食品科学 ›› 2017, Vol. 38 ›› Issue (16): 86-91.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201716013
马清,蔡瑞,姜风超,马立娟,杜丽平,肖冬光
MA Qing, CAI Rui, JIANG Fengchao, MA Lijuan, DU Liping, XIAO Dongguang
摘要: 为研究N-糖基化对里氏木霉β-甘露聚糖酶(β-mannanase,Man1)在毕赤酵母GS115中异源表达的影响, 采用定点突变的方法,将Man1上3 个N-糖基化修饰位点(N131、N158和N329)上的天冬酰胺用中性谷氨酰胺取 代。结果发现,N-糖基化位点的突变对Man1的转录水平无明显影响,突变后获得的Man1表观分子质量有轻微下 降,与Man1相比,3 个突变体N131、N158和N329的甘露聚糖酶活力分别降低了85.43%和79.48%和16.3%;而热稳 定性分别提高了7.87%、13.5%和15.37%。由此可见,N-糖基化修饰对于β-甘露聚糖酶的高效表达是必需的,其中 N131和N158糖基化位点尤为重要,但是会稍微降低β-甘露聚糖酶的热稳定性。
中图分类号: