摘要:
用PCR 方法从E.coli BL21(DE3)中获得麦芽糖转糖基酶基因,将该基因插入到酵母表达载体pPIC9K 的α分泌信号开放阅读框的下游,对重组质粒pPIC9K-MalQ 所含的外源片段进行双向测序。将测序正确的重组质粒用内切酶Sal Ⅰ线性化,电穿孔转化到GS115 感受态细胞中,G418 梯度筛选高拷贝转化菌及PCR 鉴定目的基因的整合,1% 甲醇诱导表达。经薄层色谱分析粗酶液处理的麦芽二糖溶液,证实粗酶液具有麦芽糖转糖基酶活性。
中图分类号:
朱国强,王水兴*,黄 兰,朱石龙. 麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中的表达及活性分析[J]. 食品科学, 2010, 31(23): 258-261.
ZHU Guo-qiang,WANG Shui-xing*,HUANG Lan,ZHU Shi-long. Expression and Activity Assay of Amylomaltase in Pichia pastoris[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(23): 258-261.