牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达

doi:10.7506/spkx1002-6630-201113044

食品科学 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (13): 201-204.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201113044

牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达

赵建乐1，陈琛2，闫茂仓3，张小莺1,*，李引乾1，张三东1

1. 西北农林科技大学动物医学院
2. 陕西理工学院陕西省资源生物重点实验室
3. 浙江省海洋水产养殖研究所

出版日期:2011-07-15 发布日期:2011-07-02
基金资助:
西北农林科技大学引进人才启动专项基金项目(01140407)；2009年西北农林科技大学基本科研业务费青年项目(109021003)； 2010年温州市科技计划项目(S20100016)

Expression of Bovine Neutrophilβ-Defensin BNBD11 Gene in Escherichia coli

ZHAO Jian-le1，CHEN Chen2，YAN Mao-cang3，ZHANG Xiao-ying1,*，LI Yin-qian1，ZHANG San-dong1

(1. College of Veterinary Medicine, Northwest A & F University, Yangling 712100, China； 2. Bio-resources Key Laboratory of Shaanxi Province, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 723000, China； 3. Zhejiang Mariculture Research Institute, Wenzhou 325005, China)

Online:2011-07-15 Published:2011-07-02

摘要/Abstract

摘要： 探索牛β-防御素BNBD11原核表达及纯化的技术路线。根据已报道的BNBD11的氨基酸序列，兼顾大肠杆菌密码子偏好性，设计合成BNBD11基因。构建重组表达载体pET32a-BNBD11，转入E.coli BL21，用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。经SDS-PAGE检测融合蛋白结果显示，大部分表达产物以可溶形式存在，用Ni Sepharose柱层析纯化融合蛋白。融合蛋白经甲酸切割后，再次用Ni Sepharose柱层析去除带有His-Tag的杂蛋白，最终得到纯化的重组BNBD11。实验实现了BNBD11在大肠杆菌中的融合表达，并纯化了获得的重组BNBD11。

关键词: 牛中性粒细胞β-防御素11（BNBD11）, 融合表达, 大肠杆菌

Abstract: In order to explore the technical route for prokaryotic expression and purification of bovine neutrophilβ-defensin 11 (BNBD11), BNBD11 gene was synthesized using preferred condons of E. coli, according to the reported amino acid sequence of BNBD11. The recombinant expression plasmid pET32a-BNBD11 was constructed and then transformed into E. coli BL21. The expression of BNBD11 in E. coli BL21 was induced by isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG). SDS-PAGE showed that most expressed products were soluble. The fusion protein was purified by Ni Sepharose column chromatography. After the cleavage of the fusion protein by formic acid, Ni Sepharose column was used again to remove proteins with His-Tag and the purified recombinant BNBD11 was achieved. Therefore, BNBD11 was successfully expressed in E. coli, and the recombinant BNBD11 was obtained.

Key words: β-defensin, BNBD1, fusion expression, Escherichia coli

中图分类号:

Q786

赵建乐,陈琛,闫茂仓,张小莺,李引乾,张三东. 牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达[J]. 食品科学, 2011, 32(13): 201-204.

HANG Yu-jie，LI Xue-ying，YANG Xian-shi,，GUO Quan-you. Expression of Bovine Neutrophilβ-Defensin BNBD11 Gene in Escherichia coli[J]. FOOD SCIENCE, 2011, 32(13): 201-204.

[1]	甘玉飞，薛正莲，周杰，王芳，王洲，刘艳. 黏质沙雷菌磷脂酶A1辅助蛋白S对表达宿主菌大肠杆菌抑制作用机制[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 45-51.
[2]	孙悦，刘佳伊，陈璐，杜宏，白凤翎，吕欣然，张德福，郭晓华，励建荣. 抗耐药性大肠杆菌乳酸菌的筛选及抑菌机制[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 121-127.
[3]	门佳轩，熊博，郝亚男，李旋，刘益宁，谢希贤. 代谢工程优化大肠杆菌高效合成L-苯丙氨酸[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 114-120.
[4]	王虹懿，刘芳，孙芝兰，苏萌萌，诸永志，王道营，徐为民，彭景. Helveticin-M与绿原酸复配对大肠杆菌和肠炎沙门氏菌的抑菌效果及其机制[J]. 食品科学, 2020, 41(3): 68-74.
[5]	吴丽娜，董鹏程，张一敏，毛衍伟，梁荣蓉，杨啸吟，朱立贤，罗欣. 大肠杆菌O157:H7在不锈钢表面生物膜形成能力及其与菌株的特性关系[J]. 食品科学, 2020, 41(22): 127-132.
[6]	李强，韩亚昆，蒋帅，张悦，吴鹤云，徐庆阳，谢希贤. 代谢工程改造大肠杆菌合成反式-4-羟基-L-脯氨酸[J]. 食品科学, 2020, 41(2): 202-207.
[7]	夏丹丹，赵莹莹，马盼盼，王深垒，马常阳，郜晓峰，康文艺. 大肠杆菌DNA定性标准物质的制备及在枸杞子污染检测中的应用[J]. 食品科学, 2020, 41(18): 267-274.
[8]	余兰林，姬赛赛，禹金龙，付文静，张林，李蛟龙，高峰，江芸. 盐应激对大肠杆菌O157:H7存活和毒力基因表达的影响[J]. 食品科学, 2020, 41(14): 95-101.
[9]	吴克刚，赵欣欣，段雪娟，柴向华，于泓鹏，刘晓丽，范宇婷. 芳樟醇气相抗菌活性与作用机制[J]. 食品科学, 2020, 41(1): 61-67.
[10]	李萍，林洪，童贻刚，王静雪. 1株T1样噬菌体vB_EcoS_IME18的分离鉴定及其受体分析[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 79-86.
[11]	禹金龙，董晨，王娴静，姬赛赛，付文静，胡洁，江芸. 牛源性非O157大肠杆菌的分离与鉴定[J]. 食品科学, 2019, 40(4): 299-304.
[12]	张爱静，李琳琼，朱蕾，王鹏杰，高瑀珑. 热胁迫和培养温度对大肠杆菌抗热性的影响[J]. 食品科学, 2019, 40(22): 75-80.
[13]	周陆红，张鹏飞，张杰，吴聪明，唐晓双，郝丹，王新. 屠宰猪中大肠杆菌毒力基因检测及耐药性分析[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 264-268.
[14]	王娴静，董晨，禹金龙，胡洁，付文静，张苏，江芸. 酸应激对大肠杆菌O157:H7生物菌膜形成的影响[J]. 食品科学, 2019, 40(19): 1-7.
[15]	王淑娟，刘程，方水琴，田亚晨，董庆利，王翔，许东坡，刘箐,. 基于钴金属有机骨架材料（ZIF-67）催化性能的牛奶中大肠杆菌O157:H7快速定量检测[J]. 食品科学, 2019, 40(18): 323-328.

牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达

Expression of Bovine Neutrophilβ-Defensin BNBD11 Gene in Escherichia coli

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价