灵芝、金针菇混合发酵饮料的研制

苗敬芝,李振宇,董玉玮

(徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室,江苏 徐州 221111)

 

要:选择灵芝、金针菇优良菌株,混菌发酵培养,考察灵芝、金针菇混菌发酵工艺条件,将发酵液与菌丝体破碎,离心、过滤,取滤液与柠檬酸、蔗糖、蜂蜜等按一定比例调配,经均质、灌装、杀菌等制得饮料成品,优化饮料稳定剂配比和饮料调配条件,进行感官评定及成分分析。结果表明:灵芝、金针菇混合发酵最佳培养基为玉米粉添加量3%、花生粕添加量0.25%、蛋白胨添加量0.2%、葡萄糖添加量3%、酵母膏添加量0.1%、KH2PO4 添加量0.3%、MgSO47H2O添加量0.15%(m/m),pH6.5;混合发酵最佳条件为装液量100mL/250mL、培养温度24℃、摇床转速110r/min、培养时间8d;稳定剂最佳配比为CMC-Na添加量0.25%、黄原胶添加量0.04%、β-环状糊精添加量0.50%(m/m);饮料最佳配方为蜂蜜添加量1.5%、调配液添加量16%、柠檬酸添加量0.15%、蔗糖添加量6%(m/m)。研制出的灵芝、金针菇混合发酵饮料口感好,营养全面,符合国家卫生标准。

关键词:灵芝;金针菇;混菌发酵;饮料;质量检测

 

Development of a Blended Drink Based on Mixed Fermentation of Ganoderma lucidum and Flammulina velutipes

 

MIAO Jing-zhi,LI Zhen-yu,DONG Yu-wei

(Key Construction Laboratory of Food Resource Development, Quality and Safety of Jiangsu Province,
College of Food (Biology) Engineering, Xuzhou Institute of Technology, Xuzhou 221111, China)

 

Abstract:The mixed fermentation of Ganoderma lucidum and Flammulina velutipes was optimized for developing a blended drink in this study. After centrifugation and filtration of the fermented broth suspending disrupted mycelia, the filtrate was blended with citric acid, sucrose and honey, and the blend was then homogenized, filled and sterilized. An optimized blended stabilizer was developed and the proportion of ingredients in the blended drink was optimized. The sensory, physiochemical and microbial properties of this drink were investigated. The optimal medium composition for mixed fermentation of the two strains consisted of (m/m) 3% corn meal, 0.25% peanut meal, 0.2% peptone, 3% glucose, 0.1% yeast extract, 0.3% monopotassium phosphate and 0.15% mangnesinm sulfte at pH 6.5, and the optimal culture conditions were 100 mL of the medium in a 250-mL vessel, 24 ℃, 110 r/min, and 8 d. A stabilizer composed of 0.25% CMC-Na, 0.04% xanthan gum and 0.50% β-cyclodextrine was found to be optimal to stabilize the drink. The optimal formulation of this blended drink was composed of (m/m)1.5% honey, 16% the above filtrate, 0.15% citric acid and 6% saccharose. The drink developed in this study had a good taste and a full range of nutrients and met the national hygienic standards.

Key wordsGanoderma lucidumFlammulina velutipes;mixed fermentation;drink;quality examination

中图分类号:TS201.3 文献标志码:B 文章编号:1002-6630(2013)22-0346-07

doi:10.7506/spkx1002-6630-201322070

灵芝(Ganoderma lucidum)是一种珍贵的药用真菌,为担子菌纲,多孔菌科,灵芝属真菌[1]。灵芝的有效成分非常丰富,包括多糖、多肽、三萜类、核酸类、生物碱等[2-4],灵芝不同于一般药物对某种疾病起治疗作用,亦不同于一般营养保健食品只对某一方面营养素的不足进行补充和强化,而是在整体上双向调节人体机能平衡,抗氧化、防衰老、提高自身免疫能力和耐缺氧能力,促使全部的内脏器官机能正常化[5-7]。

金针菇(Flammulina velutipes)又名朴菇,隶属真菌门,担子菌亚门,层菌目,口蘑科,金钱菌属[8]。金针菇富含多糖和钙、磷、铁等多种矿物质,且锌含量很高,有促进儿童智力发育和健脑的作用[9-10];维生素含量丰富,尤其VC含量高于一般菇类,对脑神经调节、提高机体免疫能力有重要作用[11];蛋白质含量高且质量好,含有18种氨基酸,包括8种人体必需的氨基酸,尤其赖氨酸和精氨酸含量较高[12];赖氨酸能促进儿童生长发育,增强记忆,提高智力;精氨酸被称为“大脑食粮”,能促进智力提高,因此金针菇又被称为“增智菇”[13]。

混合发酵指采用两种或多种微生物的协同作用共同完成某发酵过程的一种新型发酵技术,是纯种发酵技术的新发展,也是一种不需要进行复杂的DNA体外重组却可取得类似效果的新型发酵技术,可提高发酵效率甚至可形成新产品[14-16]。利用灵芝、金针菇混合发酵的互利共栖协同作用,一方面可以提升灵芝、金针菇本身己有的药理价值和营养价值,另一方面可以发挥混合发酵技术的优势提高多糖、三萜类化合物等活性物质含量。

目前人们对灵芝、金针菇营养保健作用已经得到普遍认同,灵芝、金针菇分别进行发酵生产饮料在国内已有报道[17-18]。两种真菌菌丝体生长条件接近,最适生长温度范围均在22~26℃,都可利用玉米、淀粉等原料进行发酵,可用共同的培养基,相近的发酵条件进行培养。目前国内灵芝、金针菇混合发酵的技术研究较少,而采用该技术研制饮料在国内尚未见报道。本研究选用灵芝、金针菇优良菌株,探讨混合发酵条件,以发酵产生的发酵液和菌丝体为原料,经调配、均质等处理制成饮料,进行感官和成分分析,旨在为进一步研究药食真菌混菌发酵提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

信州灵芝(G. lucidum Xinzhi) 北京吉蕈园科技有限公司;金针菇(Flammulina velutipes) 徐州逸群食品有限公司。

硫酸、苯酚、香草醛、高氯酸、硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、可溶性淀粉、浓盐酸、氢氧化钠等均为分析纯。

1.2 仪器与设备

SWCJ2F超净工作台、TAS-990原子吸收分光光度计 北京普析通用仪器有限公司;GHP-9160恒温培养箱 广州德听科技有限公司;HZ150L恒温培养摇床 武汉瑞华仪器设备有限责任公司;TGL-16G高速台式离心机 上海安亭科学仪器厂;YXQ-SG46-028A手提式压力蒸汽灭菌锅 上海博讯实业有限公司医疗设备厂;W14546可见分光光度计 上海欣茂仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 灵芝、金针菇菌种的活化与培养

在超净操作台上,用剪刀剪取指甲大小灵芝菌种,用镊子送到PDA斜面培养基中,24℃培养,使菌种充分活化。金针菇菌种活化操作同灵芝。

将活化的灵芝、金针菇菌种分别接种在液体培养基中,24℃、110r/min恒温摇床上培养7d,测定胞外多糖含量。

1.3.2 混合发酵培养基选择

A培养基[19]:葡萄糖1%、蔗糖2%、蛋白胨1%、酵母膏0.05%、K2HPO4 0.1%、MgSO47H2O 0.05%;B培养基[20]:玉米粉2%、黄豆粉0.5%、葡萄糖1%、蔗糖3%、蛋白胨0.2%、酵母膏0.1%、KH2PO4 0.1%、MgSO47H2O 0.075%,pH6.5;C培养基[20]:豆饼粉1%、玉米粉1%、葡萄糖2%、酵母膏0.2%、KH2PO4 0.1%、MgSO47H2O 0.1%、VB1少量;D培养基[21]:玉米粉3%、花生粕0.25%、蛋白胨0.2%、葡萄糖3%、酵母膏0.1%、KH2PO4 0.3%、MgSO47H2O 0.15%,pH6.5;E培养基[22]:黄豆粉0.6%、玉米粉3%、酵母膏0.1%、KH2PO4 0.3%、蛋白胨0.2%、葡萄糖2%、MgSO47H2O 0.15%,pH6.5;F培养基[22]:可溶性淀粉3%、葡萄糖1.2%、酵母膏1%、K2HPO4 0.3%、MgSO47H2O 0.15%;G培养基[23]:黄豆粉2%、葡萄糖2%、可溶性淀粉1%、KH2PO4 0.25%、MgSO47H2O 0.12%、VB1少量;H培养基:可溶性淀粉3%、蔗糖1.2%、酵母膏1%、K2HPO4 0.3%、MgSO47H2O 0.15%;I培养基:玉米粉3%、黄豆粉0.25%、蛋白胨0.2%、葡萄糖3%、酵母膏0.1%、KH2PO4 0.3%、MgSO47H2O 0.15%,pH6.5。以上培养基中各物质添加量均以质量分数表示。

将混菌分别接入以上培养基中,在24℃、110r/min条件下培养7d,采用苯酚-硫酸法测定胞外多糖含量[23]。

1.3.3 混合发酵单因素试验

分别以培养时间、培养温度、摇床转速、装液量为影响因素,考察其对胞外多糖含量的影响。

1.3.4 饮料工艺流程[24]

灵芝、金针菇菌种活化→灵芝、金针菇分别培养→混合发酵培养→发酵液与菌丝体用组织捣碎机破碎→离心、过滤→滤液作为调配液,添加稳定剂、柠檬酸、蔗糖、蜂蜜等调配→均质→灌装→封口→灭菌→冷却→成品。

1.3.5 稳定剂添加量的确定

1.3.5.1 CMC-Na添加量

分别添加0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%和0.30% CMC-Na调配饮料后,将饮料装入塑料离心杯中,称质量,4000r/min条件下离心20min,弃去上清液,准确称取沉淀物质量,计算沉淀率,重复3次取平均值。

428433.jpg 

1.3.5.2 黄原胶添加量

分别添加0.04%、0.08%、0.12%、0.16%和0.20%黄原胶调配饮料后,计算沉淀率,重复3次取平均值。

1.3.5.3 β-环状糊精添加量

分别添加0.10%、0.20%、0.30%、0.40%、0.50%、0.60%和0.70% β-环状糊精调配饮料后,计算沉淀率,重复3次取平均值。

1.3.5.4 稳定剂添加量的正交试验

选择CMC-Na、黄原胶、β-环状糊精添加量3个因素进行正交试验。

1.3.6 饮料调配实验

将在最适培养条件下培养的发酵液连同菌丝体一起倒入组织捣碎机中,将其打碎成浆液,然后将浆液置于90℃水浴锅中浸提60min,离心并过滤,得到的发酵滤液作为调配液,分别选择调配液、蜂蜜、柠檬酸、蔗糖添加量进行单因素试验,再采用正交试验进行调配优化,根据感官评定得出最优调配结果。

1.3.7 饮料质量检测方法

1.3.7.1 感官检验

分别从色泽、风味和滋味、组织状态、口感来评定饮料的品质。

将蜂蜜、调配液、柠檬酸、蔗糖按一定比例调配,经均质、灌装、杀菌等制成饮料,由10位同学对其进行感官评分,评分前用温开水漱口,评分标准如表3所示。综合感官评价分值=20%色泽评分+30%风味和滋味评
分+20%组织状态评分+30%口感评分。

表 1 饮料感官评定标准

Table 1 Criteria for sensory evalution of drink

项目

标准

分值

色泽

呈淡黄色

20

风味和滋味

有灵芝、金针菇的香味和滋味,风格独特、纯正

30

组织状态

均匀一致,透明澄清,久置无沉淀

20

口感

甘苦适宜,有淡淡的蜂蜜味,口感较好,下咽时留有余香

30

综合评价

细腻,协调,口感丰满,风格独特,风味纯正

100

 

 

1.3.7.2 理化指标

多糖采用苯酚-硫酸法测定;三萜类化合物采用香草醛-高氯酸比色法测定[25];可溶性固形物采用折光法测定;铅采用GB/T 5009.12—2010《食品中铅的测定》中的石墨炉原子吸收光谱法测定;砷采用GB/T 5009.11—2003《食品中总砷及无机砷的测定》中的银盐法测定。

1.3.7.3 微生物指标

菌落总数采用GB/T 4789.2—2003《食品卫生微生物学检验:菌落总数测定》中的方法测定;大肠菌群采用GB/T 4789.3—2003《食品卫生微生物学检验:大肠菌群测定》中的方法检测。

2 结果与分析

2.1 混合发酵培养基的选择

将灵芝、金针菇混菌接种于培养基A、B、C、D、E、F、G、H、I,测定胞外多糖含量,结果见图1。

428452.jpg 

图 1 培养基种类对胞外多糖含量的影响

Fig.1 Effect of medium type on the yield of exopolysaccharides

由图1可知,D培养基胞外多糖含量最高,为26.48mg/mL,这是因为D培养基碳氮比适宜,菌种对培养基中营养物质利用率提高,故D培养基是最佳培养基。

2.2 混合发酵单因素条件选择

2.2.1 培养时间对胞外多糖含量的影响

428489.jpg 

图 2 培养时间对胞外多糖含量的影响

Fig.2 Effect of culture time on the yield of exopolysaccharides

由图2可知,培养8d时胞外多糖含量最高,为26.45mg/mL,当培养时间短于8d时,由于培养时间较短,对培养基中营养物质的利用率较低,其胞外多糖含量较低;当培养时间长于8d时,由于培养时间较长,培养基中营养物质减少,菌种生长可利用的营养物质减少,因此胞外多糖含量降低,因此选择最佳培养时间为8d。

2.2.2 培养温度对胞外多糖含量的影响

428503.jpg 

图 3 培养温度对胞外多糖含量的影响

Fig.3 Effect of culture temperature on the yield of exopolysaccharides

由图3可知,培养温度为24℃时,其胞外多糖含量最大,为27.06mg/mL,当温度高于或低于24℃时,温度会影响酶的活性,从而影响菌种对培养基中营养的吸收率,导致产胞外多糖的含量较低,因此选择最佳培养温度为24℃。

2.2.3 摇床转速对胞外多糖含量的影响

428538.jpg 

图 4 摇床转速对胞外多糖含量的影响

Fig.4 Effect of rotation speed on the yield of exopolysaccharides

由图4可知,摇床转速为110r/min时,胞外多糖含量达到最大,为25.29mg/mL,当摇床转速小于110r/min时,由于转速较低,菌种与培养基接触不充分,影响了菌种对营养成分的吸收,所以其胞外产多糖含量较低;而当摇床转速大于110r/min时,由于摇床转速较快,导致培养基中的成分较分散,影响了菌种对营养成分的吸收,所以其胞外多糖含量也会降低,因此选择最佳摇床转速为110r/min。

2.2.4 装液量对胞外多糖含量的影响

428553.jpg 

图 5 装液量对胞外多糖含量的影响

Fig.5 Effect of medium volume in a 250-mL vesse on the yield of exopolysaccharides

由图5可知,装液量为100mL/250mL时,胞外多糖含量达到最大值(26.51mg/mL),当装液量少于100mL/250mL时,由于液体量较少,导致菌体能利用到培养基中的营养物质也较少,因此其胞外多糖产量降低;而当装液量高于100mL/250mL时,由于用于发酵的锥形瓶体积一定,当所装液体体积较大时,菌体生长能利用到的液面上方的氧气也减少,从而降低了胞外多糖的产量,因此选择最佳装液量为100mL/250mL锥形瓶。

2.3 灵芝、金针菇混合培养最佳条件

将灵芝、金针菇混合接种在最佳培养基中,在装液量100mL/250mL锥形瓶、培养温度24℃、摇床转速110r/min、培养时间8d条件下测定胞外多糖含量,并与灵芝、金针菇单独培养进行比较,结果见图6。

428566.jpg 

图 6 灵芝、金针菇混合培养与单独培养胞外多糖含量比较

Fig.6 Comparison of exopolysaccharide yield from single and mixed strain fermentations with Ganoderma lucidum and Flammulina velutipes

由图6可知,在混合培养最佳条件下,其胞外多糖含量为27.51mg/mL,比灵芝单独培养多糖含量提高了34.3%,比金针菇单独培养多糖含量提高了66.4%。这是由于混合发酵时灵芝、金针菇共同发酵会产生协同作用,使菌种对培养基的营养成分利用率提高。

2.4 稳定剂添加量的单因素试验

2.4.1 CMC-Na添加量

428581.jpg 

图 7 CMC-Na添加量的单因素试验

Fig.7 Effect of single addition of CMC-Na on precipitation in the drink

从图7可以看出,CMC-Na添加量在0.10%~0.25%时,饮料沉淀率随添加量增加而明显降低;当CMC-Na添加量大于0.25%时,饮料沉淀率变化相对稳定,因此选择CMC-Na添加量0.15%、0.20%、0.25%作为正交试验的因素水平。

2.4.2 黄原胶添加量

428596.jpg 

图 8 黄原胶添加量的单因素试验

Fig.8 Effect of single addition of xanthan gum on precipitation in the drink

从图8可以看出,黄原胶添加量在0.04%~0.20%时,饮料沉淀率随黄原胶添加量增加而明显降低;当黄原胶添加量大于0.20%时,饮料沉淀率变化相对稳定,因此选择黄原胶添加量0.04%、0.08%、0.12%作为正交试验的因素水平。

2.4.3 β-环状糊精添加量

428609.jpg 

图 9 β-环状糊精添加量的单因素试验

Fig.9 Effect of single addition of β-cyclodextrine on precipitation in the drink

从图9可以看出,β-环状糊精添加量在0.3%~0.6%时,饮料沉淀率随β-环状糊精添加量增加而明显降低;当β-环状糊精添加量大于0.6%时,饮料沉淀率变化相对稳定,因此选择β-环状糊精添加量0.40%、0.50%、0.60%作为正交试验的因素水平。

2.4.4 稳定剂添加量的正交试验

选用CMC-Na、黄原胶、β-环状糊精添加量进行三因素三水平正交试验。因素水平表见表2,正交试验设计及结果见表3。

表 2 饮料稳定剂添加量正交试验因素水平表

Table 2 Factors and levels used in orthogonal array design for optimized stabilizer formulation

水平

因素

A CMC-Na添加量/%

B 黄原胶添加量/%

C β-环状糊精添加量/%

1

0.15

0.04

0.40

2

0.20

0.08

0.50

3

0.25

0.12

0.60

 

表 3 饮料稳定剂添加量正交试验设计及结果

Table 3 Orthogonal array design and result

试验号

A

B

C

沉淀率/%

1

1

1

1

1.06

2

1

2

2

2.72

3

1

3

3

2.66

4

2

2

3

2.75

5

2

3

1

2.58

6

2

1

2

2.05

7

3

3

2

0.80

8

3

1

3

1.88

9

3

2

1

2.84

k1

2.147

1.663

2.160

 

k2

2.460

2.770

1.857

 

k3

1.840

2.013

2.430

 

R

0.620

1.107

0.573

 

因素主次顺序

BAC

最优方案

A3B1C2

 

 

由表3可知,试验最优方案是A3B1C2,即CMC-Na添加量0.25%、黄原胶添加量0.04%、β-环状糊精添加量0.50%,根据极差分析,各因素对饮料沉淀率影响程度的主次顺序为BAC,即影响饮料沉淀率最大的因素是黄原胶添加量,其次是CMC-Na添加量,再次是β-环状糊精添加量。按最优方案重复实验3次,平均沉淀率为0.72%。

2.5 饮料调配试验

2.5.1 饮料调配的单因素试验

2.5.1.1 蜂蜜添加量

428624.jpg 

图 10 蜂蜜添加量对饮料感官评价的影响

Fig.10 Effect of honey concentration on sensory evaluation of the drink

从图10可以看出,当蜂蜜添加量为1.0%~2.0%时,饮料的感官评分值较高,因此选择蜂蜜添加量1.0%、1.5%、2.0%作为正交试验的因素水平。

2.5.1.2 调配液添加量

428637.jpg 

图 11 调配液添加量对饮料感官评价的影响

Fig.11 Effect of concentration of the mixed fermentation supernatants on sensory evaluation of the drink

从图11可以看出,当调配液添加量为16%~24%时,饮料的感官评分值较高,因此选择调配液添加量16%、20%、24%作为正交试验的因素水平。

2.5.1.3 柠檬酸添加量

428658.jpg 

图 12 柠檬酸添加量对饮料感官评价的影响

Fig.12 Effect of citric acid concentration on sensory evaluation of the drink

从图12可以看出,当柠檬酸添加量为0.1%~0.2%时,饮料的感官评分值较高,因此选择柠檬酸添加量0.1%、0.15%、0.2%作为正交试验的因素水平。

2.5.1.4 蔗糖添加量

428671.jpg 

图 13 蔗糖添加量对饮料感官评价的影响

Fig.13 Effect of sucrose concentration on sensory evaluation of the drink

从图13可以看出,当蔗糖添加量为6%~8%时,饮料的感官评分值较高,因此选择蔗糖添加量6%、7%、8%作为正交试验的因素水平。

2.5.2 饮料调配的正交试验

选用L9(34)进行正交试验,因素水平表见表4,正交试验设计及结果见表5。

表 4 饮料调配正交试验因素水平表

Table 4 Factors and levels used in orthogonal array design for optimizing the formula of the drink

水平

A蜂蜜添加量/%

B调配液添加量/%

C柠檬酸添加量/%

D蔗糖添加量/%

1

1.0

16

0.10

6

2

1.5

20

0.15

7

3

2.0

24

0.20

8

 

表 5 饮料调配正交试验设计及结果

Table 5 Orthogonal array design and results for optimized drink formulation

试验号

A

B

C

D

评分

1

1

1

1

1

85

2

1

2

2

2

87

3

1

3

3

3

70

4

2

1

2

3

80

5

2

2

3

2

86

6

2

3

1

1

95

7

3

1

3

2

90

8

3

2

1

3

75

9

3

3

2

1

88

k1

80.67

85.00

85.00

89.33

 

k2

87.00

82.67

87.00

87.67

 

k3

84.33

84.33

82.00

75.00

 

R

2.67

2.33

5.00

14.33

 

因素主次顺序

DCAB

最优方案

A2B1C2D1

 

 

由表5可知,最佳配方为蜂蜜添加量1.5%、调配液添加量16%、柠檬酸添加量0.15%、蔗糖添加量6%,按最佳配方调配的饮料,经25MPa的压力均质,灌装封口,95℃保温杀菌15min,常温冷却制成饮料成品。

2.6 饮料质量指标

2.6.1 感官指标

色泽:呈淡黄色;风味和滋味:有灵芝、金针菇的香味和滋味,风味纯正;组织状态:透明澄清,久置无沉淀;口感:甘苦适宜,口感较好,下咽时留有余香。

2.6.2 理化指标

经测定,饮料中多糖含量3.46mg/mL、三萜类化合物含量0.272mg/mL、可溶性固形物含量103.4mg/mL、铅含量0.297mg/L、砷含量0.160mg/L,铅和砷含量小于国家标准。

2.6.3 微生物指标

菌落总数为22000CFU/g(mL),未检出大肠杆菌,符合国家标准,卫生检验合格。

3 结 论

3.1 混合发酵最佳培养基为玉米粉添加量3%、花生粕添加量0.25%、蛋白胨添加量0.2%、葡萄糖添加量3%、酵母膏添加量0.1%、KH2PO4 添加量0.3%、MgSO47H2O添加量0.15%(m/m),pH6.5;混合发酵最佳条件为装液量100mL/250mL、培养温度24℃、摇床转速110r/min、培养时间8d,多糖含量为27.51mg/mL,比灵芝单独培养提高了34.3%,比金针菇单独培养提高了66.4%。说明混合发酵更完全,营养物质被充分利用,胞外多糖产量提高。

3.2 通过正交试验确定了饮料稳定剂配比,最佳稳定剂配比为CMC-Na 添加量0.25%、黄原胶添加量0.04%,
β-环状糊精添加量0.50%。

3.3 通过正交试验优化饮料调配条件,最佳配方为蜂蜜添加量1.5%、调配液添加量16%、柠檬酸添加量0.15%、蔗糖添加量6%,经均质、脱气、灌装、灭菌得到成品。产品透明澄清,呈淡黄色,具有灵芝、金针菇的香气和滋味,酸甜适宜,口感良好,营养全面,符合国家卫生标准,具有广阔的市场前景。

参考文献:

[1] 陈静, 夏永辉, 粱玲. 灵芝有效成分生物活性作用的研究进展[J]. 云南中医中药杂志, 2009, 30(1): 61-62.

[2] 牛君仿, 方正, 王红庚, 等. 灵芝有效化学成分研究进展[J]. 河北农业大学学报, 2002, 25(5): 51-54.

[3] 梁曾恩妮, 易有金, 郭雨桐, 等. 灵芝多糖联合5-FU对人结肠癌HCT-116细胞增殖及凋亡的影响[J]. 食品科学, 2012, 33(19): 310-314.

[4] 何慧, 石燕玲, 徐淑芬, 等. 灵芝肽对乙醇诱导肝损伤小鼠的保护作用[J]. 食品科学, 2010, 31(3): 213-216.

[5] JIANG J H, SLIVOVA V, HARVEY K et al. Ganoderma lucidum suppress growth of breast cancer cells through the inhibition of Akt/NF-kappa B signaling[J]. Nutrition and Cancer, 2004, 49(2): 209-216.

[6] ZHAO Hongbo, LIN Shuqian, LIU Jihong, et al. Polysaccharide extract iso-lated from Ganoderma lucidum protects rat cerebral cortical neurons from hypoxia/reoxygenation injury[J]. Journal of Pharmacological Sciences, 2004, 95: 294-298.

[7] TANG Wen, LIU Jiangwen, ZHAO Weiming, et al. Ganoderic acid T from Ganoderma lucidum mycelia induces mitochondria mediated apoptosisin lung cancer cells[J]. Life Sciences, 2006, 80(3): 205-211.

[8] 郑义, 李超, 王乃馨. 金针菇多糖的研究进展[J]. 食品科学, 2010, 31(17): 425-428.

[9] 杨俊红, 张安强, 孙培龙. 金针菇子实体多糖均一组分FVP60-C2制备及单糖组成分析[J]. 食品科学, 2013, 34(3): 86-89.

[10] 其宝庆, 马反搜. 金针菇锌强化食品补锌效果观察[J]. 预防医学情报杂志, 1994, 10(2): 97-98.

[11] WASSER S P. Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immunomodulating polysaccharides[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2002, 60: 258-274.

[12] 黄家莉, 李明元, 赵旭状. 金针菇的功能性成分研究及食品开发现状[J]. 食用菌, 2011(3): 1-3.

[13] 蔡和晖, 廖森泰, 叶运寿, 等. 金针菇的化学成分、生物活性及加工研究进展[J]. 食品研究与开发, 2008, 29(11): 171-175.

[14] 徐颖宣, 徐尔尼, 冯乃宪, 等. 微生物混菌发酵应用研究进展[J]. 中国酿造, 2008(9): 1-4.

[15] 李婷婷. 松茸、蛹虫草混菌共酵与多糖生物活性的研究[D]. 长春: 吉林大学, 2008: 65-75.

[16] 杨玉华, 李存民, 王子光. 混合菌种发酵提高酱油含量和质量的研究[J]. 食品与发酵工业, 2001(7): 80-82.

[17] 张艳, 刘安军. 新型灵芝保健饮料的生产工艺及其稳定性研究[J]. 食品研究与开发, 2009, 30(3): 99-101.

[18] 黄家莉, 李明元, 赵旭壮. 金针菇的功能性成分研究及食品开发现状[J]. 食用菌, 2011(3): 1-2.

[19] 董元荣. 灵芝菌种的分离鉴定以其几种活性产物的初步研究[J]. 南京师范大学学报, 2006, 26(5): 95-98.

[20] 周连玉. 灵芝深层发酵条件的优化与优良菌株的筛选[J]. 湖南农业大学学报, 2005, 17(2): 102-103.

[21] 韩向红, 王明城, 王海珠, 等. 几种栽培灵芝菌丝体生长营养条件之初探[J]. 海南师范学院学报, 2003, 16(2): 35-46.

[22] 周月琴. 二十六株灵芝菌丝体抑瘤三萜的研究[J]. 上海师范大学学报, 2005, 40(4): 347-350.

[23] 叶明, 陈九山, 杨柳, 等. 黑灵芝胞外多糖提取工艺条件优化及体外抗氧化活性研究[J]. 食品科学, 2009, 30(8): 47-50.

[24] 张艳, 刘安军. 新型灵芝保健饮料的生产工艺及其稳定性研究[J]. 食品研究与开发, 2009, 30(3): 99-101.

[25] 侯敏娜, 刘剑. 灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定[J]. 现代中药研究与实践, 2010, 24(5): 70-71.

 

收稿日期:2013-06-12

基金项目:徐州市科技计划项目(XF11C009);徐州工程学院校级科研项目(XKY2012215)

作者简介:苗敬芝(1964—),女,教授,本科,研究方向为食品生物技术。E-mail:miaojingzhi6466@163.com