55、60 ℃处理30 min后,M4-153分别保留85%、83%、48%和13%的残留酶活力。野生型酶(WT)在45、 50、55、60 ℃处理30 min后,分别保留79%、68%、21%和1%的残留酶活力。M4-153与WT相比具有更好的热稳定 性。M4-153的最适反应pH值为8.0,在pH 5.0~9.0范围内保持稳定。EDTA对突变酶的抑制作用表明,金属离子在 突变酶的催化过程中起重要作用。M4-153对一些洗涤剂,包括Triton X-100、Tween 20、Tween 80和Chaps,有好的 耐受性。M4-153对龙须菜粗多糖硫酸基团的脱硫率为79.5%。
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