金针菇、香菇和蛹虫草对小鼠体内
抗氧化酶活性的影响

陈慧婵1，裴 斐1，杨文建2，辛志宏1，赵立艳1，安辛欣1，杨方美1，胡秋辉1,*

（1.南京农业大学食品科技学院，江苏 南京 210095；2.南京财经大学食品科学与工程学院，江苏 南京 210046）

摘 要：为研究金针菇、香菇和蛹虫草3种常见食药用菌对小鼠体内抗氧化酶活性的影响，采用金针菇、香菇和蛹虫草低、中、高剂量（金针菇和香菇分别为0.8、1.6、2.5g/kg，蛹虫草分别为0.08、0.16、0.25g/kg）连续4周灌胃ICR清洁级小鼠，观察其对小鼠血清和肝脏总抗氧化能力（total anti-oxidant capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活力、全脑单胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）活力及心脏过氧化物酶（peroxidase，POD）活力的影响。结果表明：金针菇、香菇和蛹虫草均能不同程度地提高血清和肝脏中T-AOC、SOD活力和GSH-Px活力，降低血清和肝脏中MDA含量，降低全脑MAO活力和提高心脏POD的活力，说明金针菇、香菇和蛹虫草具有良好的体内抗氧化作用，且蛹虫草的体内抗氧化作用优于香菇和金针菇。其抗氧化机制可能与提高机体总抗氧化能力、提高抗氧化酶活力、清除自由基和减少过氧化脂质有关。

关键词：金针菇；香菇；蛹虫草；小鼠；抗氧化酶活性

Effects of Flammulina velutipes, Lentinula edodes and Cordyceps militaris on Antioxidative Enzyme Activities in Mice

CHEN Hui-chan1, PEI Fei1, YANG Wen-jian2, XIN Zhi-hong1, ZHAO Li-yan1, AN Xin-xin1, YANG Fang-mei1, HU Qiu-hui1,*

(1. College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China;

2. College of Food Science and Engineering, Nanjing University of Finance and Economics, Nanjing 210046, China)

Abstract: Experiments were made to investigate the effects of oral administration of three edible fungi, Flammulina velutipes, Lentinula edodes and Cordyceps militaris, on the activities of antioxidative enzymes in mice. ICR mice were administered by gavage with aqueous suspensions of powdered F. velutipes, L. edodes and C. militaris, respectively, at three doses, 0.8 g/kg for a low-dose group, 1.6 g/kg for a medium-dose group, and 2.5 g/kg for a high-dose group, via intragastric administration. After 4 weeks, the body weight, the total anti-oxidant capacity (T-AOC), the activities of superoxide dismutase (SOD) and glutathione-peroxidase (GSH-Px), and malondialdehyde (MDA) content in serum and liver, monoamine oxidase (MAO) activity in brain and peroxidase (POD) activity in heart were measured,. The results indicated that in comparison with those in thethe normal saline control mice, the T-AOC, the activities of SOD and GSH-Px in serum and liver and POD activity in heart were increased, while the MDA levels in serum and liver as well as MAO activity in brain were decreased to different extents in mice fedadministered with each of the edible fungi. All fungal the fungal species had good antioxidative effects in ICR mice with those of C. militaris being superior to those of L. edodes and F. velutipes. The antioxidative mechanism smay be related with improving the in vivo antioxidant capacity, enhancing the activities of antioxidative enzymes, removing free radicals and reducing lipid peroxidation.

Key words: Flammulina velutipes; Lentinula edodes; Cordyceps militaris; mice; antioxidative enzyme activities

中图分类号：TS255.1 文献标志码：A 文章编号：1002-6630(2014)01-0219-05

doi:10.7506/spkx1002-6630-201401043

生物体在生命过程中会不断地产生自由基，自由基对生物体具有双重作用：适量的自由基对维持生物体正常的生理代谢活动是必需的；但过量的自由基会导致细胞组织受到氧化胁迫，使脂质、蛋白质、DNA等生物大分子发生氧化损伤，导致细胞和机体组织的损伤，从而引发癌症、心血管疾病等多种疾病以及衰老问题[1-2]。近年来，随着生活水平的提高，抗氧化与抗衰老的问题越来越受到人们的关注，关于探究功能因子抗氧化的机制及如何将其应用在食品和药品中已经成为研究领域中的热点问题。

食药用菌是人类可食用或药用的大型真菌，它们不仅含有多糖、蛋白质、氨基酸、维生素和矿物质等丰富的营养成分，还含有腺嘌呤核苷、牛磺酸、甘露醇、内酯等丰富的保健功能因子[3-5]。已有许多研究结果表明，食药用菌多糖具有免疫调节[6-7]、降血糖、降血脂[8]、抗病毒、抗肿瘤[9-10]、抗疲劳、耐缺氧、抗氧化和美容益寿等多种功效[11-12]，且已被广泛用于自身免疫性疾病和肿瘤疾病等的临床辅助治疗中[13]。目前，大多学者主要集中于研究珍贵食药用菌的体内抗氧化作用，但对常见食药用菌的体内抗氧化研究尚不充足。如Chen Xiaoping等[14]研究了灵芝多糖对患宫颈癌大鼠的血清中抗氧化酶和免疫反应的影响。结果表明，灵芝多糖能有效清除自由基，发挥抗氧化作用。王宏雨等[15]通过研究竹荪提取物在衰老模型小鼠体内的抗氧化作用，发现竹荪提取物可以有效保护受损内脏，防止氧化损伤，说明竹荪提取物具有较强的体内抗氧化活性。程光宇等[16]研究发现鸡腿菇子实体多糖能有效提高酶和非酶体系抗氧化能力，并调节抗氧化酶同工酶基因的表达。

为了进一步全面地探讨常见食药用菌的体内抗氧化作用，本研究选取金针菇（Flammulina velutipes）、香菇（Lentinula edodes）和蛹虫草（Cordyceps militaris）3种常见的食药用菌为研究对象，通过对小鼠体内血清、肝脏、脑、心脏等组织的总抗氧化能力、多种抗氧化酶和代谢产物等生化指标的测定，探讨其抗氧化的效果及机制，以期为食药用菌抗氧化研究及开发提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料、动物、试剂与仪器

新鲜金针菇，购于南京市苏果超市，经清洗后晾晒至半干后，放于烘箱中60℃鼓风烘干，超微粉碎机粉碎，过300目筛，置于4℃备用。干香菇和蛹虫草，分别购于南京市苏果超市和南京芊奇佳菌业，放于烘箱中60℃鼓风烘干，超微粉碎机粉碎，过300目筛，置于4℃备用。

ICR清洁级小鼠100只，雌雄各半，体质量（20±2）g，由扬州大学比较医学动物中心提供。

蛋白定量、总抗氧化能力（total anti-oxidant capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione-peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、单胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）和过氧化物酶（peroxidase，POD）测定试剂盒 南京建成生物工程研究所；其余试剂均为分析纯。

DHG-9030A电热恒温鼓风干燥箱 上海一恒科技有限公司；Allegra 64R冷冻离心机 美国Beckman公司；组织匀浆机 上海康仪仪器有限公司；HH-6数显恒温水浴锅 国华电器有限公司；JH-722s可见分光光度计 上海精密科学仪器有限公司；ELX800酶标仪 美国Bio-Tek公司。

1.2 方法

1.2.1 动物分组及剂量设计

将100只ICR清洁级小鼠随机分为10组，分别为空白（生理盐水）对照组、金针菇（低、中、高）剂量组、香菇（低、中、高）剂量组和蛹虫草（低、中、高）剂量组，每组10只。空白对照组小鼠每日灌胃生理盐水，金针菇和香菇相应的低、中、高组的灌胃剂量分别按照人体每日推荐摄入量的10倍进行设计，即小鼠的每日灌胃剂量分别为0.8、1.6、2.5g/kg，蛹虫草低、中、高组的灌胃剂量分别为其他两个实验组的1/10[17]。所有小鼠自由摄食饮水，连续灌胃4周。

1.2.2 体内生化指标测定

末次灌胃1h后，对各组小鼠进行眼眶采血并分离血清待用，并解剖取脑、心脏和肝脏，计算各脏器指数（%），表示为器官质量/小鼠体质量。然后用冰冷生理盐水将解剖得到的脏器组织分别制成10%肝脏匀浆、10%脑匀浆和10%心脏匀浆，保存于－20℃待用。血清及肝脏中T-AOC、SOD活力、MDA含量和GSH-Px活力，全脑MAO活力和心脏POD活力的测定均按照测定试剂盒说明书操作。

1.3 数据处理

所有实验数据均采用PASW statistics18软件进行统计分析，以

±s表示；显著性分析为单向方差分析，多重比较采用LSD检验；P＜0.05表示有显著性差异，P＜0.01表示有极显著性差异。

2 结果与分析

2.1 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠体质量的影响

体质量指标可以在一定程度上反映小鼠的生长发育情况。由表1可见，随着饲养天数的增加，各组小鼠体质量都有所增加。且灌胃3种不同食药用菌各剂量组第1天、第14天和第28天的小鼠体质量及实验期间小鼠的体质量增加与空白对照组相比，均无显著差异（P＞0.05），说明灌胃食药用菌并未对小鼠的体质量、生长发育造成不良影响。在整个饲养过程中，各组小鼠均活泼好动，食欲良好，皮毛顺滑有光泽，无明显脱毛现象。

表 1 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠体质量的影响

Table 1 Effects of different doses of three edible fungi on body weight in mice

2.2 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠肝脏、脑、心脏指数的影响

表 2 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠肝脏、脑、心脏指数的影响

Table 2 Effects of different doses of three edible fungi on liver, brain and hear indexes in mice

脏器指数可以在一定程度上反映灌胃食药用菌对小鼠器官的影响情况，从而对食药用菌的毒副安全性进行初步分析。由表2可见，与空白对照组相比，小鼠经连续灌胃3种不同剂量的食药用菌4周后，其对小鼠肝脏指数、脑指数和心脏指数均没有显著差异（P＞0.05），说明灌胃食药用菌并未对小鼠的肝脏、脑和心脏造成影响。

2.3 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠血清T-AOC、SOD、MDA、GSH-Px的影响

T-AOC可以全面地反映机体的非酶促与酶促整个防御体系的抗氧化能力[18]。SOD是体内主要的抗氧化酶之一，其活性的高低反应了机体清除氧自由基的能力[19-20]。MDA是氧自由基攻击生物膜中的不饱和脂肪酸而形成的脂质过氧化物，它的高低间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度，所以常常与SOD相互配合测定[21-22]。GSH-Px也是体内一种重要的抗氧化酶，它能阻断由过氧化物引发的自由基对机体的伤害，从而保护细胞膜免受过氧化的损伤[23-24]。

表 3 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠血清T-AOC、SOD、
MDA、GSH-Px的影响

Table 3 Effects of different doses of three edible fungi on T-AOC, SOD, MDA and GSH-Px in serum of mice

注：*.与空白对照组比较，有显著性差异（P＜0.05）；**.与空白对照组比较，有极显著性差异（P＜0.01）。下同。

由表3可见，与生理盐水对照组相比，3种食药用菌的各剂量组均有提高血清中T-AOC、SOD活力和GSH-Px活力以及降低MDA含量的作用。各组小鼠经连续灌胃不同剂量食药用菌4周后，除了金针菇低剂量组没有显著提高血清T-AOC和降低MDA含量外，金针菇中、高剂量组，香菇和蛹虫草的低、中、高剂量组均能显著提高血清中T-AOC、SOD活力和GSH-Px活力，同时显著降低MDA含量（P＜0.05，P＜0.01），并且呈现剂量效应关系。表明金针菇、香菇和蛹虫草具有很强的提高血清总抗氧化能力，提高血清中抗氧化酶活力和清除血清中O2—•和脂质过氧化物的能力，具有抗氧化的效果。

3种食药用菌之间，蛹虫草各剂量组对小鼠血清各指标的改善效果最佳，其次为香菇各剂量组，最后为金针菇各剂量组。其中，蛹虫草高剂量组效果最好，能使小鼠血清T-AOC增加65%，血清SOD活力增加39%，血清GSH-Px活力增加29%，同时血清MDA含量降低46%。

2.4 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠肝脏T-AOC、SOD、GSH-Px活力及MDA含量的影响

表 4 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠肝脏T-AOC、SOD、
GSH-Px活力及MDA含量的影响

Table 4 Effects of different doses of three edible fungi on T-AOC, SOD, MDA and GSH-Px in liver of mice

由表4可见，与生理盐水对照组相比，3种食药用菌的各剂量组均有提高肝脏中T-AOC、SOD活力和GSH-Px活力以及降低MDA含量的作用。与空白对照组相比，金针菇和香菇的低、中、高剂量组均能极显著提高肝脏T-AOC（P＜0.01），并且呈现剂量效应关系；蛹虫草中、高剂量组能显著地提高肝脏T-AOC（P＜0.05，P＜0.01），但其低剂量组没有显著差异。金针菇高剂量组，香菇和蛹虫草的中、高剂量组中肝脏SOD活力明显高于空白对照组（P＜0.05，P＜0.01）。金针菇和香菇的中、高剂量组，以及蛹虫草的低、中、高剂量组均能极显著降低肝脏MDA含量（P＜0.01）。金针菇和香菇高剂量组，以及蛹虫草低、中、高剂量组均能显著提高肝脏GSH-Px活力（P＜0.05，
P＜0.01）。表明金针菇、香菇和蛹虫草具有很强的提高肝脏总抗氧化能力，提高肝脏中抗氧化酶活力和清除肝脏中超氧阴离子自由基和脂质过氧化物的能力，具有抗氧化的效果。

3种食药用菌之间，蛹虫草各剂量组对小鼠肝脏各指标的综合改善效果最佳，其次为香菇各剂量组，最后为金针菇各剂量组。其中，蛹虫草高剂量组综合效果最好，能使小鼠肝脏SOD活力增加54%，肝脏GSH-Px活力增加56%，同时肝脏MDA含量降低60%。

2.5 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠全脑MAO、心脏POD的影响

表 5 灌胃不同剂量食药用菌对小鼠全脑MAO、心脏POD的影响

Table 5 Effects of different doses of three edible fungi on MAO in brain and POD in heart of mice

MAO在机体的脑、肝脏、肾等组织中含量较多，研究发现MAO活性会随着年龄增长而急剧上升，与衰老密切相关[25]。POD可以将H2O2转变成无害的水和氧，从而消除H2O2对机体的伤害[25-26]。由表5可见，与空白对照组相比，各组小鼠经灌胃不同剂量食用菌4周后，金针菇、香菇和蛹虫草的中、高剂量组均可以显著降低全脑的MAO活力（P＜0.05，P＜0.01），蛹虫草高剂量组最高可以降低67%。表明灌胃中、高剂量的金针菇、香菇和蛹虫草可以在一定程度上抑制正常脑衰老过程中产生的过高的MAO活力。

与空白对照组相比，金针菇高剂量组，香菇和蛹虫草的中、高剂量组可以显著增加小鼠心脏的POD活力，但它们的低剂量组则没有差异。表明金针菇、香菇和蛹虫草均可以催化有害物质H2O2的分解，从而减少自由基和过氧化脂质的形成，具有减轻心脏被氧化的效果。

3 结 论

本研究结果显示，金针菇、香菇和蛹虫草3种食药用菌均能不同程度地提高血清和肝脏中T-AOC，SOD活力和GSH-Px活力，降低血清和肝脏中MDA含量，降低全脑MAO活力和提高心脏POD活力，说明这3种食药用菌可能是通过提高机体总抗氧化能力，提高机体多种抗氧化酶活力，清除机体产生的过多自由基，同时催化对机体有害物质的分解，有效地防止或减轻机体自由基所导致的氧化损伤，从而起到抗氧化的作用。因此，金针菇、香菇和蛹虫草具有良好的体内抗氧化作用，且蛹虫草的抗氧化作用优于香菇优于金针菇。这一结果可以为开发新的保健食品提供科学依据。

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