食品科学 ›› 2017, Vol. 38 ›› Issue (21): 119-125.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201721019
申超群,陈健
SHEN Chaoqun, CHEN Jian
摘要: 采用超声波辅助水提、乙醇沉淀、DEAE-52阴离子交换层析法从树蝴蝶(Lobaria koorkauae Yoshim)中分离纯化得到多糖LKY-I。采用凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography,GPC)结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100分离,测定其分子质量分布及纯度;利用傅里叶变换红外光谱、气相色谱和核磁共振对其结构进行解析;通过体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) free radical,ABTS+·)以及对铁离子还原力(ferric-reducing antioxidant power,FRAP)测定结果,评价LKY-I的抗氧化能力;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)测定LKY-I对肿瘤细胞HepG-2、HCC827、MCF-7增殖的抑制作用。结果显示:LKY-I的总糖含量为88.91%,重均分子质量为61?598?D,是组分均一的多糖,由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,其物质的量比为1.1∶2.0∶46.5∶28.5∶20.5。傅里叶变换红外光谱分析结果显示,LKY-I具有一般多糖类物质的特征吸收峰,单糖残基以吡喃环的形式存在。高碘酸氧化、Smith降解以及核磁共振分析表明,LKY-I是含有甘露糖的D-吡喃糖环,包括α和β两种构型,由24.68%的(1→6)或(1→)连接的糖苷键组成。在250~10?000?μg/mL的质量浓度范围内,随着多糖质量浓度的升高,LKY-I对DPPH自由基、ABTS+·的清除率逐渐增大,当质量浓度为10?000?μg/mL时,清除率分别达44.12%、24.74%,FRAP值可达0.071?17?mmol/L,与100?μg/mL?VC(0.072?31?mmol/L)相当。在125~2?000?μg/mL范围内,随着多糖质量浓度的增加,LKY-I对癌细胞的增殖抑制率逐渐增大。当质量浓度为2?000?μg/mL时,LKY-I对肿瘤细胞HepG-2、HCC827、MCF-7增殖的抑制率达到半抑制浓度,说明树蝴蝶水洗多糖LKY-I具有一定的抗肿瘤活性。
中图分类号: