QuEChERS-气相色谱-串联质谱法检测鱼腥草中121种农药残留

苟 琰1,2,高 驰1,邓晶晶1,耿 昭2,*,袁 军2,李 敏1,*,周 娟2,郭 力1,包晓明3

(1.成都中医药大学药学院,四川 成都 611137;2.四川省食品药品检验检测院,国家药品监督管理 局中成药质量评价重点实验室,四川 成都 61173 1;3.岛津企业管理(中国)有限公司,四川 成都 610023)

摘 要:建立鱼腥草中121 种农药残留的QuEChERS-气相色谱-串联质谱方法,并应用于68 批样品筛查。对样品前处理和色谱方法进行优化。最终确定样品以乙腈进行提取,QuEChERS法进行净化处理,采用气相色谱-串联质谱在多反应监测模式下进行检测分析。121 种农药在一定含量范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.997 3;3 个添加水平进行回收率实验表明,回收率在60%~140%范围内的农药数占总数的90.9%,86. 8%的农药相对标准偏差小于15%。121 种农药检出限(RSN=3)范围为0.000 1~0.1 mg/kg,绝大多数小于0.01 mg/kg。68 批样品种共检出27 种农药。该方法简便、灵敏、准确,可用于鱼腥草中多农药残留的快速筛查与检测。检测结果为鱼腥草的种植生产和流通监管提供参考依据。

关键词:鱼腥草;农药残留;气相色谱-串联质谱法;QuEChERS

鱼腥草又名折耳根、猪鼻拱、紫蕺、臭菜等,在我国有广泛分布。原植物为三白草科植物蕺菜(Houttuynia cordata Thunb.)[1],具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋的功效,现代研究证明其具有较好的抗炎活性[2-3]。作为药食两用植物,鱼腥草在我国有着悠久的食用历史[4],其营养价值高,成分含量丰富,不仅可以作为蔬菜食用,还常被作为茶饮品[5],深受云、贵、川、渝、湘等地老百姓喜爱,并广泛出口至日、韩等国[6-7]。据产出效益统计,其食用产出值已经是药用产出的数倍[8-9],有十分广阔的开发利用价值。随着市场需求的不断增大,全国各产区均大力研发栽培品种及技术[10]。然而,在大面积生产种植过程中,对于病虫害[11]的防治不乏要使用到各种农药[12],在当前倡导有机、绿色的食品环境下,控制鱼腥草中农药残留是不容忽视的问题,同时农药的不合理使用也存在着一定的安全风险[13]。近年来,关于鱼腥草中农药残留检测研究有一定报道[14-15],但综合考量,其所涉及到的农药种类较少,缺乏较为系统的研究和数据,难以满足当前不断提高的检验检测要求。农药多残留检测[16-19]目前获得了广泛的关注,色谱-质谱联用技术[20-23]是目前最为重要的农药多残留检测方法,具有高灵敏度、专属性强、定性定量同时进行、高通量等优点。QuEChERS[24-25](quick, easy, cheap, effective,rugged, and safe)是近年来国际上发展起来的一种农药残留检测的快速样品前处理技术,最先应用于蔬菜水果中,其简单有效、安全快速的特点非常适合于基质复杂的样品前处理[26-28]。鱼腥草含有挥发性成分、黄酮类、皂苷类等多种成分[29],基底较为复杂。本研究采用气相色谱-串联质谱(gas chromatography-tandem mass spectrometry,GCMS/MS)技术结合QuEChERS样品前处理法建立快速筛查鱼腥草中121 种农药残留的检测方法,并应用于所收集到的大批量具有代表性的鱼腥草样品,旨在为鱼腥草的规范化种植生产和市场安全监管提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

供试样品来源均为市场购买和产地采集,涵盖野生和种植基地样品,共68 批,分别来自四川、贵州、福建、云南、湖北等全国主要产区。

WondaPak QuEChERS乙酸钠提取包、WondaPak QuEChERS 15 mL C18/PSA/GC-e/硅胶净化管 美国Agilent公司;乙腈、丙酮(均为色谱纯) 美国Fisher Chemical公司;乙酸(分析纯) 成都科龙化工试剂厂;农药对照品溶液(100~1 000 μg/mL)、农药对照品(纯度>95%) 德国Dr. Ehrenstorfer GmbH公司、美国AccuStandard Inc公司、农业部环境保护科研监测所、北京曼哈格生物科技有限公司。

1.2 仪器与设备

TQ8040 GC-MS/MS联用仪 日本Shimadzu公司;Millipore Q超纯水器 美国Millipore公司;MS3 digital涡旋振荡器 德国IKA公司;3-30k离心机 德国Sigma公司。

1.3 方法

1.3.1 标准贮备液及工作溶液的配制

溶液型对照品,质量浓度为100~1 000 μg/mL,作为标准贮备液;固体对照品,精密称取适量,用乙腈溶解,配制成1 000 μg/mL的标准贮备液。均于-40 ℃保存。

在配制混合标准工作液时,充分考虑到每个化合物的响应情况,最终配制质量浓度各有不同:分别移取适量的标准贮备液,用丙酮配制成40~5 000 ng/mL的混合标准溶液,作为混合标准工作液。

1.3.2 样品前处理

1.3.2.1 样品提取

样品用打粉机粉碎,过三号筛孔径(355±13)μm,称取2 g(精确至0.01 g),至50 mL聚苯乙烯离心管中,加入1%乙酸溶液15 mL,涡旋30 s,使药粉充分浸润,放置30 min,精密加入乙腈15 mL,置涡旋振荡器上剧烈振荡(3 000 r/min)5 min,-40 ℃放置20 min,加入无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末(质量比4∶1)7.5 g,立即摇散,再置涡旋振荡器上3 000 r/min剧烈振荡5 min,然后5 000 r/min离心5 min后待净化。

1.3.2.2 样品净化

取上清液8 mL,转移至预先装有900 mg无水硫酸镁、300 mg N-丙基乙二胺(primary secondary amine,PSA)、300 mg十八烷基硅烷键合硅胶、300 mg硅胶、90 mg石墨化碳黑的离心管中,盖紧离心管,涡旋5 min使净化完全,5 000 r/min离心5 min。

1.3.2.3 浓缩及溶剂替换

精密量取上清液3 mL,40 ℃氮吹至近干,用丙酮定容至2 mL,离心,取上清液上机分析。

1.3.3 色谱条件

色谱柱:Agilent DB-17MS(30 m×0.25 mm,0.25 μm);升温程序:60 ℃保持1 min,以30 ℃/min升至120 ℃,以10 ℃/min升至160 ℃,以2 ℃/min升至230 ℃,以15 ℃/min升至300 ℃,保持6 min,最后以20 ℃/min升至320 ℃,保持10 min;进样量1 μL,不分流;柱流速为线速度控制模式,初始流速1.3 mL/min;进样口温度240 ℃。

1.3.4 质谱条件

电子电离源;电子能量70 eV,离子源温度200 ℃;多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式;碰撞气为氦气;溶剂延迟时间5 min。

1.4 数据处理

通过岛津Labsolution软件进行数据分析和图像处理。

2 结果与分析

2.1 仪器条件确定

选择对中低极性化合物分离较好的毛细管柱色谱柱DB-17MS,通过SCAN模式扫描,确定农药的保留时间,通过对定性定量离子的确定及碰撞电压的优化后,建立MRM模式方法,每种农药选择1 对定量离子,2 对定性离子,按照保留时间顺序分段检测。每种农药的保留时间、定量离子、定性离子见表1。农药混合对照品总离子流图见图1。

图1 121 种农药混合对照品MRM总离子流图
Fig. 1 MRM total ion chromatograms of mixed standard solution of 121 pesticides

2.2 样品前处理条件优化

乙腈作为QuEChERS法中最为常用的提取溶剂,适用于提取极性范围较宽的多种农药,对水果蔬菜等含水量较高的样品即可直接提取,但对于含水量较低的样品,如果直接加乙腈进行提取,其提取效率往往不高。此次收集到的鱼腥草样品即是如此,故在提取前加入水浸泡,促使样品溶胀,以提高提取效率。另外考虑到QuEChERS提取包最佳使用环境为弱酸性,在水中加入1%乙酸溶液调整其pH值。

样品经乙腈提取后,如果直接加萃取盐包,会立即剧烈放热,不利于待测成分的检测,考察在加萃取盐包前放置在冰浴中20 min和直接放入冰箱冷冻室20 min,表明冰浴中放置的样品在加入盐包后仍会有较高的温度,而冰箱冷冻放置则可显著改善此情况。

鱼腥草其主要成分包括黄酮类、苷类、挥发油类成分,其全草均可食用,叶部分色素含量较高,在农残检测中,此类成分所带来的基质对于农药检测的干扰非常大;另外,由于大多数待测目标物均属于中低极性化合物,而鱼腥草中的挥发油类成分极性也较低,同样会带来一定程度的基质干扰,因此净化除杂步骤尤为重要。本课题组结合前期的大量基础工作[30],将目前常用的样品前处理方法分为3 种,第1种是基质对目标物不存在太大干扰的品种,可以在充分保证准确性的情况下,采用乙腈直接提取不净化的方式进行前处理;第2种和第3种方法为对于存在较大干扰需要进行净化的基质,在乙腈提取后,分别采用QuEChERS和SPE小柱进行净化,QuEChERS净化填料包括一定比例的PSA、石墨化碳、C18、硅胶及无水硫酸镁;SPE方法包括石墨化碳柱、HLB柱、弗罗里硅土及氨基柱等。由于QuEChERS为复合净化包,对杂质的净化优于单一净化填料,另外QuEChERS操作较为简单,更能保证结果的稳定性,综合考虑后,选用QuEChERS进行净化,另外除考察1.3.2.2节中净化方法,同时也采用专门针对脂质成分的EMRLipid dSPE(增强型脂质去除净化管(Agilent公司))进行净化效果筛选。结果,2 种方法从对基质的干扰情况看,无明显差异(图2、3),而EMR-Lipid dSPE方法操作较为繁琐,步骤更多,可能更易出现待测目标物损失的情况(图4),故采取1.3.2节所述方法。

图2 灭线磷母离子及其子离子色谱图
Fig. 2 Chromatograms of precursor and product ions of ethoprophos with sample clean-up by QuEChERS or EMR-Lipid dSPE

表1 121 种农药的质谱参数、保留时间、混标质量浓度、监测离子对、碰撞电压、相关系数( r)、线性范围、精密度、平均回收率、RSD及检出限
Table 1 Mass spectrometric parameters, retention times, mixed standard concentrations, monitoring ion pairs, collision energy, correlation coeffificients ( ),linear ranges, precision, average recoveries, RSDs and limits of detection of 121 pesticides

序号 化合物 保留时间/min收率/% RSD/% 检出限/(mg/kg)中文名称 英文名称混标质量浓度/(ng/mL)定量离子对m/z碰撞电压1/V定性离子对1 m/z碰撞电压2/V定性离子对2 m/z 电压3/V r 线性范围/(ng/mL)碰撞 精密度/%平均回1 二溴氯丙烷 1,2-dibromo-3-chloro 6.779 1 033.9 157.0>75.0 15 157.0>95.0 20 157.0>49.0 20 0.998 9 2.6~1 033.9 4.6 52.2 18.2 0.000 4 2 敌敌畏 dichlorvos 8.566 400.0 185.0>93.0 14 185.0>109.0 14 185.0>63.0 22 0.999 7 1.0~400.0 2.7 75.0 9.0 0.001 3 克草猛 pebulate 11.175 394.8 203.0>128.2 6 203.0>57.1 18 203.0>161.1 3 0.999 8 4.9~394.8 5.0 112 9.1 0.001 4 氯唑磷 isazofos 12.465 400.0 257.0>162.0 8 257.0>119.0 18 257.0>146.0 18 0.999 1 1.0~400.0 8.3 77.6 8.3 0.002 5 乙丁烯氟灵(丁氟消草) ethal fluralin 14.525 2 094.0 316.1>276.0 10 316.1>202.0 24 316.1>248.0 20 0.999 8 5.2~2 094.0 6.4 85.4 7.8 0.002 6 氟乐灵 tri fluralin 14.548 2 080.0 306.1>264.1 8 306.1>206.1 14 306.1>160.1 22 0.999 2 5.2~2 080.0 5.0 101.3 5.6 0.0005 7 灭草特(环草特) cycloate 16. 828 1 056.0 215.0>154.2 6 215.0>83.1 15 215.0>55.10 27 0.999 0 2.6~1 056.0 2.7 100.1 9.4 0.001 8 四氯硝基苯 tecnazene 16.911 995.0 260.9>202.9 14 260.9>230.9 8 260.9>195.9 14 0.999 5 2.5~995.0 5.3 64.4 9.5 0.001 9 灭线磷 ethoprophos 17.908 202.2 200.0>158.0 6 200.0>114.0 14 200.0>97.0 24 0.999 5 0.5~202.2 2.1 73.5 11.7 0.000 2 10 六氯苯 hexachlorobenzene 19.573 416.0 283.8>248.8 24 283.8>213.8 28 283.8>176.9 38 0.999 3 1.0~416.0 6.8 72.0 20.4 0.000 5 11 治螟磷 sulfotep 19.597 40.0 322.0>202.0 10 322.0>294.0 4 322.0>174.0 18 0.999 5 0.2~40.0 3.5 83.2 8.6 0.000 2 12 甲拌磷 phorate 19.958 400.0 260.0>75.0 8 260.0>231.0 4 260.0>47.0 26 0.999 6 2.0~400.0 4.6 58.8 5.4 0.002 13 五氯甲氧基苯 pentachloroanisole 20.036 402.0 265.0>237.0 15 280.0>265.0 10 280.0>237.0 25 0.999 4 1.01~402.0 4.7 102.5 9.6 0.000 2 14 α-六六六 α-benzene hexachloride 20.845 406.0 218.9>182.9 8 218.9>144.9 20 218.9>109.0 28 0.998 5 1.0~406.0 2.9 127.1 5.2 0.000 2 15 特丁硫磷 terbufos 21.898 416.0 231.0>174.9 14 231.0>128.9 26 231.0>202.9 8 0.999 6 1.0~416.0 3.8 52.7 5.7 0.001 16 丁基嘧啶磷 tebupirimfos 22.051 431.2 276.0>234.0 6 276.0>126.1 24 276.0>110.1 21 0.999 5 1.1~431.2 1.9 75.1 8.2 0.001 17 五氯硝基苯 quintozene 22.865 412.0 294.8>236.8 16 294.8>264.8 12 294.8>142.9 30 0.997 9 5.1~412.0 2.9 138.8 14.2 0.003 18 胺丙畏 propentamphos 22.946 394.0 236.1>194.0 6 236.1>166.0 16 236.1>88.0 22 0.999 5 1.0~394.0 3.3 98.0 5.4 0.001 19 氯硝胺 dicloran 23.616 403.8 206.0>176.0 10 206.0>160.0 16 206.0>124.0 24 0.999 7 5.1~403.8 4.2 58.5 9.5 0.004 20 异噁草酮 clomazone 23.642 424.0 204.1>107.0 20 204.1>78.0 26 204.1>68.0 24 0.999 8 10.6~424.0 3.9 116.3 6.9 0.02 21 γ-六六六 γ-benzene hexachloride 23.979 416.0 218.9>182.9 8 218.9>144.9 20 218.9>109.0 28 0.999 4 1.0~416.0 4.2 94.5 5.4 0.001 22 嘧霉胺 pyrimethanil 25.007 400.0 198.1>183.1 14 198.1>158.1 18 198.1>118.1 28 0.998 9 1.0~400.0 9.9 100.2 15.9 0.000 5 23 异稻瘟净 iprobenfos 25.830 41.6 204.0>91.0 8 204.0>122.0 12 204.0>171.0 6 0.999 8 0.52~41.6 1.3 97.3 10.7 0.000 4 24 β-六六六 β-enzene hexachloride 25.874 412.0 218.9>182.9 8 218.9>144.9 20 218.9>109.0 28 0.999 5 2.06~412.0 4.0 84.7 9.7 0.001 25 七氯 heptachlor 26.290 412.0 271.8>236.9 20 271.8>117.0 32 271.8>201.9 38 0.999 8 2.1~412.0 11.1 81.7 12.6 0.001 26 2,4-滴丁酯 2,4-d butyl ester 26.518 531.6 276.0>185.0 10 276.0>57.0 20 276.0>162.0 20 0.999 6 2.7~531.6 4.1 109.4 4.7 0.001 27 乙烯菌核利 vinclozolin 26.992 412.0 285.0>212.0 12 285.0>178.0 14 285.0>241.0 4 0.999 9 5.15~412 10.2 101.4 4.5 0.002 28 乙草胺 acetochlor 27.077 400.0 223.1>132.1 22 223.1>147.1 10 223.1>174.1 8 0.999 0 20.0~400.0 2.7 92.3 3.2 0.02 29 五氯苯胺 pentachloroaniline 27.394 396.0 262.8>191.9 21 264.8>193.9 21 264.8>191.9 21 0.999 9 1.0~396.0 7.5 134.7 6.5 0.001 30 甲草胺 alachlor 28.082 397.5 188.1>160.1 10 188.1>132.1 18 188.1>117.1 26 0.997 3 1.0~397.5 5.6 107.9 6.2 0.000 3 31 δ-六六六 δ-benzene hexachloride 28.326 416.0 218.9>182.9 10 218.9>144.9 20 218.9>109.0 28 0.999 9 1.0~416.0 5.5 111.1 10.6 0.001 32 百菌清 chlorothalonil 28.460 400.0 265.9>230.8 14 265.9>168.0 22 265.9>133.0 28 0.998 6 1.0~400.0 3.8 136.8 14.9 0.001 33 艾氏剂 aldrin 28.849 400.0 262.9>193.0 28 262.9>203.0 26 262.9>191.0 34 0.999 5 2.0~400.0 5.0 85.2 13.6 0.003 34 甲基毒死蜱 chlorpyrifos-methyl 28.885 401.9 285.9>93.0 22 285.9>270.9 14 285.9>240.9 26 0.999 6 20.1~401.9 0.9 71.6 11.4 0.02 35 敌稗 propanil 29.337 398.4 160.9>99.0 24 160.9>90.0 22 160.9>126.0 18 0.999 1 1.0~398.4 5.6 63.6 8.9 0.002 36 甲基立枯磷 tolclofos-methyl 30.231 422.8 264.9>249.9 14 264.9>93.0 24 264.9>219.9 22 0.999 6 1.1~422.8 7.1 70.7 8.8 0.000 3 37 甲基对硫磷 parathion-methyl 30.298 408.4 263.0>109.0 6 263.0>136.0 8 263.0>246.0 14 0.998 6 5.1~408.4 2.8 67.7 9.1 0.002 38 仲丁灵 butralin 30.293 398.0 266.1>236.1 8 266.1>190.1 12 266.1>174.1 22 0.999 7 5.0~398.0 3.9 67.0 11.0 0.02 39 莠灭净 ametryn 30.480 407.2 227.1>170.1 14 227.1>185.1 6 227.1>58.0 14 0.999 8 1.0~407.2 5.5 74.3 7.1 0.001 40 甲基嘧啶磷 pirimiphos-methyl 30.456 400.0 305.1>180.1 8 305.1>290.1 12 305.1>125.0 28 0.999 8 1.0~400.0 2.3 115.4 8.7 0.003 41 甲霜灵 metalaxyl (mefenoxam) 30.692 400.8 249.2>190.1 8 249.2>146.1 22 249.2>217.1 6 0.999 7 2.0~400.8 6.2 102.9 6.9 0.002 42 异丙甲草胺 metolachlor (S-metolachlor) 30.814 406.4 238.1>162.1 12 238.1>133.1 26 238.1>77.0 24 0.999 7 5.1~406.4 10.8 62.9 10.5 0.002 43 毒死蜱 chlorpyrifos 31.626 192.5 313.9>257.9 14 313.9>285.9 8 313.9>193.9 28 0.999 8 2.4~192.5 5.7 74.3 16.4 0.001 44 氟虫腈 fipronil 32.186 411.6 366.9>212.9 30 366.9>254.9 22 366.9>331.9 14 0.999 6 10.3~411.6 6.0 78.2 5.6 0.02 45 马拉硫磷 malathion 32.319 309.5 173.1>99.0 14 173.1>127.0 6 173.1>145.0 6 0.999 8 0.8~309.5 5.2 82.7 17.6 0.000 3 46 杀螟硫磷 fenitrothion 32.355 430.0 277.0>260.0 6 277.0>109.1 14 277.0>228.0 14 0.999 9 2.2~430.0 8.8 90.8 9.4 0.001 47 乙氧呋草黄 ethofumesate 32.462 413.6 286.0>207.2 9 286.0>161.1 18 286.0>137.1 24 0.999 6 20.7~413.6 6.0 124.9 5.7 0.02 48 对硫磷 parathion 32.732 4 417.4 291.1>109.0 14 291.1>137.0 6 291.1>81.0 24 0.999 6 11.0~4 417.4 6.0 126.2 7.7 0.002 49 三氯杀螨醇 dicofol 33.535 400.0 250.0>139.0 14 250.0>215.0 8 250.0>111.0 28 0.999 8 5.0~400.0 8.7 143.2 3.1 0.004 50 溴硫磷 bromophos 33.999 396.0 330.9>315.9 14 330.9>285.9 28 330.9>93.0 28 0.999 95 1.0~396.0 4.1 149.6 7.1 0.001 51 二甲戊灵 pendimethalin 34.067 408.0 252.1>162.1 10 252.1>191.1 8 252.1>208.1 6 0.999 1 5.1~408.0 7.6 103.1 7.4 0.002 52 氟节胺 flumetralin 34.288 2 010.0 404.0>143.0 18 404.0>157.0 35 404.0>292.2 25 0.997 9 50.2~2 010.0 3.6 69.4 8.6 0.02 53 甲基异柳磷 isofenphos-methyl 34.487 405.6 241.1>199.1 6 241.1>121.1 22 241.1>167.1 14 0.998 1 5.1~405.6 5.4 95.4 7.4 0.001 54 异柳磷 isofenphos 35.001 400.0 255.0>121.1 24 255.0>213.1 6 255.0>185.1 12 0.999 7 2.0~400.0 3.9 109.4 6.2 0.001 55 三唑醇-1 triadimenol-1 35.406 5 025.0 168.1>70.0 10 168.1>112.1 4 168.1>150.1 6 0.999 2 12.6~5 025.0 9.3 81.2 6.7 0.002 56 嘧菌环胺 cyprodinil 35.498 416.8 224.1>208.1 16 224.1>197.1 22 224.1>131.1 14 0.999 8 1.0~416.8 8.8 83.9 10.4 0.000 4 57 反-氯丹 trans-chlordane 35.705 404.0 372.8>336.8 10 372.8>263.9 28 372.8>265.9 22 0.999 9 2.0~404.0 2.2 120.3 10.5 0.01

续表1

序号 化合物 保留时间/min 收率/% RSD/% 检出限/(mg/kg)中文名称 英文名称混标质量浓度/(ng/mL)定量离子对m/z碰撞电压1/V定性离子对1 m/z碰撞电压2/V定性离子对2 m/z 电压3/V r 线性范围/(ng/mL)碰撞 精密度/%平均回58 丁草胺 butachlor 35.743 400.0 176.0>147.0 13 176.0>134.0 13 176.0>158.0 12 0.999 5 50.0~400.0 11.7 118.1 8.4 0.02 59 乙基溴硫磷 bromophos-ethyl 36.066 421.2 358.9>302.9 16 358.9>330.9 10 358.9>238.9 38 0.998 3 2.1~421.2 7.5 115.1 8.6 0.000 4 60 三唑醇-2 triadimenol-2 36.163 5 025.0 168.1>70.0 10 168.1>112.1 4 168.1>150.1 6 0.999 9 12.6~5 025.0 2.9 91.0 6.5 0.005 61 腐霉利 procymidone 36.677 423.6 283.0>96.0 10 283.0>255.0 12 283.0>68.0 24 0.999 1 2.1~423.6 2.3 73.0 4.2 0.001 62 顺-氯丹 cis-chlordane 36.838 412.0 372.8>336.8 10 372.8>263.9 28 372.8>265.9 22 0.999 6 2.0~412.0 14.0 71.1 13.6 0.01 63 α-硫丹 α-endosulfan 37.114 408.0 241.0>206.0 15 241.0>170.0 17 241.0>241.0 5 0.999 4 5.1~408.0 9.1 140.1 10.7 0.01 64 多效唑 paclobutrazol 37.395 422.0 236.1>125.0 14 236.1>167.0 10 236.1>132.0 16 0.999 3 1.1~422.0 4.9 130.9 8.6 0.001 65 丙草胺 pretilachlor 38.122 397.2 262.1>202.1 10 262.1>174.1 18 262.1>145.1 26 0.999 8 2.0~397.2 2.7 102.9 6.1 0.001 66 噁草酮 oxadiazon 38.517 408.3 258.0>175.0 8 258.0>112.0 28 258.0>147.0 14 0.999 3 1.0~408.3 3.3 122.0 4.7 0.000 5 67 哌草丹 dimepiperate 38.642 407.9 145.1>112.1 8 145.1>69.1 18 145.1>84.1 18 0.994 9 1.0~407.9 2.1 148.0 6.2 0.000 3 68 吡氟禾草灵 fluazifop-butyl 39.415 396.0 282.0>91.0 20 282.0>238.0 18 282.0>254.0 10 0.999 4 2.0~396.0 7.0 84.3 6.5 0.001 69 p,p'-滴滴伊 p,p'-1,1'-(dichloroethenylidene)bis(chloro-benzene) 39.556 416.0 246.0>176.0 30 246.0>211.0 22 246.0>220.0 24 0.999 8 1.0~416.0 3.1 125.8 5.9 0.000 1 70 狄氏剂 dieldrin 39.862 400.0 276.9>241.0 8 276.9>170.0 38 276.9>172.0 38 0.999 9 10.0~400.0 4.8 84.9 12.0 0.02 71 氟酰胺 flutolanil 40.026 41.4 173.0>145.0 14 173.0>95.0 26 173.0>125.0 26 0.999 2 2.0~41.4 4.3 133.2 6.8 0.000 2 72 噻嗪酮 buprofezin 40.460 398.0 172.1>57.0 14 172.1>131.1 6 172.1>116.1 8 0.999 6 2.0~398.0 2.8 122.5 8.8 0.001 73 丙溴磷 profenofos 40.674 403.9 336.9>266.9 14 336.9>308.9 6 336.9>294.9 10 0.999 8 5.0~403.9 4.1 118.9 11.0 0.002 74 烯效唑 uniconazole 40.872 400.0 234.1>165.0 8 234.1>216.1 12 234.1>137.0 14 0.999 8 5.0~400.0 4.5 62.4 11.6 0.003 75 苯线磷 fenamiphos 41.006 500.0 303.1>195.1 8 303.1>154.1 18 303.1>122.0 20 0.999 9 6.2~500.0 7.7 138.0 16.3 0.01 76 灭菌丹 folpet 41.024 2 000.0 259.9>130.0 14 259.9>95.0 20 259.9>102.0 28 0.999 3 25.0~2 000.0 7.6 121.8 20.0 0.04 77 虫螨腈 chlorfenapyr 41.414 1 992.0 363.0>246.9 27 363.0>328.0 12 363.0>307.9 24 0.999 5 49.8~1 992.0 7.0 127.6 6.4 0.02 78 甲基硫环磷 phosfolan methyl 42.764 3 078.0 227.0>92.0 15 227.0>154.0 12 227.0>194.1 3 0.999 9 38.5~3 078.0 16.9 111.7 16.4 0.01 79 异狄氏剂 endrin 43.131 396.0 262.9>191.0 30 262.9>193.0 28 262.9>228.0 22 0.999 9 1.0~396.0 2.9 97.9 11.5 0.01 80 烯唑醇 diniconazole 43.414 407.0 268.0>232.0 12 268.0>149.0 24 268.0>136.0 24 0.999 9 5.1~407.0 6.9 100.7 22.2 0.000 4 81 除草醚 nitrofen 43.563 399.9 283.0>162.1 22 283.0>253.0 12 283.0>202.1 12 0.999 7 1.0~399.9 4.4 103.3 5.0 0.01 82 o,p'-滴滴涕 o,p'-dichlorodiphenyltrichloroethane 43.955 424.0 235.0>165.0 24 235.0>199.0 16 235.0>149.0 40 0.999 4 1.1~424.0 12.4 105.4 5.9 0.02 83 p,p'-滴滴滴 p,p'-bis(6-hydroxy-2-naphthyl) disul fide 43.988 412.0 235.0>165.0 24 235.0>199.0 14 235.0>99.0 30 0.998 4 1.0~412.0 1.9 100.1 4.4 0.005 84 稻瘟灵 isoprothiolane 44.027 400.0 290.1>118.0 14 290.1>204.1 6 290.1>162.0 14 0.999 8 5.0~400.0 1.4 106.8 14.1 0.001 85 咯菌腈 fludioxonil 44.189 41.4 248.0>182.0 14 248.0>154.0 20 248.0>127.0 26 0.999 6 0.5~41.4 3.7 93.1 17.9 0.001 86 β-硫丹 β-endosulfan 45.043 408.0 241.0>206.0 15 241.0>170.0 17 241.0>241.0 5 0.998 9 1.02~408.0 12.6 75.3 4.1 0.002 87 p,p'-滴滴涕 p,p'-dichlorodiphenyltrichloroethane 45.112 408.0 235.0>165.0 24 235.0>199.0 16 235.0>149.0 40 0.999 8 5.1~408.0 13.4 120.9 10.0 0.000 2 88 三硫磷 carbophenothion 45.195 403.6 341.9>157.0 14 341.9>143.0 18 341.9>199.0 8 0.999 9 2.0~403.6 1.3 124.0 13.9 0.001 89 丙环唑-1 propiconazole-1 45.318 400.0 259.0>69.0 8 259.0>191.0 14 259.0>173.0 14 0.999 9 2.0~400.0 6.5 90.1 9.8 0.05 90 丙环唑-2 propiconazole-2 45.471 400.0 259.0>69.0 8 259.0>191.0 14 259.0>173.0 14 0.999 95 2.0~400.0 6.2 63.9 13.9 0.01 91 联苯菊酯 bifenthrin 45.804 400.0 181.1>166.1 12 181.1>153.1 8 181.1>179.1 12 0.997 3 0.5~40.2 6.9 117.0 9.8 0.000 5 92 倍硫磷亚砜 fenthionsulfoxide 45.853 40.2 279.0>169.0 17 279.0>109.0 20 279.0>153.0 11 0.999 4 1.1~424.8 4.2 94.8 5.4 0.01 93 硫丹硫酸酯 endosulfan sulfate 45.911 408.0 272.0>237.0 16 272.0>141.0 30 272.0>117.0 30 0.999 5 1.0~408.0 10.3 84.5 15.5 0.000 3 94 倍硫磷砜 fenthion-sulfone 46.120 394.4 310.0>105.0 17 310.0>136.0 18 310.0>246.0 5 0.999 5 9.9~394.4 3.7 101.2 5.2 0.001 95 三唑磷 triazophos 46.296 400.0 257.0>162.0 8 257.0>134.0 22 257.0>119.0 26 0.999 8 2.0~400.0 3.9 112.8 5.3 0.000 4 96 溴螨酯 bromopropylate 46.408 40.8 340.9>182.9 18 340.9>184.9 20 340.9>157.0 30 0.999 6 5.1~40.8 18.4 139.0 8.3 0.000 3 97 敌瘟磷 edifenphos 46.533 400.0 310.0>173.0 14 310.0>109.0 26 310.0>201.0 6 0.999 7 1.0~400.0 5.6 101.1 7.9 0.000 3 98 甲氰菊脂 fenpropathrin 46.514 400.0 265.0>210.1 12 265.1>172.1 14 265.1>89.0 28 0.995 8 50.0~400.0 13.6 112.2 4.8 0.001 99 氯氟氰菊酯-1 cyhalothrin-1 46.935 392.0 197.0>161.0 8 197.0>141.0 12 197.0>91.0 26 0.999 9 4.9~392.0 20.0 111.1 10.8 0.005 100 胺菊酯-1 tetramethrin-1 47.000 40.0 164.1>107.1 14 164.1>135.1 8 164.1>77.0 22 0.999 9 0.5~40.0 7.7 138.7 6.9 0.03 101 胺菊酯-2 tetramethrin-2 47.082 40.0 164.1>107.1 14 164.1>135.1 8 164.1>77.0 22 0.999 5 0.5~40.0 5.4 45.3 6.4 0.001 102 氯氟氰菊酯-2 cyhalothrin-2 47.305 392.0 197.0>161.0 8 197.0>141.0 12 197.0>91.0 26 0.999 5 2.0~392.0 11.3 105.1 22.9 0.06 103 双氧威 fenoxycarb 47.399 2 010.0 256.0>70.1 9 256.00>70.10 18 256.0>77.1 27 0.999 4 10.0~2 010.0 29.1 145.1 14.3 0.002 104 环嗪酮 hexazinone 47.438 40.3 171.1>71.0 16 171.1>85.0 16 171.1>101.1 12 0.998 1 0.2~40.3 9.1 148.9 8.7 0.000 1 105 灭蚁灵 mirex 48.047 42.0 271.8>236.8 18 271.8>141.0 30 271.8>117.0 30 0.999 9 2.1~42.0 12.2 99.5 6.9 0.000 1 106 精恶唑禾草灵 fenoxaprop-P 49.021 403.2 361.1>288.1 12 361.1>261.1 12 361.1>119.1 22 0.997 5 1.0~403.2 13.2 73.2 6.1 0.000 3 107 氯菊酯-1 permethrin-1 49.053 400.0 183.1>168.1 14 183.1>165.1 14 183.1>153.1 14 0.999 7 1.0~400.0 3.7 46.2 9.0 0.01 108 氯菊酯-2 permethrin-2 49.272 400.0 183.1>168.1 14 183.1>165.1 14 183.1>153.1 14 0.998 0 1.0~400.0 5.0 75.3 14.3 0.03 109 氟氯氰菊酯-1 cy fluthrin-1 49.773 2 100.0 226.1>206.1 14 226.1>199.1 6 226.1>151.1 28 0.999 3 5.2~2 100.0 2.4 97.2 15.3 0.05 110 氟氯氰菊酯-2 cy fluthrin-2 49.900 2 100.0 226.1>206.1 14 226.1>199.1 6 226.1>151.1 28 0.999 8 5.2~2 100.0 6.9 107.9 17.7 0. 1 111 氟氯氰菊酯-3 cy fluthrin-3 50.057 2 100.0 226.1>206.1 14 226.1>199.1 6 226.1>151.1 28 0.999 8 5.2~2 100.0 9.0 125.4 16.7 0.05 112 蝇毒磷 coumaphos 50.553 3 586.8 362.0>109.0 16 362.0>226.0 14 362.0>81.0 26 0.999 2 9.0~3 586.8 2.8 88.1 15.0 0.004 113 氯氰菊酯-1 cy fluthrin-1 50.649 397.2 163.1>127.1 8 163.1>128.1 8 163.1>91.0 15 0.997 9 2.0~397.2 7.1 99.6 20.1 0.01 114 氟氰戊菊酯-1 flucythrinate-1 50.754 409.2 199.1>157.1 10 199.1>107.1 22 199.1>171.1 8 0.999 9 1.0~409.2 5.0 84.8 4.3 0.03 115 氯氰菊酯-2 cy fluthrin-2 50.809 397.2 163.1>127.1 8 163.1>128.1 8 163.1>91.0 15 0.999 7 2.0~397.2 5.4 70.3 1.5 0.02 116 氯氰菊酯-3 cy fluthrin-3 50.977 397.2 163.1>127.1 8 163.1>128.1 8 163.1>91.0 15 0.999 4 2.0~397.2 13.5 85.0 10.1 0.03 117 氟氰戊菊酯-2 flucythrinate-2 51.157 409.2 199.1>157.1 10 199.1>107.1 22 199.1>171.1 8 0.999 4 1.0~409.2 7.1 83.5 6.3 0.03 118 氰戊菊酯-1 fenvalerate-1 52.996 1 972.1 419.1>225.1 6 419.1>167.1 12 419.1>125.1 26 0.999 7 4.9~1 972.1 7.4 89.6 10.8 0.01 119 氰戊菊酯-2 fenvalerate-2 53.406 1 972.1 419.1>225.1 6 419.1>167.1 12 419.1>125.1 26 0.999 6 4.9~1 972.1 5.6 73.5 5.8 0.1 120 啶酰菌胺 boscalid 53.450 415.5 342.1>140.1 14 342.1>112.1 28 342.1>204.1 8 0.999 1 1.0~415.5 7.2 88.9 9.9 0.000 2 121 溴氰菊酯-1 deltamethrin-1 54.786 4 000.0 252.9>93.0 20 252.9>171.9 8 252.9>77.0 26 0.999 7 10.0~4 000.0 6.2 90.4 7.3 0.02

图3 嘧霉胺母离子及其子离子色谱图
Fig. 3 Chromatograms of precursor and product ions of pyrimethanil with sample clean-up by QuEChERS or EMR-Lipid dSPE

图4 丙环唑母离子及其子离子色谱图
Fig. 4 Chromatograms of precursor and product ions of propiconazole with sample clean-up by QuEChERS or EMR-Lipid dSPE

2.3 方法学验证

2.3.1 线性关系与检出限

取空白基质样品3 g,按1.3.2节方法处理,在用净化包进行净化后,精密量取上清液3 mL,置氮吹仪上于40 ℃水浴浓缩至近干,分别加入混合标准工作液(表1)2 000、1 000、500、250、125、50、25、10、5 μL,加丙酮定容至2 mL,摇匀,用微孔滤膜(0.22 μm)滤过,即得系列基质混合对照品溶液(分别作为ST1~ST9)。按1.3.3节和1.3.4节进行测试,经选择离子定量扫描,以峰面积为纵坐标、以质量浓度为横坐标作标准曲线,得各农药的线性回归方程和相关系数。根据化合物响应情况,分别以ST8和ST9进行检出限计算,以定量离子信噪比RSN=3为样品检出限。结果表明,121 种农药线性良好,检出限绝大多数小于0.01 mg/kg(表1)。

2.3.2 精密度与回收率

取标准曲线ST6,连续进样6 次,计算各目标物响应相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)(表1)。样品称量后,分别精密加入混合对照品贮备液各0.05 mL(3 倍检出限)、0.1 mL(6 倍检出限)、0.25 mL(15 倍检出限),样品经1.3.2节方法处理后,每浓度各重复3 次,共9 份,结果回收率在60%~140%范围内的农药数占总数的90.9%,86.8%的农药RSD小于15%(表1)。

2.4 样品测定结果

来自全国主要产区68 批样品种共检出27 种农药,结果表2。

表2 样品检出批次及检出范围
Table 2 Detection rates and concentration ranges of 27 pesticides in 68 sample batches

序号 农药 检出批次范围/(mg/kg)1 甲氰菊酯 12 17.65 0.02~1.11 15 氰戊菊酯 2 2.94 0.06~0.94 2 毒死蜱 12 17.65 0.02~2.06 16 联苯菊酯 2 2.94 0.03~0.90 3 腐霉利 11 16.18 0.02~1.81 17 百菌清 2 2.94 0.03~0.17 4 三唑醇 8 11.76 0.06~3.03 18 甲霜灵 2 2.94 0.04 5 多效唑 7 10.29 0.004~1.04 19 氟氯氰菊酯 2 2.94 0.34~3.82 6 乙草胺 7 10.29 0.02~0.07 20 氟虫腈 1 1.47 0.52 7 丙环唑 6 8.82 0.02~0.08 21 噻嗪酮 1 1.47 0.31 8 氯氟氰菊酯 6 8.82 0.03~3.18 22 虫螨腈 1 1.47 1.46 9 嘧霉胺 6 8.82 0.003~0.02 23 二甲戊灵 1 1.47 0.01 10 丙溴磷 4 5.88 0.13~0.40 24 五氯苯胺 1 1.47 0.05 11 氯菊酯 4 5.88 0.02~0.20 25 胺菊脂 1 1.47 0.01 12 氯氰菊酯 3 4.41 0.25~2.79 26 嘧菌酯 1 1.47 0.69 13 三唑磷 3 4.44 0.04~0.43 27 莠灭净 1 1.47 0.02 14 啶酰菌胺 2 2.94 0.01~0.11检出率/%(mg/kg) 序号 农药 检出批次范围/检出率/%

表3 不同来源样品检出农药种类
Table 3 Number of pesticide detected in Houttuynia cordata Thunb.from different geographical regions

序号 野生/种植 购买地 产地 检出农药种植 购买地 产地 检出农药种类S-1 种植 市场 四川广汉 18 S-35 种植 产地 四川绵阳 /S-2 野生 市场 贵州贵阳 4 S-36 种植 市场 福建龙岩 /S-3 野生 市场 四川成都 / S-37 种植 市场 贵州贵阳 1 S-4 种植 市场 云南昆明 1 S-38 种植 市场 四川绵阳 1 S-5 野生 市场 四川绵阳 4 S-39 种植 市场 贵州安顺 1 S-6 野生 市场 贵州安顺 7 S-40 种植 市场 江西南昌 1 S-7 野生 市场 四川成都 2 S-41 种植 市场 四川成都 /S-8 野生 市场 贵州贵阳 / S-42 种植 市场 云南昆明 /S-9 野生 市场 贵州贵阳 / S-43 种植 市场 云南文山 /S-10 野生 市场 四川成都 1 S-44 种植 市场 湖北十堰 /S-11 种植 产地 江西南昌 / S-45 种植 市场 贵州贵阳 /S-12 种植 产地 江西南昌 / S-46 种植 市场 贵州毕节 2 S-13 种植 产地 四川巴中 / S-47 种植 市场 四川成都 3 S-14 种植 产地 四川巴中 / S-48 种植 市场 贵州安顺 /S-15 野生 产地 福建龙岩 / S-49 种植 市场 江西南昌 /S-16 野生 产地 福建龙岩 / S-50 种植 市场 广西南宁 7 S-17 种植 产地 重庆綦江 / S-51 种植 市场 贵州贵阳 /S-18 种植 产地 重庆綦江 / S-52 种植 市场 湖北竹山 1种类 序号 野生/

续表3

注:/.未检出。

序号 野生/种植 购买地 产地 检出农药种类S-19 种植 产地 湖北十堰 / S-53 种植 市场 四川成都 /S-20 种植 产地 湖北十堰 / S-54 种植 市场 云南昆明 /S-21 种植 产地 四川江油 1 S-55 种植 市场 四川江油 4 S-22 种植 产地 四川江油 7 S-56 种植 产地 江西南昌 1 S-23 野生 产地 重庆石柱 / S-57 种植 产地 江西南昌 1 S-24 种植 产地 广西钦州 / S-58 种植 产地 四川巴中 /S-25 野生 产地 贵州毕节 / S-59 种植 产地 四川巴中 /S-26 种植 产地 贵州铜仁 / S-60 种植 产地 福建龙岩 /S-27 种植 产地 云南文山 / S-61 种植 产地 福建龙岩 /S-28 种植 产地 云南文山 2 S-62 种植 产地 重庆忠县 /S-29 种植 产地 四川广汉 5 S-63 种植 产地 重庆忠县 /S-30 野生 产地 四川都江堰 / S-64 种植 产地 湖北竹山 /S-31 野生 产地 四川彭州 / S-65 种植 产地 湖北竹山 1 S-32 种植 产地 四川江油 1 S-66 种植 产地 四川江油 6 S-33 种植 产地 四川江油 1 S-67 种植 产地 四川江油 4 S-34 种植 产地 四川绵阳 1 S-68 种植 产地 广西柳州 5种植 购买地 产地 检出农药种类 序号 野生/

由表3可知,鱼腥草中农残检出率接近50%,野生和栽培、自采和购买的样品中都有检出,检出率相差不大,说明使用农药是比较普遍的情况。29 批有检出的样品中,共检出27 种农药,仅检出1 种农药的批次为14 批,检出2 种及以上农药的批次为15 批,有甚者1 批样品检出10余种农药,且残留量均处于较高水平,说明目前尚有不少鱼腥草栽培种植中的农药使用仍处于较为混乱的状态。

3 讨论与结论

参考GB 2763—2016《食品中农药最大残留限量》[31]及NY/T 2874—2015《农药每日允许摄入量》[32],检出的农药中,氯氰菊酯、毒死蜱、三唑醇、多效唑、氟氯氰菊酯属于残留量较高,甲氰菊酯、毒死蜱、腐霉利属于检出率较高,另外,如丙溴磷、五氯苯胺等属于中等毒性农药,以上农药均值得关注。

农药残留检测属于痕量检测,鱼腥草作为药材和蔬菜主要食用部位为地上部分或全草,样品基质中色素和脂溶性成分在前处理过程中应尽量除去,本研究在实际操作采用的QuEChERS法获得比较满意的效果,90.9%的农药回收率在60%~140%之间[33],根据回收率添加水平分析,能较为准确地定性和定量;对于可能由于化合物性质或者基质影响的原因造成回收率偏高或偏低的农药,此方法可作为筛查方法,如需要准确定量,可以采用以回收率进行折算的方式获得更为准确的结果。本研究操作简便、稳定性高,大幅提高了检测通量。通过广泛收集样品的数据累积,对有检出农药残留品种进行风险评估,为鱼腥草中农残检测和限量制定提供数据支持,以促进其进一步规范种植和减少安全风险。

参考文献:

[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典: 一部[S]. 2015版. 北京:中国医药科技出版社, 2015: 224.

[2] FU J G, DAI L, LIN Z, et al. Houttuynia cordata Thunb.: a review of phytochemistry and pharmacology and quality control[J]. Chinese Medicine, 2013, 4(3): 101-123. DOI:10.4236/cm.2013.43015.

[3] 陈婧. 基于鱼腥草抗炎活性的质量评价及其作用机制研究[D].武汉: 华中科技大学, 2014.

[4] 洪纬. 食物、药物和景物: 鱼腥草在传统中国的利用[J]. 中国农史,2016, 35(6): 111-120.

[5] SHINGNAISUI K, DEY T, MANNA P, et al. Therapeutic potentials of Houttuynia cordata Thunb. against inflammation and oxidative stress: a review[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2018, 220: 35-43.DOI:10.1016/j.jep.2018.03.038.

[6] HAN K, JIN C, CHEN H J, et al. Structural characterization and anti-A549 lung cancer cells bioactivity of a polysaccharide from Houttuynia cordata[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2018, 120: 288-296. DOI:10.1016/j.ijbiomac.2018.08.061.

[7] LU Y, JIANG Y, LING L J, et al. Beneficial effects of Houttuynia cordata polysaccharides on “two-hit” acute lung injury and endotoxic fever in rats associated with anti-complementary activities[J].Acta Pharmaceutica Sinica B, 2018, 8(2): 218-227. DOI:10.1016/j.apsb.2017.11.003.

[8] 陈黎. 川渝地区鱼腥草资源化学成分研究[D]. 雅安: 四川农业大学,2008.

[9] 童文, 李敏, 孙佩, 等. 药食同源植物鱼腥草研究现状[J]. 辽宁中医药大学学报, 2018, 20(6): 183-185. DOI:10.13194/j.issn.1673-842x.2018.06.053.

[10] 张思荻. 鱼腥草规范化生产技术标准化研究[D]. 成都: 成都中医药大学, 2018.

[11] 赵茜. 鱼腥草炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)的研究[D].雅安: 四川农业大学, 2010.

[12] KOLBERG D I, PRESTES O D, ADAIME M B, et al. Development of a fast multiresidue method for the determination of pesticides in dry samples (wheat grains, flour and bran) using QuEChERS based method and GC-MS[J]. Food Chemistry, 2011, 125: 1436-1442. DOI:10.1016/j.foodchem.2010.10.041.

[13] XU Z L, WANG Q, LEI H T, et al. A simple, rapid and high-throughput fluorescence polarization immunoassay for simultaneous detection of organophosphorus pesticides in vegetable and environmental water samples[J]. Analytica Chimica Acta, 2011, 708(1/2): 123-129.DOI:10.1016/j.aca.2011.09.040.

[14] 陈顺琴, 张勇, 李存雄, 等. 超声提取-气相色谱法测定鱼腥草中有机氯农药残留[J]. 理化检验: 化学分册, 2015, 51(6): 833-836.DOI:10.11973/lhjy-hx201506025.

[15] DU G, XIAO Y, YANG H R, et al. Rapid determination of pesticide residues in herbs using selective pressurized liquid extraction and fast gas chromatography coupled with mass spectrometry[J]. Journal of Separation Science, 2012, 35(15): 1922-1932. DOI:10.1002/jssc.201200169.

[16] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典: 四部[S]. 北京: 中国医药科技出版社, 2015: 212.

[17] 董亚蕾, 刘文婧, 曹进, 等. 国内食品中农药多残留检测技术的研究进展[J]. 分析试验室, 2017, 36(2): 241-248. DOI:10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2017.0053.

[18] CHEN H, PAN M, LIU X, et al. Evaluation of transfer rates of multiple pesticides from green tea into infusion using water as pressurized liquid extraction solvent and ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2017, 216: 1-9.DOI:10.1016/j.foodchem.2016.07.175.

[19] MARTINEZ-DOMINGUEZ G, NIETO-GARCIA A J, ROMEROGONZALES R, et al. Application of QuEChERS based method for the determination of pesticides in nutraceutical products (Camellia sinensis) by liquid chromatography coupled to triple quadrupole tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2015, 177: 182-190.DOI:10.1016/j.foodchem.2015.01.032.

[20] FERREIRA J A, FERREIRA J M, TALAMINI V, et al. Determination of pesticides in coconut (Cocos nucifera Linn.) water and pulp using modi fied QuEChERS and LC-MS/MS[J]. Food Chemistry, 2016, 213:616-624. DOI:10.1016/j.foodchem.2016.06.114.

[21] JIAO W, XIAO Y, QIAN X, et al. Optimized combination of dilution and refined QuEChERS to overcome matrix effects of six types of tea for determination eight neonicotinoid insecticides by ultra performance liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2016, 210: 26-34. DOI:10.1016/j.foodchem.2016.04.097.

[22] PALENIKOVA A, MARTINEZ-DOMINGUEZ G, ARREBOLA F J,et al. Multifamily determination of pesticide residues in soya-based nutraceutical products by GC/MS-MS[J]. Food Chemistry, 2015, 173:796-807. DOI:10.1016/j.foodchem.2014.10.100.

[23] MAESTRONI B, ABU ALNASER A, GHANEM I, et al. Validation of an analytical method for the determination of pesticide residues in vine leaves by GC-MS/MS[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2018, 66(25): 6421-6430. DOI:10.1021/acs.jafc.8b00453.

[24] ANASTASSIADES M, LEHOTAY S J, STAJNBAHER D, et al.Fast and easy multiresidue method employing acetonitrile extraction/partitioning and “dispersive solid-phase extraction” for the determination of pesticide residues in produce[J]. Journal of AOAC International, 2003, 86(2): 412-431.

[25] SCHENCK F J, HOBBS J E. Evaluation of the quick, easy, cheap,effective, rugged, and safe (QuEChERS) approach to pesticide residue analysis[J]. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology,2004, 73(1): 24-30. DOI:10.1007/s00128-004-0388-y.

[26] JIAO W T, XIAO Y, QIAN X S, et al. Optimized combination of dilution and refined QuEChERS to overcome matrix effects of six types of tea for determination eight neonicotinoid insecticides by ultra performance liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2016, 210: 26-34. DOI:10.1016/j.foodchem.2016.04.097.

[27] MACGADO I, GEREZ N, PISTON M, et al. Determination of pesticide residues in globe artichoke leaves and fruits by GC-MS and LC-MS/MS using the same QuEChERS procedure[J]. Food Chemistry,2017, 227: 227-236. DOI:10.1016/j.foodchem.2017.01.025.

[28] DA COSTA MORAIS E H, COLLINS C H, JARDIM I C S F.Pesticide determination in sweet peppers using QuEChERS and LC-MS/MS[J]. Food Chemistry, 2018, 249: 77-83. DOI:10.1016/j.foodchem.2017.12.092.

[29] NUENGCHAMNONG N, KRITTASILP K, INGKANINAN K.Rapid screening and Identification of antioxidants in aqueous extracts of Houttuynia cordata using LC-ESI-MS coupled with DPPH assay[J]. Food Chemistry, 2009, 117(4): 750-756. DOI:10.1016/j.foodchem.2009.04.071.

[30] 苟琰, 耿昭, 吴强, 等. 气相色谱-串联质谱法检测麦冬中农药残留[J].中国药学杂志, 2018, 53(7): 555-560.

[31] 国家卫生和计划生育委员会, 农业部, 国家食品药品监督管理总局.食品中农药最大残留限量: GB 2763—2016[S]. 北京: 中国标准出版社, 2016.

[32] 农业部. 农药每日允许摄入量: NY/T 2874—2015[S]. 北京: 中国标准出版社, 2015.

[33] European Commission. Guidance document on analytical quality control and method validation procedures for pesticide residues analysis in food and feed: SANTE/11813/2017[S/OL]. https://ec.europa.eu/food/plant/pesticides/eu-pesticides-database/public/?even t=homepage&language=EN.

Determination of 121 Pesticide Residues in Houttuynia cordata Thunb. by QuEChERS-Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

GOU Yan1,2, GAO Chi1, DENG Jingjing1, GENG Zhao2,*, YUAN Jun2, LI Min1,*, ZHOU Juan2, GUO Li1, BAO Xiaoming3
(1. College of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China;2. Key Laboratory of Quality Evaluation of Chinese Patent Medicines, Sichuan Institute for Food and Drug Control,National Medical Products Administration, Chengdu 611731, China; 3. Shimadzu (China) Co. Ltd., Chengdu 610023, China)

Abstract: A multi-residue analysis method was developed for the d etermination of 121 pesticides in Houttuynia cordata Thunb. by the QuEChERS extraction procedure (the abbreviation of quick, easy, cheap, effective, rugged and safe) coupled with gas chromatography-tandem mass spectrometry (QuEChERS-GC-MS/MS). This method was applied for screening of 68 sample batches. The pesticide residues from the samples were extracted with acetonitrile and puri fied by a modi fied QuEChERS method before being detected by GC-MS/MS in the multiple reaction monitoring mode. The results showed that all 121 pesticides exhibited good linearity in certain ranges with correlation coef ficients (r) higher than 0.997 3. The recoveries of more than 90.9% pesticides ranged from 60% to 140% at three spiked concentration levels, with relative standard deviations of less than 15% for 86.8% of the pesticides. The limits of detection (RSN = 3) of this method ranged from 0.000 1 to 0.1 mg/kg, below 0.01 mg/kg for most of the selected pesticides. A total of 27 pesticide residues were detected from the 68 sample batches. This simple, sensitive and accurate method proved to be suitable for the fast screening and detection of pesticide residues in H. cordata Thunb. in order to provide a basis for the cultivation and circulation supervision of H. cordata Thunb..

Keywords: Houttuynia cordata Thunb.; pesticide residues; gas chromatography-mass spectrometry; QuEChERS

收稿日期:2019-05-09

基金项目:国家中医药管理局中药标准化项目(ZYBZH-Y-SC-41)

第一作者简介:苟琰(1982—)(ORCID: 0000-0003-3954-9634),女,副主任中药师,硕士研究生,研究方向为中药品种、质量与资源开发。E-mail: gouyan0101@hotmail.com

*通信作者简介:

耿昭(1986—)(ORCID: 0000-0001-8087-8654),男,主管药师,博士,研究方向为中药化学成分与中药药效物质基础。E-mail: gengzhao713@hotmail.com

李敏(1962—)(ORCID: 0000-0001-8346-7324),女,教授,本科,研究方向为中药品种、质量及资源开发。E-mail: 028Limin@163.com

DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190509-081

中图分类号:S859.7

文献标志码:A

文章编号:1002-6630(2020)16-0292-08

引文格式:苟琰, 高驰, 邓晶晶, 等. QuEChERS-气相色谱-串联质谱法检测鱼腥草中121 种农药残留[J]. 食品科学, 2020, 41(16):292-299. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190509-081. http://www.spkx.net.cn

GOU Yan, GAO Chi, DENG Jingjing, et al. Determination of 121 pesticide residues in Houttuynia cordata Thunb. by QuEChERS-gas chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Food Science, 2020, 41(16): 292-299. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190509-081. http://www.spkx.net.cn