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当期目录

2017年 第38卷 第16期    刊出日期:2017-08-25
生物工程
解淀粉芽孢杆菌GSBa-1胞外多糖的发酵制取、流变学特性和应用
赵雯,腾军伟,张健,赵笑,姜云芸,杨贞耐
2017, 38(16):  1-9.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716001
摘要 ( 141 )   HTML ( 0)   PDF (3393KB) ( 186 )  
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针对1 株从传统酒曲中分离筛选得到的高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)解淀粉芽孢杆菌 GSBa-1,采用单因素试验和响应面法确定了菌株的最优产EPS发酵条件:培养基组成为胰蛋白胨10 g/L、酵母浸粉 5 g/L、蔗糖40 g/L、氯化钠10 g/L;发酵温度35 ℃、发酵时间36 h、摇床转速160 r/min、接种量4%,在此条件下 EPS产量为326.45 mg/L。对EPS的流变特性进行研究,结果表明,该EPS溶液的黏度较低,具有浓度依赖性和剪切 变稠的特性,随着温度升高,黏度降低。采用激光光散射仪辅助测量EPS的分子形态:得到EPS在水溶液中重均 分子质量为4.993×105 g/mol,回旋半径为48.34 nm,流体力学半径为64.62 nm,结构参数为0.748,该分子可能 为紧密的球状结构。透射电子显微镜观察验证了EPS的球状结构。将该EPS加入到酸性乳饮料中,既不会增加其 黏度,又具有良好的稳定特性,表明解淀粉芽孢杆菌GSBa-1 EPS可以作为一种新型的食品稳定剂,具有潜在的 应用价值。

变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸激酶基因的克隆、表达及生物信息学分析
何小用,王大明,孙文敬,崔凤杰,钱静亚,齐向辉,余泗莲
2017, 38(16):  10-16.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716002
摘要 ( 69 )   HTML ( 0)   PDF (3270KB) ( 110 )  
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采用聚合酶链式反应技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆2-酮基葡萄糖酸 激酶的全长基因kguK,并在此基础上构建了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kguK。在异丙基-β-D- 硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了一个特异的分子质量约为36.0 ku融合蛋白,且该蛋白的Western-Blot鉴 定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由305 个氨基酸残基组成的亲水性蛋白,定位于细胞 质中,存在着与pfkB家族蛋白类似的保守结构域,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为 35.73%、12.79%和51.48%。

 

单核增生性李斯特菌hly缺失菌株的构建及生物特性的初步鉴定
谢曼曼,刘武康,丁承超,董庆利,陈国薇,曾海娟,郭亮,刘箐
2017, 38(16):  17-22.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716003
摘要 ( 47 )   HTML ( 0)   PDF (2589KB) ( 101 )  
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为研究单核增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)hly基因对毒力的影响,利用同源重组原理,使 用穿梭载体,构建单核细胞增生性李斯特菌野生菌株EGD-e的hly基因缺失菌株EGD-eΔhly。细菌活性实验证明缺失 菌株生长状态与亲本无差异,但EGD-eΔhly丧失溶血活性,细胞侵袭能力降低约90%,在107 cells/mL腹腔注射条件下 不表现动物毒性。在转录水平上EGD-eΔhly的毒力基因inlC、prfA的表达量分别下降了81%和76%,actA、plcB的表达 量分别提高了2.7 倍和1.8 倍。hly缺失菌株的成功构建及生物特性的初步研究结果为研究Lm致病机理提供依据。

 

酒曲中产凝乳酶微生物菌株的分离筛选及鉴定
腾军伟,赵笑,杨亚威,张健,赵爱梅,姜云芸,李柳,郑喆,杨贞耐
2017, 38(16):  23-28.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716004
摘要 ( 95 )   HTML ( 0)   PDF (2927KB) ( 131 )  
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针对酒曲中的微生物进行分离纯化,得到11 株细菌和2 株真菌,并采用酪蛋白平板法和Arima时间法筛选 出了1 株产凝乳酶的细菌菌株编号为LB-51。通过形态学观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析鉴定该菌株为解 淀粉芽孢杆菌,将该产凝乳酶菌株命名为解淀粉芽孢杆菌GSBa-1。该菌株在液体LB培养基中发酵72 h产凝乳酶的 凝乳活力为(431.53±15.89)SU/mL,蛋白水解活力为(5.05±0.59)U/mL,所产凝乳酶凝乳活力高而蛋白水解活 力低,凝乳酶粗酶单位酶活力为1.54×105 SU/g。解淀粉芽孢杆菌GSBa-1是分离筛选自酒曲中的一株高产凝乳酶细 菌,因此其来源安全,可作为工业化候选菌株进一步研究开发。
泡盛曲霉液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件优化
刘二伟,杨绍青,闫巧娟,江正强
2017, 38(16):  29-35.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716005
摘要 ( 63 )   HTML ( 0)   PDF (3061KB) ( 86 )  
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从土壤样品中筛选得到一株高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的真菌,经鉴定为泡盛曲霉(Aspergillus awamori), 命名为Aspergillus awamori CAU33。依次采用单因素试验和响应面分析法优化了其液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的 条件,得到该菌株产酶的最适条件为:玉米芯质量浓度55 g/L、大豆蛋白胨质量浓度25 g/L、曲拉通X-114质量浓度 23 g/L、初始pH 4.5、培养温度35 ℃、培养时间6 d。在此条件下β-1,3-1,4-葡聚糖酶活力达到8 447 U/mL,为优化前 的17.6 倍。
小菜蛾moricin在毕赤酵母中的表达及抑菌活性分析
黄钦耿,梁玲,陈巧红,吴松刚,黄建忠
2017, 38(16):  36-42.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716006
摘要 ( 58 )   HTML ( 0)   PDF (2435KB) ( 86 )  
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抗生素的过度使用给自然生态带来诸多不利影响,寻找合适的抗生素的替代物,从而减少抗生素的使用正 成为当下的研究热点。以来自于小菜蛾的特异性抗菌肽moricin为研究对象,研究其酵母异源表达水平和抑菌性能 及生化特性,为进一步的开发利用提供理论支持。根据已有的小菜蛾抗菌肽moricin特异性基因信息,采用聚合酶 链式反应扩增其成熟肽基因mor-3,并克隆至pGAPZα A质粒中,构建组成型分泌表达载体pGAPZα A-mor3,线性化 片段电转化导入毕赤酵母SMD1168菌株,高质量浓度Zeocin筛选获得高拷贝重组转化子。以YPD为培养基进行摇瓶 发酵,重组蛋白获得高效表达,分子质量约为5 kD,与理论预测的基本一致;发酵60 h,上清液中重组蛋白表达量 达248.98 mg/L,而且耐热性能良好,同时具备较强的耐强酸及强碱的能力,特别在强酸环境中活性保持稳定,体 现了较好的机体内环境的适应性潜力;对部分革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有抑菌作用,特别是对革兰氏阴性 菌具备特异性较强的抑制作用,对大肠杆菌的最低抑菌浓度为6.25 μg/mL,而对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度仅 为124.49 μg/mL。独特的抑菌性能和理化特点,使其具备广阔的开发应用前景及良好的社会与环保效益。
内蒙古地区绿豆品种遗传多样性SSR分析及DNA指纹图谱构建
赵雅楠,王颖,张东杰,王丽侠,佐兆杭
2017, 38(16):  43-50.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716007
摘要 ( 53 )   HTML ( 0)   PDF (2132KB) ( 105 )  
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目的:分析内蒙古地区绿豆品种的遗传多样性并构建其DNA指纹图谱,为探明绿豆种质资源遗传背景及 真伪鉴定提供科学依据。方法:以内蒙古地区92 份绿豆品种为模板,利用筛选得到的10 对多态性丰富的简单重复 序列(simple sequence repeat,SSR)引物对其进行遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建。结果:10 对SSR引物共 检测到58 个等位基因,每对引物检测到3~10 个不等;不同引物揭示的多态信息含量变幅介于0.371 4~0.773 7,平 均为0.52。92 份绿豆种质的遗传相似系数变幅介于0.033 4~1.000 0之间,平均为0.46。非加权组平均法聚类分析结 果显示,在遗传相似系数为0.294 4时,可将92 份绿豆种质分为两大类群。构建了92 份绿豆品种的SSR指纹图谱及 分子身份证,除个别品种外,大部分具有唯一性,可用于品种鉴定。结论:内蒙古地区绿豆种质资源的遗传多样性 相对较丰富,但存在一定程度的近交现象,有待进一步加强引进基因资源,创新绿豆育种材料;构建绿豆SSR指纹 图谱和分子身份证,对绿豆品种真伪鉴定、身份识别、溯源管理及原产地保护具有重要意义。
基于高通量测序的郫县豆瓣后发酵期真菌演替变化分析
赵红宇,徐炜桢,杨国华,刘元福,岳鹏,张良
2017, 38(16):  51-56.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716008
摘要 ( 88 )   HTML ( 0)   PDF (1993KB) ( 90 )  
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为研究郫县豆瓣后发酵过程中真菌群落变化规律,揭示其特有“日晒夜露”工艺的发酵本质,采用MiSeq 测序分析其从后发酵1 周至后发酵6 a期间一共7 个时间点的真菌群落演替变化情况。结果表明,郫县豆瓣后发酵过 程中共有3 个门类群、20 个纲类群、47 个目类群、77 个科类群、106 个属类群的真菌参与演替变化;后发酵时间 对郫县豆瓣的真菌群落组成具有重要影响,随着后发酵的进行格孢菌科和黑霉科真菌持续减少,而酵母科、类酵母 科和毕赤酵母科的真菌则呈现先增加后减少的趋势,其峰值大多出现在3~6 个月之间,但后发酵6 a的郫县豆瓣真 菌群落较其他样品呈明显偏低。该方法发现了大量的非培养真菌和未报道真菌,所得真菌多样性更接近于样品微生 态,更能够全面解析自然发酵调味品郫县豆瓣的真菌多样性,为传统产业的现代化改造和食品质量安全控制提供科 学支撑。
腌腊肉制品中乳酸菌的筛选鉴定及其在腊肠中的应用
潘晓倩,成晓瑜,张顺亮,赵冰,乔晓玲,陈文华,李家鹏,曲超,王守伟
2017, 38(16):  57-63.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716009
摘要 ( 82 )   HTML ( 0)   PDF (2481KB) ( 180 )  
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为筛选适合传统腌腊肉制品的优良乳酸菌菌株,从多种农家自制传统腌腊肉制品中分离纯化出9 株优势乳 酸菌。通过发酵特性筛选,得到一株性状优良菌株10M-7,并制备该菌株的干粉发酵剂,以未接种发酵剂腊肠为对 照,分析此发酵剂对腊肠感官品质和微生物变化的影响。结果表明,10M-7菌株具有良好的产酸特性和抑菌性能。 根据形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析,鉴定其为植物乳杆菌,采用冷冻干燥法制备纯种发酵剂,并制 作人工发酵腊肠。发酵剂组pH值在初期便迅速下降,且始终低于对照组;发酵剂组乳酸菌迅速生长繁殖,且葡萄 球菌和大肠杆菌数量与对照组相比明显降低。感官评价表明,当添加量为104 CFU/g原料肉时,能够很好地保持和 改善产品风味,使产品整体感觉更好。
响应面法优化萌发藜麦芽乳发酵工艺
陈树俊,石玥,胡 洁,徐晓霞,李乐,张君梅,李佳益,王翠莲
2017, 38(16):  64-70.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716010
摘要 ( 66 )   HTML ( 0)   PDF (2642KB) ( 144 )  
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以萌发藜麦芽为原料,研究发酵条件对藜麦芽发酵乳酸度和活菌数的影响。选用植物乳杆菌和干酪乳杆菌 2 种混合菌进行发酵,通过单因素试验、响应面优化试验探究菌种比例、接种量和发酵时间对发酵的影响。结果表 明,萌发藜麦芽乳混合菌发酵最佳工艺条件为植物乳杆菌和干酪乳杆菌比例2.5∶1、接种量3%、发酵时间10.3 h,得 到的萌发藜麦芽发酵乳酸度为85.32 °T,活菌数为9.21(lg(CFU/mL)),与预测值吻合,表明萌发藜麦芽的匀浆 发酵培养基适合乳酸菌生长。
草莓轻型黄边病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及其免疫原性分析
杨菊梅,马建忠,王永刚,邓子兵,魏艳,潘博,李印武
2017, 38(16):  71-78.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716011
摘要 ( 42 )   HTML ( 0)   PDF (3350KB) ( 107 )  
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应用IEDB、DNAStar、DNAMAN和SnapGene等生物信息学工具对草莓轻型黄边病毒外壳蛋白的氨基酸残 基序列进行分析。选择一段抗原性较强的肽段(位于外壳蛋白27~38氨基酸残基处),依据大肠杆菌(Escherichia coli)的密码子偏好性化学合成了该肽段的DNA编码序列(AE)。AE片段克隆至E. coli表达载体pET32a(+) 的EcoRⅠ和XhoⅠ位点,获得重组质粒pET32a(+)-AE。含AE片段的开放阅读框长561 bp,编码了一个187氨 基酸残基的重组融合蛋白,理论分子质量为20.29 kD。重组质粒pET32a(+)-AE分别在E. coli BL21(DE3)和 E. coli Rosetta中进行了诱导表达和条件优化。重组融合蛋白在E. coli Rosetta中的最佳表达条件为1.5 mmol/L异丙 基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)、35 ℃诱导表达2 h,产率为13.22 mg/L;在 E. coli BL21(DE3)中的最佳表达条件是为0.5 mmol/L IPTG、30 ℃诱导表达2 h,产率为9.55 mg/L。重组融合蛋白 经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、质谱鉴定表明,其含有所预测的草莓轻型黄边病毒外壳蛋白抗原表 位肽段AE。AE重组融合蛋白经Ni2+亲和色谱纯化、EK酶切、分子筛除去融合蛋白标签后,免疫产蛋鸡。从免疫鸡 所产鸡蛋中提取鸡卵黄免疫球蛋白(immunoglobulin of yolk,IgY),Dot-Blot检测抗体结合活性。结果表明,所提 取的IgY可特异性识别AE肽段和SMYEV外壳蛋白。这一结果表明所预测的AE肽段具有较好的免疫原性。
猕猴桃溃疡病菌拮抗菌筛选、鉴定及发酵条件优化
田雪莲,尹显慧,龙友华,蔡滔,李洪
2017, 38(16):  79-85.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716012
摘要 ( 82 )   HTML ( 0)   PDF (3000KB) ( 118 )  
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目的:从不同地区猕猴桃根际土壤中筛选拮抗猕猴桃溃疡病菌的菌株,优化其产生抑菌活性物质的发 酵条件,为猕猴桃溃疡病的生物防治提供潜在的资源菌。方法:采用平板稀释法从猕猴桃根际土壤中分离获得 菌株,采用抑菌圈法筛选拮抗菌;通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析对其进行鉴定;并采用 单因素及正交试验优化培养基组分及发酵条件。结果:从土壤中共分离到288 株放线菌,其中编号为NA-TXL-1 的菌株对猕猴桃溃疡病菌的拮抗效果最佳,采用预防法、治疗法进行盆栽实验,发酵原液的防治效果分别为 73.06%、55.62%,初步鉴定该菌株为抗生链霉菌。其最佳发酵配方和培养条件为:乳糖30 g/L、酵母粉3 g/L、NaCl 1 g/L、K2HPO4 0.5 g/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L、FeSO4 0.01 g/L,种子培养基为乳糖-酵母粉培养基,接种量为 2%,起始pH值为7.0,发酵原液、上清液、重悬液分别培养5、14、5 d。结论:经鉴定,拮抗菌株为Streptomyces antibioticus。在优化的发酵条件下,该菌株对猕猴桃溃疡病菌具有更好的拮抗效果。
N-糖基化对β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中异源表达的影响
马清,蔡瑞,姜风超,马立娟,杜丽平,肖冬光
2017, 38(16):  86-91.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716013
摘要 ( 70 )   HTML ( 0)   PDF (2415KB) ( 113 )  
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为研究N-糖基化对里氏木霉β-甘露聚糖酶(β-mannanase,Man1)在毕赤酵母GS115中异源表达的影响, 采用定点突变的方法,将Man1上3 个N-糖基化修饰位点(N131、N158和N329)上的天冬酰胺用中性谷氨酰胺取 代。结果发现,N-糖基化位点的突变对Man1的转录水平无明显影响,突变后获得的Man1表观分子质量有轻微下 降,与Man1相比,3 个突变体N131、N158和N329的甘露聚糖酶活力分别降低了85.43%和79.48%和16.3%;而热稳 定性分别提高了7.87%、13.5%和15.37%。由此可见,N-糖基化修饰对于β-甘露聚糖酶的高效表达是必需的,其中 N131和N158糖基化位点尤为重要,但是会稍微降低β-甘露聚糖酶的热稳定性。
纯种发酵对小米淀粉分子结构及老化特性的影响
寇芳,葛云飞,沈蒙,宁冬雪,夏甜天,王维浩,曹龙奎
2017, 38(16):  92-98.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716014
摘要 ( 112 )   HTML ( 0)   PDF (4017KB) ( 161 )  
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利用自然发酵液中对淀粉老化特性起主要作用的菌种发酵,研究发酵对小米淀粉分子结构及老化特性的影 响。采用0.2 g/100 mL的NaOH溶液提取发酵后的小米淀粉,研究不同菌种发酵后对小米淀粉颗粒特性、官能团、分 子质量、糊化及老化特性的影响。结果表明:发酵未改变淀粉的偏光十字;植物乳杆菌、戊糖片球菌和屎肠球菌发 酵后小米淀粉表面被侵蚀,酿酒酵母及芽孢菌发酵后淀粉颗粒表面侵蚀迹象变重,孔道加深且数量增多;酿酒酵母 及芽孢菌发酵后小米淀粉官能团区的峰位未变,但特征峰强度减弱,植物乳杆菌、戊糖片球菌及屎肠球菌发酵后小 米淀粉指纹区图谱部分消失;植物乳杆菌发酵后Ⅰ区、Ⅱ区的重均、数均分子质量较小米淀粉降低。戊糖片球菌、 屎肠球菌、酿酒酵母发酵后Ⅰ区的重均分子质量升高,数均分子质量降低,Ⅱ区重均、数均分子质量降低。芽孢菌 发酵后Ⅰ区的数均分子质量略有升高,Ⅱ区重均、数均分子质量降低。植物乳杆菌、戊糖片球菌及屎肠球菌发酵后 淀粉的糊化温度、回生值及最终黏度降低,热焓值升高。酿酒酵母发酵后糊化温度及回生值降低,最终黏度及热焓 值升高。发酵使淀粉的分子结构、支链淀粉及直链淀粉分子发生改变,短期抗老化性能提高。
体外消化/Caco-2细胞模型分析发酵对面粉铁生物利用率的影响
雷激,黄承钰
2017, 38(16):  99-103.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716015
摘要 ( 95 )   HTML ( 0)   PDF (1871KB) ( 100 )  
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中国居民膳食以谷物为主食,谷物中铁吸收率低是造成营养性贫血的主要原因,适当的加工方式可缓解 谷物中植酸、多酚等物质对铁生物利用率(Fe bioavailability,Fe BV)的影响。为考察酵母发酵对面粉Fe BV的影 响,采用体外消化/Caco-2细胞模型。结果表明,面团在发酵后pH值呈下降趋势,酸度呈上升趋势;多酚、植酸含 量降低,植酸酶活性升高,以上各指标在发酵前后差异均具有统计学意义(P<0.05)。发酵后面粉样品的Fe BV增 加约5%~38%,大多数面粉Fe BV发酵前后比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:发酵可降低面粉的pH 值,增加酸度,有利于面粉多酚和植酸的降解以及植酸酶活力的升高,可有效提高面粉Fe BV。
成分分析
黄酮醇糖苷与茶树品种适制性关系
戴伟东,解东超,吕美玲,谭俊峰,李朋亮,吕海鹏,林智
2017, 38(16):  104-109.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716016
摘要 ( 82 )   HTML ( 0)   PDF (2094KB) ( 152 )  
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对不同加工适制性的18 个茶树品种春季茶叶中10 种黄酮醇糖苷进行了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间 质谱联用检测,并计算了葡萄糖苷化黄酮醇与半乳糖苷化黄酮醇的比值。结果发现相比于适制绿茶的茶树品种,适 制红茶品种茶叶中黄酮醇葡萄糖苷化水平较高,而半乳糖苷化水平较低。山柰酚-3-葡萄糖苷含量、山柰酚-3-葡萄 糖酰芸香糖苷含量、山柰酚-3-葡萄糖苷/山柰酚-3-半乳糖苷比值、槲皮素-3-葡萄糖苷/槲皮素-3-半乳糖苷比值、 杨梅素-3-葡萄糖苷/杨梅素-3-半乳糖苷比值在不同适制性品种间具有显著性差异(P<0.05)。其中山柰酚-3-葡 萄糖苷含量和山柰酚-3-葡萄糖苷/山柰酚-3-半乳糖苷比值差异极显著(P<0.001),对于绿茶适制性品种和红 茶适制性品种的判断准确率分别为100%和83%,具有作为指导茶树品种适制性生化指标的可能。
不同品种稻米的米饭风味分析
张敏,苗菁,苏慧敏,王子元
2017, 38(16):  110-114.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716017
摘要 ( 125 )   HTML ( 0)   PDF (1803KB) ( 121 )  
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采用固相微萃取结合气相色谱-嗅闻-质谱技术对7 种籼米、4 种粳米共11 种米饭样品的风味化合物进行分 析。结果表明,粳米中风味化合物种类略高于籼米。米饭中关键风味化合物在粳米、籼米样品中存在显著差异, 2-乙酰基-1-吡咯啉在籼米样品中未被检出;4-乙烯基苯酚只在粳米中被检测出;香草醛在粳米中的相对含量显著高 于籼米;而籼米中1-辛烯-3-醇、戊醛、己醛的相对含量显著高于粳米。利用米饭风味物质的主成分分析方法,可以 区分出粳米与籼米的品种差异。
UPLC-DAD/ESI-TOF-MS鉴定黑脉羊肚菌多酚化合物
石芳,廖霞,卢可可,郑少杰,肖星凝,吴素蕊,明建
2017, 38(16):  115-121.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716018
摘要 ( 50 )   HTML ( 0)   PDF (2178KB) ( 105 )  
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以黑脉羊肚菌为原料,分离提取羊肚菌多酚(游离酚和结合酚),对提取物中酚类物质的含量及抗氧化活 性进行研究,并采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器/电喷雾飞行时间质谱对黑脉羊肚菌游离酚和结合酚的组分 进行鉴定。结果表明,黑脉羊肚菌多酚主要为游离酚,且游离酚的DPPH自由基清除率、还原力及氧自由基吸收能 力都显著强于结合酚(P<0.05),而两者清除ABTS+·能力相当。从黑脉羊肚菌多酚中鉴定出15 种组分,分别是 没食子酸、焦性没食子酸、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、儿茶素、咖啡酸、绿原酸、荭草素、芦丁、金丝桃苷、白藜 芦醇、木犀草素、槲皮素、肉桂酸、阿魏酸,游离酚提取物有15 种组分,结合酚提取物有14 种组分。
NiO/g-C3N4修饰电极的制备及电催化检测抗坏血酸
李成,朱南南,王星,谢静文,刘素芹
2017, 38(16):  122-126.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716019
摘要 ( 110 )   HTML ( 0)   PDF (2454KB) ( 136 )  
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利用三聚氰胺制备石墨相的氮化碳,即g-C3N4,以氯化镍和g-C3N4为基础物质采用电沉积方法制备复合化 学修饰电极。通过对裸电极、NiO/GCE、g-C3N4/GCE和NiO/g-C3N4/GCE对抗坏血酸的催化效果的比较,发现NiO和 g-C3N4的复合修饰电极对抗坏血酸具有良好的电催化氧化作用。扫描速率在70~200 mV/s范围内,峰电流与扫描速 率呈良好的线性关系:Ipa=-34.14-1.167v,R=0.998;Ipc=53.42+0.357 8v,R=0.982。峰电位随扫描速率增大有一 定的偏移,说明该修饰电极的氧化还原过程受表面控制。当抗坏血酸的质量浓度介于0.017 6~22.88 μg/mL时,其 氧化峰电流与质量浓度具有良好的线性关系,方程为:Ipa=-1.435+2.900C,R=0.998,检出限为0.008 8 μg/mL。该 传感器的选择性、重复性和稳定性良好,可用于果汁中抗坏血酸的检测。
我国沿海主要海域雌性三疣梭子蟹呈味成分含量的比较
施文正,方林,吴旭干,潘桂平,侯文杰
2017, 38(16):  127-133.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716020
摘要 ( 76 )   HTML ( 0)   PDF (2401KB) ( 96 )  
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以我国渤海、黄海、东海和南海4 个海域中雌性三疣梭子蟹的肝胰腺、性腺和体肉为研究对象,采用电子 舌、氨基酸自动分析法以及高效液相色谱法研究不同海域的生长环境对雌性三疣梭子蟹3 个可食部位游离氨基酸含 量和呈味核苷酸化合物的变化,并采用滋味强度值和味精当量对呈味成分的强度进行评价。结果表明:电子舌可 对4 个海域中雌性三疣梭子蟹的肝胰腺、性腺和体肉进行有效区分;在肝胰腺部分,游离氨基酸总量是3 个可食部 位最高的,3 种呈味核苷酸中肌苷酸和腺苷酸的含量较高;在不同海域中,渤海肝胰腺组游离氨基酸总量最高, 为3 315.05 mg/100 g,且其味精当量值最高,为15.87 g MSG/100 g;南海肝胰腺组游离氨基酸总量最低,但甜味氨 基酸含量所占比例最高,为63.10%,并且呈味核苷酸含量最高,肌苷酸和腺苷酸的滋味强度值大于1。蟹的性腺部 分,呈味核苷酸含量与味精当量值是3 个可食部位中最高的,其中南海性腺的味精当量值为36.46 g MSG/100 g,是 4 个海域中最高。蟹的体肉部分中肌苷酸含量较高,黄海体肉肌苷酸组中含量较低,其滋味强度值小于1,对体肉 的滋味无直接贡献,但黄海体肉组游离氨基酸总量最高,为2 564.44 mg/100 g;东海体肉组的味精当量值最高,为 7.19 g MSG/100 g。
HS-SPME-GC-MS技术分析黑苦荞奶茶的挥发性成分
仝令君,迟雪露,张晓梅,艾娜丝,王静,孙宝国
2017, 38(16):  134-139.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716021
摘要 ( 83 )   HTML ( 0)   PDF (1972KB) ( 165 )  
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以黑苦荞、鲜牛奶、白砂糖为原料制备黑苦荞奶茶,采用双柱定性并结合固相微萃取-气相色谱-质谱联用 技术对其风味物质进行分离、鉴定。结果表明,DB-WAX极性柱分离鉴定出44 种物质,HP-5MS弱极性柱分离鉴定 出33 种物质,且HP-5MS弱极性柱分离得到的化合物相对含量较极性柱高。双柱共鉴定出57 种挥发性成分,包括吡 嗪类15 种、醛类6 种、酮类5 种、醇类3 种、酯类3 种、酸类3 种、酚类3 种、烯烃类2 种、杂环及其他种类17 种; 其中吡嗪类、醛类和杂环及其他种类的含量较多。
近红外漫反射光谱法快速检测谷子蛋白质和淀粉含量
田翔,,刘思辰,,王海岗,,秦慧彬,,乔治军
2017, 38(16):  140-144.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716022
摘要 ( 69 )   HTML ( 0)   PDF (1969KB) ( 160 )  
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建立近红外漫反射光谱法测定谷子中的蛋白质和淀粉含量,提供一种快速、简便、无损的分析方法进行 谷子品种资源鉴定和筛选。以191 份山西核心谷子种质为材料,采用近红外漫反射光谱法建立谷子蛋白质和淀粉含 量的快速检测模型。结果表明,采用一阶导数+矢量归一化光谱预处理,分别建立谷子蛋白质和淀粉含量的校正 模型,模型的校正决定系数(R2 cal)分别为0.977 0和0.907 3,交叉验证均方根误差分别为0.203%和0.466%,外部验 证决定系数(R2 val)分别为0.989 6和0.977 2,预测均方根误差分别为0.225%和0.368%。对于谷子蛋白质和淀粉的预 测,化学法和近红外仪器法测定间无显著差异,近红外测定结果是准确可靠的。说明采用近红外漫反射光谱分析技 术能够满足对谷子蛋白质和淀粉含量的检测。
不同产地决明子蒽醌化合物组成及其抗氧化活性测定
龙远春,张欣,万国栋,邓泽元,张兵
2017, 38(16):  145-151.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716023
摘要 ( 94 )   HTML ( 1)   PDF (2335KB) ( 227 )  
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使用20%硫酸与氯仿同步水解萃取决明子总蒽醌,利用正交试验法优化得到提取工艺为:提取温度60 ℃、 料液比1∶30(g/mL)、20%硫酸与氯仿溶剂体积比0.6、提取时间3 h。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼法、2,2’-联氮- 双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐法、铁离子还原法测定不同产地决明子总蒽醌的体外抗氧化活性。结果 表明,印度决明子蒽醌抗氧化活性明显低于其他产地决明子,抗氧化活性总体顺序为河北>河南>安徽>江西> 山东>印度。采用高效液相色谱法分析6 个产地决明子6 种蒽醌含量,除了印度与河南产地决明子外,其他产地决 明子大黄酚与橙黄决明素均达到了《中国药典》对决明子蒽醌中大黄酚含量不少于0.2%,橙黄决明素含量不少于 0.08%的要求。
四川泡椒对鲢鱼鱼糜凝胶风味特性的影响
杨峰,巫朝华,范大明,黄建联,赵建新,闫博文,周文果,张文海,张灏
2017, 38(16):  152-157.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716024
摘要 ( 90 )   HTML ( 0)   PDF (1970KB) ( 103 )  
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研究3 种四川泡椒(泡二荆条、泡墨西哥椒、泡野山椒)对鲢鱼糜凝胶风味特征的影响,采用顶空固相 微萃取-气相色谱-质谱联用技术结合主成分分析对鲢鱼糜凝胶的挥发性风味化合物进行鉴定分析,结合电子舌对其 滋味整体评判。未添加泡椒的鱼糜凝胶中醛类(52.98%)相对含量较高,而3 种添加泡椒的鱼糜凝胶样品的醇类 (26.30%~39.78%)和酯类(5.63%~17.05%)相对含量较高。戊醛、己醛、1-戊烯-3-醇等对4 种样品的总体气味 特征均具有主要贡献。相较于添加泡二荆条的鱼糜凝胶样品,添加泡墨西哥椒和泡野山椒的鱼糜凝胶样品与未添加 泡椒的鱼糜凝胶样品的主成分差异更大。3 种添加泡椒的鱼糜凝胶样品酸味和咸味值基本相同;添加泡二荆条的香 味值最高为0.82;鲜味值则是添加泡墨西哥椒最低,为-0.65。对于涩回味、苦回味、涩味、苦味,这4 种鱼糜凝 胶并没有表现出明显的区别。
工艺技术
Plackett-Burman和Box-Behnken试验优化苦荞蛋白酶解制备抗菌肽的工艺
赵红倩,宋风霞,江祥师,沈申燚,尚东亮,李莉蓉
2017, 38(16):  158-164.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716025
摘要 ( 113 )   HTML ( 0)   PDF (2625KB) ( 112 )  
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用中性蛋白酶酶解苦荞蛋白制备抗菌肽,以抑菌率和肽质量浓度为响应值,在底物质量分数、加酶量、 pH值、酶解温度和酶解时间5 个单因素试验基础上,采用Plackett-Burman试验选出其中影响显著的因素,再以肽质量 浓度为评价指标,用Box-Behnken试验优化抗菌肽制备工艺。最佳工艺为:底物质量分数3.22%、加酶量4 000 U/g、 pH 6.86。在此条件下,苦荞蛋白酶解产生的肽质量浓度为32.41 mg/mL(预测值为32.12 mg/mL),对大肠杆菌抑 菌率为(27.88±2.78)%,对金黄色葡萄球菌的抑菌率为(94.56±0.74)%。结果表明,优化中性蛋白酶酶解苦荞 蛋白制备抗菌肽工艺合理。
利用牡蛎制备ACE抑制肽的工艺优化
邱娟,沈建东,翁凌,张凌晶,刘光明,曹敏杰
2017, 38(16):  165-172.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716026
摘要 ( 41 )   HTML ( 0)   PDF (3978KB) ( 105 )  
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运用正交试验和响应面法优化牡蛎血管紧张素转换酶(angiotensin-Ⅰ converting enzyme,ACE)抑制肽的 分步酶解制备工艺。采用复合蛋白酶和碱性蛋白酶对牡蛎进行分步酶解,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析和ACE抑制率为考核指标优化工艺参 数。结果表明,第1步复合蛋白酶最佳工艺参数为:料液比1∶4、加酶量1.2%、pH 7.0、反应温度50 ℃、酶解时间 1 h;第2步碱性蛋白酶最佳工艺参数为:加酶量0.42%、pH 8.3、反应温度53 ℃、酶解时间73 min。凝胶过滤色谱 法测得牡蛎酶解液分子质量在3 000 D以下小肽所占比例为99.72%,其ACE抑制活性IC50为0.8 mg/mL。同时,氨基 酸组成分析表明,牡蛎肽中Glu含量最高,Cys含量最低;必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别占总氨基酸的36.6% 和37.2%。本研究制备的低分子质量、高ACE抑制活性牡蛎肽,可为牡蛎资源的开发利用提供理论参考。
枸杞牛乳肽酒制备工艺优化及其抗氧化性分析
何贝贝,常秋冉,史艳荣,王建平,李志成,昝林森
2017, 38(16):  173-177.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716027
摘要 ( 71 )   HTML ( 0)   PDF (2085KB) ( 187 )  
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为克服传统白酒功能性、营养性不足的缺陷,以脱脂牛乳和枸杞为材料,采用对比及正交试验,对乳蛋 白酶解条件、枸杞牛乳肽酒的制备工艺和抗氧化功能进行了研究。结果表明:1)胰蛋白酶是水解牛乳蛋白的最佳 蛋白酶;2)胰蛋白酶的最佳酶解条件是在pH 7.0、温度40 ℃、加酶量4 500 U/g的条件下酶解120 min;3)枸杞牛 乳肽酒的最佳发酵工艺:以牛乳蛋白酶解液为载体,添加体积分数14%枸杞汁、7.5%的活化酵母菌液,28 ℃发酵 9 d。制备的枸杞牛乳肽酒具有较高的体外抗氧化活性,且香味协调,口感良好,其感官指标和理化指标都符合并 高于国家发酵型甜奶酒的标准。
牡蛎酶解液美拉德反应体系优化及产物营养评价
刘海梅,安孝宇,陈静,王静,赵芹,郭青君,车欣欣,崔云
2017, 38(16):  178-182.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716028
摘要 ( 49 )   HTML ( 0)   PDF (2467KB) ( 96 )  
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以牡蛎酶解液为氨基来源,与葡萄糖发生美拉德反应,以感官评分和褐变程度为指标,优化美拉德反应的 工艺条件,并通过氨基酸评分、化学评分、必需氨基酸指数(essential animo acids index,EAAI)评价美拉德反应 产物的营养品质。结果表明,葡萄糖美拉德反应的最佳工艺参数为葡萄糖添加量8%、反应温度110 ℃、pH 7.5、反 应时间90 min;美拉德反应产物中18 种氨基酸齐全,必需氨基酸含量占总氨基酸含量的32.99%,EAAI为71.568, 营养品质较高。鲜味氨基酸含量丰富,Glu含量最高。
胡萝卜片中富集植物乳杆菌的工艺优化
崔莉,牛丽影,黄家鹏,李大婧,张钟元,刘春菊,刘春泉,刘莹萍,肖丽霞
2017, 38(16):  183-189.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716029
摘要 ( 48 )   HTML ( 0)   PDF (3115KB) ( 98 )  
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为将植物乳杆菌富集到胡萝卜中以制备含益生菌的果蔬功能食品,本研究首先通过单因素和正交试验优化 植物乳杆菌以真空浸渍和超声浸渍的方式富集到胡萝卜片中的工艺参数,然后以常压浸渍为对照比较3 种浸渍方式 下胡萝卜片中富集的活菌数,以期获得较优的胡萝卜植物乳杆菌富集方式。结果表明,真空浸渍较优工艺参数为真 空浸渍温度35 ℃、真空浸渍时间15 min、复压浸渍时间20 min;超声浸渍较优工艺参数为超声浸渍温度30 ℃、超 声浸渍功率125 W、超声浸渍时间12 min。比较真空浸渍、超声浸渍和常压浸渍3 种方式下胡萝卜中活菌数可知, 真空浸渍组活菌数最多,达到1010 CFU/g以上;扫描电子显微镜结果显示,在真空和超声浸渍的胡萝卜组织中均观 察到杆状菌体,而在常压浸渍样品的组织内部未发现菌体。3 种浸渍方式下胡萝卜组织表面均有大量菌体。本研究 获得了较优的胡萝卜中富集植物乳杆菌工艺参数,为乳酸菌或其他菌通过真空浸渍富集到果蔬组织中提供实验依 据,也为含益生菌功能食品开发提供新思路。
皖南山区红豆杉多糖提取、纯化方法及单糖组成分析
卫强,任定美,李四聪,孙涛,吕来虎
2017, 38(16):  190-197.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716030
摘要 ( 59 )   HTML ( 0)   PDF (3002KB) ( 120 )  
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研究皖南地区野生红豆杉茎、叶中多糖的提取、纯化方法,分析其单糖组成情况。结果表明,闪式提取 为最佳提取方法,其中太平红豆杉细茎和黟县红豆杉叶多糖提取量最高,分别达到7.09、10.25 mg/g,其中细茎 比粗茎多糖含量高10~20 倍。Sevag法脱蛋白效果最好,对太平红豆杉细茎、黟县红豆杉叶多糖的脱蛋白率分别为 66.5%、69.1%。H2O2法脱色效果最好,对太平红豆杉细茎、黟县红豆杉叶多糖的脱色率为84.2%、85.3%。红外光谱 显示,红豆杉细茎、粗茎和叶多糖谱图相似。2 个产地的红豆杉细茎、粗茎和叶中精制多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,三者单糖种 类相似,木糖物质的量比均较高,但单糖组成比例不同。该研究为红豆杉多糖的开发和应用提供参数。
高密度CO2处理提取鲵皮胶原蛋白的工艺优化
任国艳,宋娅,康怀彬,肖枫,冯秋琪,郭金英,崔国庭,王松军
2017, 38(16):  198-204.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716031
摘要 ( 93 )   HTML ( 0)   PDF (3359KB) ( 146 )  
相关文章 | 计量指标
为研究高密度CO2(dense phase carbon dioxide,DPCD)前处理对鲵皮胶原蛋白提取率的影响,以冻干鲵 皮为原料,采用DPCD对鲵皮进行前处理,酶法提取鲵皮胶原蛋白,设计单因素试验和响应面试验,以胶原蛋白提 取率为评价指标,优化DPCD处理鲵皮的工艺条件。结果表明,DPCD处理鲵皮的最适温度32 ℃、压强30 MPa、时 间6 h;在该处理条件下,模型预测鲵皮胶原蛋白的提取率为39.70%,验证值为(39.48±0.74)%,无显著性差异 (P>0.05);与原料未经DPCD处理胶原蛋白提取率((20.63±0.46)%)相比,提取率提高了18.85%;微观结构 显示,鲵皮经DPCD处理后的组织疏松、胶束纤维有规则排列被破坏并呈现多孔状态;电泳图谱显示鲵皮经DPCD 处理后,胶原蛋白保持典型的Ⅰ型胶原蛋白结构特征。DPCD处理鲵皮,在保持鲵皮胶原蛋白结构特征的同时,显 著提高了胶原蛋白提取率。
安全检测
电化学分析法快速测定烧烤类食品中的苯并(a)芘
冯亚净,张志业,李书国
2017, 38(16):  205-209.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716032
摘要 ( 72 )   HTML ( 0)   PDF (2273KB) ( 113 )  
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基于苯并(a)芘(benzo(a)pyrene,BaP)的电化学氧化还原特征,建立一种快速测定烧烤类食品中BaP 含量的电化学分析方法,优化测定条件为乙腈-水(1∶3,V/V)作为溶剂、电解质LiClO4浓度0.15 mol/L、硫酸浓度 0.1 mol/L、富集时间10 min,在此条件下,BaP的氧化峰电流随其浓度的增大而增大,而且浓度在0~100 nmol/L范 围内呈线性关系,检测限为0.187 nmol/L(RSN=3)。该方法的稳定性和重复性较好,检测时间短,利用该法对烤羊 肉串样品中的BaP进行检测,回收率为96.67%~101.56%,检测结果与高效液相色谱法基本一致,可用于烧烤类食 品中BaP的快速检测。
基于离子液体的基质固相分散萃取结合高效液相色谱法测定肌肉组织中的氟喹诺酮类抗生素
徐尉力,聂稳,张凯丽,郭海南,朱守明,马国祥,王志兵
2017, 38(16):  210-215.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716033
摘要 ( 64 )   HTML ( 0)   PDF (2308KB) ( 88 )  
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将基质固相分散、离子液体均相液-液微萃取和高效液相色谱法相结合,建立一种用于肌肉组织中依诺沙 星、培氟沙星、诺氟沙星和恩诺沙星4 种氟喹诺酮类药物的分析方法。首先以硅胶为分散剂,以200 μL 1-己基-3-甲 基咪唑四氟硼酸盐([C6mim]BF4)离子液体为萃取剂,pH 1.0水溶液为洗脱剂,采用基质固相分散法处理样品,目 标分析物被转移至洗脱液中后,再以六氟磷酸铵为离子对试剂,采用均相液-液微萃取法分离、富集目标分析物于 离子液体相中,最后通过高效液相色谱-二极管阵列检测器对目标物进行定量分析。结果表明,各化合物在线性范 围内具有较好的线性关系(r>0.997 4),检出限为2.9~8.6 μg/kg,加标回收率在87.9%~105.3%之间,其相对标准 偏差为2.2%~8.6%。本法操作简单,不使用有机溶剂,可广泛应用于动物肌肉组织中氟喹诺酮类抗生素的萃取与 检测。
环糊精及肽配体介导的毒死蜱非竞争检测模式
贺江,崔京珍,王伯华,雷颂,李娜
2017, 38(16):  216-221.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716034
摘要 ( 39 )   HTML ( 0)   PDF (2475KB) ( 85 )  
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以毒死蜱作为对象,构建了一种由环糊精和肽配体介导的非竞争检测模式。首先利用分子模拟和光谱学方 法对β-环糊精包合毒死蜱的效应进行了证实;然后将β-环糊精与牛血清蛋白进行偶联,并证实偶联状态的环糊精分子 仍能包合毒死蜱;以β-环糊精-牛血清蛋白偶联产物为核心材料,从商品化的噬菌体展示线性十二肽库中筛选获得了 5 个可以特异识别环糊精-毒死蜱包合物的肽配体;最后,利用亲和力最强的肽配体(8#克隆)构建毒死蜱的非竞争检 测模式,该检测模式能够特异性地识别毒死蜱,而对丙溴磷、除线磷和溴硫磷等结构类似农药分子无识别。本研究所 构建的检测模式无需对小分子物质进行改造和固定,可为小分子化学污染物的快速检测提供新的参考。
近红外光谱技术快速鉴别查哈阳大米
钱丽丽,宋雪健,张东杰,左锋,赵海燕,鹿保鑫,迟晓星
2017, 38(16):  222-227.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716035
摘要 ( 56 )   HTML ( 0)   PDF (2240KB) ( 93 )  
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查哈阳大米为黑龙江特色品牌大米,为保护查哈阳大米品牌,实现查哈阳大米原产地快速真伪鉴别。通 过构建不同地域和品种水稻试验田,收获期内对试验田大米的近红外光谱进行全波长扫描,筛选与产地相关特征 波段。在特征波段处对来自查哈阳地区及非查哈阳地区的233 份大米进行定性分析及定量分析。结果表明,与产地 因素主要相关的波长为5 136~5 501 cm-1,利用此波段采用因子化法建立定性分析模型对查哈阳大米正确鉴别率为 100%,采用偏最小二乘法建立的定量分析模型对查哈阳大米正确判别率为95.83%。
基于SnO2纳米花气体传感器快速检测牛奶中的单增李斯特菌
刘红平,朱永恒,刘海泉,马欧妹,赵勇
2017, 38(16):  228-233.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716036
摘要 ( 92 )   HTML ( 0)   PDF (2629KB) ( 92 )  
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以单增李斯特菌特征性代谢物3-羟基-2-丁酮为检测靶点,水热法合成与之匹配的敏感材料,制备出单增李 斯特菌特异检测半导体气体传感器。采用X射线衍射和透射电子显微镜手段对材料的结构和形貌进行表征。并分析 传感器对3-羟基-2-丁酮标准气体的气敏性能及其在牛奶中单增李斯特菌的检测效果。结果表明,本研究合成的SnO2 材料为纳米花结构。制备出的单增李斯特菌特异检测半导体气体传感器对3-羟基-2-丁酮灵敏度高、响应恢复时间 短、选择性和稳定性好。用于检测单增李斯特菌时,传感器的灵敏度与细菌浓度呈现出良好的线性关系,线性方程 为lg(S-1)=0.198 3lgC-0.472 5(R2=0.990 1)。本方法快速灵敏、操作简便,可用于食品中单增李斯特菌的快 速检测。
最小二乘支持向量机和脂肪酸融合信息应用于花生油掺伪玉米油检测
彭丹,李晓晓,毕艳兰
2017, 38(16):  234-238.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716037
摘要 ( 53 )   HTML ( 0)   PDF (2462KB) ( 102 )  
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将最小二乘支持向量机用于气相色谱分析实现对花生油掺伪玉米油的鉴别,基于油脂的全样和Sn-2位脂肪 酸组成的不同,采用主成分分析消除融合数据中信息重叠的部分,利用粒子群优化最小二乘支持向量机的参数, 对花生油的掺伪进行鉴别,识别率为100%;分别采用最小二乘支持向量机、偏最小二乘法和主成分回归对花生油 中掺入玉米油含量进行预测,结果表明基于脂肪酸融合信息的最小二乘支持向量机的预测均方根误差和相关系数R2 分别为3.452 1%和0.986 6,与偏最小二乘法和主成分回归法相比,最小二乘支持向量机具有更好的稳定性和预测精 度,同时也为食用油的真伪鉴别及掺伪情况确定提供一种新方法。
高通量微生物显色法快速检测动物源性食品中抗生素残留
范维,高晓月,李贺楠,李莹莹,郭文萍,陈淑敏
2017, 38(16):  239-244.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716038
摘要 ( 86 )   HTML ( 0)   PDF (2212KB) ( 101 )  
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建立一种采用高通量微生物显色法对动物源性食品中抗生素残留进行筛检,再结合高效液相色谱-串联质 谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法对阳性样品进行复测的分 析检验方法。本方法利用嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus sterothermophilus)作为指示菌,制备96 微孔板,可同时对不 同类别多种抗生素进行联合检测。结果表明:该微生物显色法操作简便、快捷,成本低,结果准确且易判断,选取 pH 7.4磷酸盐缓冲液进行提取,以反应液150 μL、菌液50 μL(初始OD600 nm为0.4左右)、样品提取液100 μL作为检 测体系,检测效果最佳,对动物源性食品中氨基糖苷类检出限为60 μg/kg,β-内酰胺类检出限为20~40 μg/kg,大环 内酯类检出限为60~80 μg/kg,四环素类检出限为40~60 μg/kg,符合国内外对抗生素残留限量的要求。对60 份动 物源性样品进行检测,其结果与HPLC-MS/MS复测结果一致,说明该微生物法稳定性良好,可用于动物源性食品中 抗生素残留的初筛检测。
高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱法快速筛查饮料中植物源性成分
吕品,范素芳,赵勇,孙勇,张岩,马爱进
2017, 38(16):  245-250.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716039
摘要 ( 37 )   HTML ( 0)   PDF (1974KB) ( 103 )  
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采用高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱对饮料中生物碱、皂苷和有机酸等24 种植物源性成分进行快 速筛查、定性识别和准确定量。样品经高速离心,过0.22 μm水系滤膜后,以C18色谱柱(2.1 mm×250 mm, 3.0 μm)分离,乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,正、负离子模式同时扫描。结果表明,24 种化合物在 50~750 μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.995。样品中各化合物的检出限(以信噪比不小于3计) 为8~20 μg/L。在3 种添加量(70、250、700 μg/L)条件下,其平均回收率为63.0%~126.6%,相对标准偏差为 4.11%~14.73%。该方法利用精确质量数匹配和自建标准库检索,实现快速筛查,并使用多级特征碎片离子进行确 证,具有快速、高效、准确等优点,适用于饮料中多种植物源性成分的快速筛查和测定。
基于元素含量和稳定同位素比值的宁夏贺兰山东麓地区有机葡萄酒甄别
吴浩,周昱,陈靖博,陈德启,金晓蕾,靳保辉,谢丽琪,林光辉,
2017, 38(16):  251-255.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716040
摘要 ( 68 )   HTML ( 0)   PDF (1965KB) ( 118 )  
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对贺兰山东麓产区生产的有机和非有机葡萄酒的元素含量和稳定C、N同位素比值分布特征进行分析,并 利用此数据对宁夏贺兰山东麓地区有机与非有机葡萄酒进行甄别。结果表明,有机与非有机葡萄酒在一些金属元 素如Na、Mg、K、Al和Cu的含量上具有显著差异,而且有机葡萄酒的乙醇和丙三醇的δ13C值显著低于非有机葡萄 酒,但δ15N显著高于非有机葡萄酒。利用C、N稳定同位素和一些金属元素含量,结合主成分分析,可对贺兰山东 麓地区有机和非有机葡萄酒进行有效区分,为我国有机葡萄酒掺假检测以及该地区的葡萄酒产业发展提供技术支 撑,具有重要的应用前景。
基于光谱预处理结合遗传算法优化波长的面粉水分快速检测
孙晓荣,周子健,刘翠玲,付新鑫,窦颖
2017, 38(16):  256-260.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716041
摘要 ( 63 )   HTML ( 0)   PDF (2441KB) ( 154 )  
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基于光谱预处理及遗传算法(genetic algorithm,GA)法优化波长,再结合偏最小二乘(partial least squares,PLS)法建立面粉中水分的定量分析模型,对比在不同预处理方法下相关系数R2、校正标准差(root mean square error of calibration,RMSEC)、预测标准偏差(root mean square error of prediction,RMSEP)3 个指标,随 机选择130 份样本建立预处理+GA+PLS定量分析模型,实验结果为R2从0.955 2提高到0.977 7、RMSEC从0.375 8 降低到0.245 3、RMSEP从0.268降低到0.264。结果表明基于光谱预处理结合GA优化波长来定量分析面粉中水分含 量是可行的,且准确性和误差度皆优于无优化模型。
羊肉屠宰加工场主要污染菌的分布及其对熟制羊肉的致腐能力
王筱梦,孙芝兰,诸永志,卞欢,吴海虹,刘芳,江芸,王道营,徐为民
2017, 38(16):  261-267.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716042
摘要 ( 89 )   HTML ( 0)   PDF (3097KB) ( 72 )  
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对江苏省苏州市具有代表性的某羊屠宰场的屠宰环境及熟制品加工车间进行微生物检测,重点对 熟制品加工过程进行检测,包括煮制车间的接触面、各加工车间的空气以及清洗前后的生肉与煮制后的熟 肉,以确定熟制品加工过程中污染菌群的分布。结果表明,熟制品加工过程中各加工车间空气细菌数均低于 10 CFU/皿,表明空气质量合格。而煮制车间的接触面污染较严重致使交叉污染造成熟制羊肉的菌落总数达到 3.23(lg(CFU/cm2))。结合形态观察和16S rDNA菌种鉴定,所污染的菌主要为芽孢杆菌、腐生葡萄球菌、变 形杆菌、金黄杆菌和微杆菌等。随后选取3 个污染菌芽孢杆菌(Bacillus sp. M1、Bacillus sp. M9)和腐生葡萄球 菌(Staphylococcus saprophyticus M7),通过对熟制羊肉的感官评分、pH值、菌落总数、挥发性盐基氮值和腐败 代谢产物产量因子的测定评定它们对熟制羊肉的致腐能力。结果显示,Bacillus sp. M1的致腐能力最强且明显高于 S. saprophyticus M7和Bacillus sp. M9,为有效预防和控制熟制羊肉的微生物污染提供依据。
分散固相净化与气相色谱测定竹笋中21 种农药残留
沈丹玉,袁新跃,刘毅华,钟冬莲,莫润宏,汤富彬
2017, 38(16):  268-273.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716043
摘要 ( 67 )   HTML ( 0)   PDF (2241KB) ( 100 )  
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通过比较不同吸附剂对竹笋提取液的净化效果和对电子捕获检测器(electron capture detector,ECD)基线 的影响,建立竹笋中21 种有机氯和拟除虫菊酯类农药残留的气相色谱分析方法。竹笋样品用乙腈提取,加入无水 硫酸镁、弗罗里硅土、N-丙基二乙胺(primary secondary amine,PSA)、强阳离子、石墨化炭黑进行分散固相净 化,气相色谱-ECD测定。方法学结果表明,竹笋中21 种有机氯和拟除虫菊酯农药具有良好的线性关系,检出限为 0.079~1.77 μg/kg,定量限为0.26~5.89 μg/kg,经PSA净化平均回收率为92.97%,相对标准偏差为1.06%~6.07%。 方法应用于我国竹笋主产区的质量安全风险监测,230 个样品中,除了氰戊菊酯,其余农药均有不同程度的检出, 其中检出率最高的是p,p´-滴滴伊(33.48%)、δ-六六六(26.52%)和氯氟氰菊酯(26.09%);检出含量和超标率最 高的是噻嗪酮,为9 508.9 μg/kg和6.96%。
免疫亲和净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定食品中玉米赤霉烯酮类真菌毒素
邵瑞婷,张丽华,史娜,姜洁
2017, 38(16):  274-279.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716044
摘要 ( 32 )   HTML ( 0)   PDF (2536KB) ( 76 )  
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建立食品中6 种玉米赤霉烯酮类(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉 米赤霉酮、玉米赤霉烯酮)真菌毒素的免疫亲和净化-超高效液相色谱-串联质谱检测的实验方法。样品经80%乙 腈溶液提取,通过免疫亲和柱净化富集,用2 mL乙腈洗脱,氮吹至近干,0.5 mL 50%乙腈溶液复溶,采用超高 效液相色谱-串联质谱进行测定。在ACQUITY UPLC HSS T3反相柱上分离,梯度洗脱,流动相为乙腈和水,质 谱采集模式为电喷雾负离子多反应监测模式。6 种目标物的线性范围为0.1~100 μg/L,相关系数(R2)均大于 0.992,检出限为0.05 μg/kg,定量限为0.2 μg/kg,3 个不同水平的加标平均回收率为73.0%~119.1%,相对标准 偏差不大于10%。该方法具有操作简单、重复性好、灵敏度高、杂质干扰小等特点,可以用于食品中玉米赤霉烯 酮类真菌毒素的检测。
多重微滴式数字PCR定量检测市售核桃乳中核桃、大豆源性成分
杨硕,江丰,刘艳,李诗瑶,王鸣秋,马弋,林敏,张莉
2017, 38(16):  280-286.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716045
摘要 ( 45 )   HTML ( 0)   PDF (2556KB) ( 151 )  
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目的:为市售核桃乳中核桃源及主要掺杂物种大豆两种源性成分建立准确、快速定量检测方法。方法:从 植物组织(核桃、大豆)或是植物蛋白饮料(核桃乳饮料)提取核酸后,主要采用多重微滴式数字聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction,PCR)技术,测算单位质量核桃和大豆的目的基因拷贝数比值,建立基因拷贝数与质 量之间的关系,进而利用该比例关系换算出植物蛋白饮料中核桃和大豆的投料量,以实现对植物蛋白饮料中植物源 性成分的定量检测。结果:基于多重微滴式数字PCR定量检测市售产品中大豆和核桃源性组分的方法,引物探针特 异性好,目标物种间无交叉反应;灵敏度高,核桃中掺杂大豆的质量检测限为0.5%,相对误差为5.6%。将单一源 性5 种不同质量下靶基因拷贝数之比与5 种不同比例混合源性靶基因拷贝数之比通过重复3 次检测,综合比较并拟 合后得到单位质量下拷贝数(C大豆/C核桃=1.771 1)的换算比例值。在从商品超市中抽取的11 份不同品牌的核桃乳中 (仅含核桃一种植物源成分),多重微滴式数字PCR方法检测显示:11 份样品均检出核桃源性成分,6 份样品检出 大豆源性成分,其中4 份样品中大豆与核桃质量之比高于10%,判断存在掺杂使假;2 份样品大豆与核桃质量之比 低于0.2%,极低的检出量推断为工艺沾染。结论:采用多重微滴式数字PCR准确、快速的定量方法可作为鉴别核桃 乳中掺杂使假问题的有效手段。

微滴式数字PCR技术定量检测发酵乳中金黄色葡萄球菌
周巍,李月华,孙勇,李永波,张涛,刘琼,张岩,王丽霞
2017, 38(16):  287-291.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716046
摘要 ( 73 )   HTML ( 0)   PDF (2286KB) ( 210 )  
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基于微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)技术,建立发酵乳中 金黄色葡萄球菌定量检测方法。以金黄色葡萄球菌nuc基因为目的片段设计特异性的引物和探针,优化反应体系, 通过活菌提取和ddPCR方法对靶标基因的检测特异性和灵敏度进行实验,并对定量结果进行分析。本研究建立了发 酵乳中ddPCR技术定量检测金黄色葡萄球菌的方法,检测特异性良好,检测灵敏度为3.3×101 CFU/g,定量的偏差 率为+10.18%,证明了ddPCR用于绝对定量检测的可行性,为其他食品污染菌和致病菌标准化控制体系提供有益的 示范作用。
利用非线性化学指纹图谱法检测奶粉中掺杂的尿素含量
马永杰,包洪亮,董文宾
2017, 38(16):  292-297.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716047
摘要 ( 54 )   HTML ( 0)   PDF (2526KB) ( 53 )  
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采用“硫酸-丙二酸-溴酸钠-溴化钠-硫酸铈铵”为振荡体系,利用非线性化学指纹图谱法测定奶粉中 掺杂的尿素。先向奶粉中掺入不同量的尿素,配成掺杂尿素的奶粉标样,每份奶粉标样的总量为1.00 g。通过 非线性化学指纹图谱法对奶粉标样进行测定,运用最小二乘法,拟合出诱导时间相对于奶粉中掺杂尿素含量之 间的一元线性关系,可求出奶粉中掺杂的尿素含量。实验表明该方法可以达到以下指标:当奶粉中掺杂的尿素 含量在0~40.00 mg/g范围内时,尿素含量与诱导时间线性关系良好,相关系数R2为0.996 6和0.999 5,回收率为 95.48%~104.06%,相对标准偏差不大于1.82%,奶粉1#检出限为3.3×10-4 mg/g,奶粉2#检出限为4.5×10-4 mg/g, 奶粉3#检出限为1.1×10-4 mg/g。方法准确度高,操作简单,是一种切实可行的测定奶粉中掺杂尿素的方法,也可 作为复杂样本中其他成分定量分析借鉴的方法。
基于癸硫醇修饰的银纳米点阵列的苯并(a)芘检测
肖旺,孙大文,蒲洪彬,韦庆益
2017, 38(16):  298-303.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716048
摘要 ( 79 )   HTML ( 0)   PDF (2944KB) ( 79 )  
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利用阳极氧化铝模板法制备大面积高度有序的可调控的银纳米点阵列,并在其表面组装一层癸硫醇单分 子层用于水中苯并(a)芘(benzo(a)pyrene,BaP)的快速检测。首先,通过扫描电镜、紫外-可见透过光谱、罗丹 明6G探针分子对不同扩孔时间制备的银纳米点阵列进行表征,结果表明扩孔时间为80 min制备的基底拉曼增强效 果最好,增强因子可达1.6×106。然后,在此基底表面修饰一层癸硫醇分子,利用癸硫醇与BaP之间的疏水相互作 用可以实现BaP的预富集,进而实现BaP的高灵敏度、稳定的检测。研究表明:利用此基底检测BaP的检测限可达 1.0 ng/mL,特征峰处的相对标准偏差为9.7%,满足高稳定性表面增强拉曼光谱基底的标准。该方法在BaP快速检测 方面具有极大的潜力。
宁波市售3 种食用鱼类中多氯联苯残留特征及其健康风险评估
柴丽月,邱纪时,钟惠英,苏晴,翁佩芳,段青源
2017, 38(16):  304-309.  doi:10.7506/spkx1002-6630-201716049
摘要 ( 70 )   HTML ( 0)   PDF (2269KB) ( 100 )  
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对宁波市场销售的3 种常见食用鱼类——大黄鱼、带鱼和马鲛鱼中7 种指示性多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs)残留量进行分析与评价,探讨PCBs污染物在鱼类不同部位中的组成特征并进行人体健康风险 评估。结果表明:3 种鱼肉中PCBs含量由大到小分别为大黄鱼(3.82±1.20) μg/kg、带鱼(2.00±1.32) μg/kg 和马鲛鱼(1.36±0.40) μg/kg。其中,带鱼中PCB52含量最高,为(0.78±0.07) μg/kg,马鲛鱼和大黄鱼均以PCB153 含量最高,马鲛鱼为(1.59±0.10) μg/kg,大黄鱼为(0.33±0.09) μg/kg;3 种鱼类不同部位PCBs平均含量由大 到小分别为皮(3.87 μg/kg)、性腺(2.57 μg/kg)、肝脏(2.53 μg/kg)、鳃(1.95 μg/kg)和肌肉(1.57 μg/kg)。 根据GB 2762—2012《食品中污染物限量》中关于海产食品中PCBs允许限量(不大于0.5 mg/kg)的规定,3 种鱼类 中PCBs残留量在可接受的范围内。