%0 Journal Article %A 任大勇 %A 朱剑威 %A 刘宏妍 %A 于寒松 %A 沈明浩 %T PlnF抗菌肽在乳酸乳球菌中的分泌表达及抑菌活性鉴定 %D 2019 %R 10.7506/spkx1002-6630-20171218-211 %J 食品科学 %P 146-151 %V 40 %N 2 %X 采用乳酸乳球菌表达载体对PlnF抗菌肽基因进行克隆表达,旨在使重组乳酸菌可以直接应用于食品的发酵和防腐之中。在乳酸乳球菌pNZ8149/NZ3900表达载体中,构建含有胞外表达信号肽的PlnF抗菌肽重组质粒,进一步在电阻200?Ω、电容25?μF条件下电转入NZ3900感受态内。经溴甲酚紫培养基筛选、菌落聚合酶链式反应验证、测序等鉴定正确的重组菌株,以1?ng/mL?Nisin诱导6?h后离心获得的上清液对金黄色葡萄球菌具有(14.03±0.23)mm的抑菌圈,经Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到在5.8~7.8?kDa间出现一条与预期大小相近的条带,进一步通过纳升液相色谱-电喷雾-串联质谱验证表明PlnF蛋白在pNZ8149/NZ3900乳酸乳球菌表达载体中正确地进行了胞外表达。 %U https://www.spkx.net.cn/CN/10.7506/spkx1002-6630-20171218-211