八角茴香提取物对风干鲈鱼加工贮藏过程中生物胺及微生物的抑制效应

杨蓉蓉,王永丽,章建浩 *

(南京农业大学食品科技学院,国家肉品质量与安全控制工程技术研究中心,江苏 南京 210095)

摘 要:以鲈鱼为原料,加入不同添加量(0、100、300、500 mg/ kg)的 八角茴香提取物进行腌制,通过测定原料、腌制结束、风干结束、贮藏1~3 周样品中生物胺及微生物的含量变化,研究八角茴香提取物对风干鲈鱼加工及贮藏过程中生 物胺及微生物的抑制效应。结果表明:八角茴香提取物能够显著减少菌落总数、肠杆菌数和金黄色葡萄球菌数(P<0.05), 但对乳酸菌的抑制作用不显著(P>0.05)。在风干鲈鱼加工贮藏过程中共检测出5 种生物胺,分别为腐胺、尸胺、组胺、酪胺和苯乙胺,八角茴香 提取物对于上述5 种生物胺均具有明 显的抑制作用。总生物胺含量呈先增加后减少的趋势,贮藏2 周时达到最大值,此时300 mg/kg处理组总生物胺含量最低,为283.97 mg/kg,相对于对照组下降了29.01%。

关键词:风干鲈鱼;八角茴香提取物;生物胺;微生物

腌制风干技术是我国水产品加工常用技术,风干鲈鱼因其独特的腌腊风味深受消费者喜爱。但是由于水产品中蛋白质含量丰富,为微生物的繁殖提供了有利的生长环境,并且蛋白质水解产生的氨基酸为水产品中生物胺的形成提供了一定的前体物质 [1],导致传统的风鱼制品出现微生物数量超标、胺类物质含量较高等食用安全质量问题 [2]。八角茴香为木兰科八角属植物,是一种兼备抑菌作用和抗氧化能力的香辛料 [3-4]。研究显示,八角茴香的水溶性挥发成分可以通过损害微生物的细胞膜而具有广谱的抗菌性 [5],同时还具有1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力以及抗油脂氧化能力 [6-7],另外八角茴香提取物还具有一定的生理药理作用 [8],如抗炎、镇痛、健胃止咳、温阳散寒等功效。然而,目前关于八角茴香提取物应用在水产品的研究报道却很少,主要是对它的组成成分和生理药理作用的探讨。

本实验以鲈鱼为原料,探讨不同添加量的八角茴香提取物对风干鲈鱼加工贮藏过程中生物胺及微生物的抑制效应,从而为提高风干鲈鱼的食用安全品质提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

新鲜鲈鱼 苏果超市;八角茴香提取物(莽草酸含量≥98%) 南京泽朗生物科技有限公司;平板计数琼脂、结晶紫中性红葡萄糖琼脂、MRS琼脂培养基、甘露醇高盐琼脂培养基 上海盛思生化科技有限公司;生物胺标准品(色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺和丹磺酰氯) 美国Sigma公司;氨水、高氯酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、氯化镁等(均为分析纯) 上海试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

Waters Alliance 2695液相色谱系统 美国Waters公司;Zorbax Eclipse XDB-C 18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm) 美国Agilent公司;SPX-250型恒温恒湿箱上海博讯实业有限公司医疗设备厂;立式压力蒸汽灭菌锅 上海申安医疗机械厂;生化培养箱 昆山禾创超声仪器有限公司;Allegra 64R型高速冷冻离心机美国Beckman公司;T18basic型高速分散机 德国IKA公司;SW-CJ-IFD型单人单面净化工作台 苏州净化设备有限公司。

1.3 方法

1.3.1 风干鲈鱼制作工艺

从超市购买体质量0.5 kg左右的新鲜鲈鱼,宰杀后去鳃、去鳞、去内脏,用清水洗净残留在体内的残血及表面血污,室温沥干后进行腌制。随机抽取12 条鲈鱼作为原料对照组进行分析检测,剩余鲈鱼平均分成4 组,按照质量分数3%的食盐添加量在鲈鱼表面及体内均匀擦涂,4组鲈鱼分别相应添加0、100、300、500 mg/kg的八角茴香提取物进行腌制,4 ℃、相对湿度85%~90%条件下腌制2 d。腌制结束,将样品转移到恒温恒湿箱中进行风干成熟,风干工艺参数参考刘昌华等 [9]方法,得风干鲈鱼成品,用不透光真空袋真空包装后于4 ℃条件下冷藏备用。分别于原料鱼、腌制结束、风干结束、贮藏1 周、贮藏2 周、贮藏3 周后随机抽取3条鲈鱼样品,取其背部肌肉进行分析测定。

1.3.2 理化指标的测定

水分含量测定:按ISO1442:1997 [10]方法。

pH值测定:精确称取5.0 g鲈鱼肉样于80 mL离心管中,然后加50 mL蒸馏水用高速分散机匀浆1 min,匀浆结束后立即用pH计测定匀浆物的pH值,重复测定3 次。

1.3.3 微生物数量的测定 [11]

无菌条件下称取鲈鱼背部肌肉20 g,无菌剪刀剪碎,置于180 mL无菌生理盐水的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1~2 min,即为10 -1稀释液。用移液枪准确吸取10 -1稀释液1 mL于盛有9 mL无菌生理盐水的无菌试管中,高速振荡,即为10 -2稀释液,按照上述操作制取10 倍系列递增稀释液。选择3 个合适的稀释度,用移液枪准确吸取0.l mL稀释液于无菌培养皿中,每个稀释度平行做2 个培养皿,然后将凉至50 ℃左右的不同培养基注入无菌培养皿中,适当摇匀,待凝固后,于适当的条件下倒置培养1~2 d。同一稀释度的2 个培养皿的菌落数平均数乘以稀释倍数,即为每克样品中所含微生物的数目。具体的培养条件见表1。

表1 培养条件
Table 1 Culture conditions

微生物种类 培养基 温度/℃时间/h总菌落营养琼脂培养基3048肠杆菌科结晶紫中性红胆盐琼脂培养基3724乳酸菌MRS琼脂培养基3048金黄色葡萄球菌甘露醇高盐琼脂培养基3048

1.3.4 生物胺含量的测定

1.3.4.1 标准溶液配制与柱前衍生

参照卢士玲 [12]方法并稍作修改。配制终质量浓度分别为0.5、1.0、2.5、5.0、10、20 μg/mL的混合标准溶液。取1 mL的标准品混合溶液,加入200 μL 2 mol/L NaOH溶液使之呈碱性,再加入300 μL饱和NaHCO 3溶液进行缓冲,然后再加入2 mL的丹磺酰氯溶液(10 mg/mL溶于丙酮),在40 ℃条件下黑暗中反应45 min,然后加入100 μL的25%的氨水以中止反应,静置30 min后用乙腈定容至5 mL,然后用0.22 μm的滤膜过滤,用于分析检测。

1.3.4.2 样品处理

取5 g绞碎后的鱼肉加入20 mL 0.4 mol/L的高氯酸(HClO 4),匀浆机上彻底匀浆,然后于超声波提取仪中超声提取30 min,冷冻离心机(4 ℃,3 000 r/min)离心10 min,沉淀部分如前述的方法再提取一遍。取两次的上清液用0.4 mol/L的高氯酸(HClO 4)定容至50 mL。取1 mL的样液如标准溶液方法进行柱前衍生。

1.3.4.3 色谱条件

色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C 18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流速为1 mL/min,紫外检测波长为254 nm,进样量20 μL,柱温35 ℃,流动相A为水,B为乙腈,采用梯度洗脱,洗脱程序见表2。

表2 梯度洗脱程序
Table 2 Gradient elution program

洗脱时间/min体积分数/%流动相A流动相B 0 3565 5 3070 200100 240100 253565 303565

1.4 数据统计分析

利用Origin 8.0作图,SAS 8.2统计软件进行方差分析,不同平均值之间利用最小显著差异法进行差异显著性检验。

2 结果与分析

2.1 八角茴香提取物添加量对风干 鲈鱼加工及贮藏过程中理化指标的影响

图1 八角茴香提取物添加量对风干鲈鱼加工及贮藏过程中水分含量(a)和pH值(b)指标的影响
Fig.1 Changes in physicochemical indices during dr y-cured processing and storage of perch affected by addition of star anise extract at different concentrations

由图1a可知,风干鲈鱼加工贮藏过程中水分含量呈下降趋势。鲈鱼肉样中的水分在腌制过程中由于受到食盐的渗透作用而析出,导致水分含量下降但变化不显著(P>0.05),在风干成熟过程中由于较高的干燥温度及较低的相对湿度的影响使得水分含量下降显著(P<0.05),到风干成熟结束时对照组样品中水分含量为53.6%,相比原料(77.5%)下降了30.84%。不同添加量的八角茴香提取物处理组与对照组相比水分含量变化的差异不显著(P>0.05),说明八角茴香对风干鲈鱼的品质无影响。

由图1b可知,风干鲈鱼加工过程中pH值呈下降趋势,而在贮藏过程中pH值呈上升趋势。加工过程中由于碳水化合物水解作用产生的乳酸、磷酸等酸性物质的积累,酶促水解作用产生的游离氨基酸和游离脂肪酸的累积 [13-14],使pH值在腌制及风干成熟阶段显著下降(P<0.05)。这与Nakagawa等 [15]研究鲭鱼片在干燥过程中pH值的实验结果一致。贮藏过程中由于腐败微生物的生长代谢产生大量的挥发性含氮化合物等碱性物质,另外,蛋白质分解及蛋白质代谢产物的释放,导致pH值随着贮藏时间的延长而逐渐升高。风干结束时,300 mg/kg处理组的pH值最低,不同八角茴香提取物添加量条件下风干鲈鱼加工及贮藏过程中的pH值变化无显著差异(P>0.05)。

2.2 八角茴香提取物添加量对风干鲈鱼加工及贮藏过程中微生物数量的影响

表3 八角茴香提取物添加量对风干鲈鱼加工及贮藏过程中微生物数量的影响
Table 3 Changes in microorganisms during dry-cured processing andstorage of perch affected by addition of star anise extract atdifferent concentrations

注:同行小写字母不同表示差异显著(P<0.05);同列大写字母不同表示差异显著(P<0.05)。

微生物种类八角茴香提取物添加量/(m g / k g)微生物数量(l g(C F U / g))原料腌制结束风干结束贮藏1 周贮藏2 周贮藏3 周菌落总数0 4 . 5 2 ± 0 . 0 6 e4 . 9 8 ± 0 . 0 8 Ae5 . 9 6 ± 0 . 0 6 Ad6 . 8 3 ± 0 . 1 2 Ac7 . 4 8 ± 0 . 1 3 Ab7 . 8 2 ± 0 . 0 9 Aa1 0 0 4 . 5 2 ± 0 . 0 6 d4 . 6 9 ± 0 . 0 8 Bd5 . 7 6 ± 0 . 0 6 Bc6 . 1 7 ± 0 . 1 0 Bb6 . 3 8 ± 0 . 3 7 Bab6 . 6 2 ± 0 . 0 7 Ba3 0 0 4 . 5 2 ± 0 . 0 6 d4 . 4 5 ± 0 . 0 9 Cd5 . 5 2 ± 0 . 1 1 Cc5 . 8 2 ± 0 . 0 7 Cb5 . 9 4 ± 0 . 0 5 Cb6 . 3 1 ± 0 . 0 6 Ca5 0 0 4 . 5 2 ± 0 . 0 6 e4 . 3 3 ± 0 . 0 7 Ce5 . 3 2 ± 0 . 0 9 Dd5 . 5 4 ± 0 . 0 9 Dc5 . 7 5 ± 0 . 0 9 Cb6 . 1 9 ± 0 . 0 2 Ca乳酸菌0 3 . 3 5 ± 0 . 0 7 f3 . 9 5 ± 0 . 1 0 Ae4 . 9 4 ± 0 . 0 8 Ac5 . 3 4 ± 0 . 0 8 Ab5 . 5 2 ± 0 . 0 9 Aa4 . 5 6 ± 0 . 1 0 Ad1 0 0 3 . 3 5 ± 0 . 0 7 e3 . 8 2 ± 0 . 0 7 ABd4 . 7 8 ± 0 . 1 7 ABb5 . 2 4 ± 0 . 0 8 ABa5 . 3 3 ± 0 . 1 1 Ba4 . 4 7 ± 0 . 0 6 ABc3 0 0 3 . 3 5 ± 0 . 0 7 e3 . 7 7 ± 0 . 0 7 Bd4 . 6 8 ± 0 . 0 7 Bb5 . 0 6 ± 0 . 0 7 Ca5 . 1 5 ± 0 . 1 1 Ca4 . 4 2 ± 0 . 0 8 ABc5 0 0 3 . 3 5 ± 0 . 0 7 e3 . 6 9 ± 0 . 0 7 Bd4 . 6 0 ± 0 . 0 7 Bb5 . 1 5 ± 0 . 0 9 BCa5 . 0 8 ± 0 . 0 7 Ca4 . 3 8 ± 0 . 0 4 Bc金黄色葡萄球菌0 2 . 9 7 ± 0 . 0 5 f3 . 6 8 ± 0 . 0 8 Ae5 . 8 5 ± 0 . 1 1 Ad6 . 1 2 ± 0 . 0 9 Ac6 . 5 6 ± 0 . 1 2 Ab7 . 6 5 ± 0 . 0 8 Aa1 0 0 2 . 9 7 ± 0 . 0 5 f3 . 4 4 ± 0 . 0 8 Be5 . 2 2 ± 0 . 0 6 Bd5 . 5 1 ± 0 . 0 6 Bc6 . 0 1 ± 0 . 3 4 Bb7 . 0 3 ± 0 . 0 7 Ba3 0 0 2 . 9 7 ± 0 . 0 5 f3 . 1 9 ± 0 . 0 6 Ce4 . 8 7 ± 0 . 0 8 Cd5 . 3 4 ± 0 . 0 8 Cc5 . 5 8 ± 0 . 0 7 Cb6 . 7 7 ± 0 . 1 0 Ca5 0 0 2 . 9 7 ± 0 . 0 5 e2 . 8 6 ± 0 . 1 0 De4 . 5 6 ± 0 . 1 1 Dd5 . 1 2 ± 0 . 0 6 Dc5 . 4 4 ± 0 . 0 8 Cb6 . 6 9 ± 0 . 0 9 Ca肠杆菌0 3 . 0 4 ± 0 . 0 4 f3 . 7 6 ± 0 . 0 7 Ae5 . 1 9 ± 0 . 1 4 Ad6 . 6 2 ± 0 . 1 1 Aa6 . 1 4 ± 0 . 1 0 Ab5 . 8 8 ± 0 . 1 2 Ac1 0 0 3 . 0 4 ± 0 . 0 4 f3 . 5 2 ± 0 . 0 7 Be4 . 8 7 ± 0 . 0 8 Bd6 . 2 7 ± 0 . 1 1 Ba5 . 6 8 ± 0 . 1 0 Bb5 . 3 2 ± 0 . 0 3 Bc3 0 0 3 . 0 4 ± 0 . 0 4 f3 . 3 1 ± 0 . 0 5 Ce4 . 6 5 ± 0 . 0 6 Cd5 . 7 2 ± 0 . 0 9 Ca5 . 3 6 ± 0 . 0 3 Cb5 . 1 0 ± 0 . 0 7 Cc5 0 0 3 . 0 4 ± 0 . 0 4 e3 . 1 3 ± 0 . 0 7 De4 . 5 6 ± 0 . 0 6 Cd5 . 3 4 ± 0 . 0 8 Da5 . 1 9 ± 0 . 1 0 Cb5 . 0 0 ± 0 . 0 7 Cc

由表3可知,风干鲈鱼加工及贮藏过程中菌落总数和金黄色葡萄球菌数呈增加趋势,乳酸菌和肠杆菌呈先增加后减少趋势,分别在贮藏2 周和贮藏1 周时达到最大值,可能与贮藏后期较高的pH值及较低的水分活度等原因有关。曾令彬等 [16]以白鲢为原料,按5%用盐量,于10 ℃腌制4 d,10~15 ℃自然条件下干燥17 d,研究了腊鱼加工过程中主要微生物菌群的变化,结果显示,乳酸菌、微球菌、葡萄球菌和酵母菌数量在加工过程中均呈增加趋势,且数量级与菌落总数一致,得到的腊鱼成品中菌落总数值接近8(lg(CFU/g)),乳酸菌数接近7(lg(CFU/g)),微球菌数和金黄色葡萄球菌数接近7(lg(CFU/g))。

由表3可知,风干鲈鱼加工过程中菌落总数、乳酸菌数、金黄色葡萄球菌数也均呈增加趋势,与上述实验结果一致,风干结束后,500 mg/kg八角茴香提取物鲈鱼成品中菌落总数、乳酸菌数和金黄色葡萄球菌数分别为5.32、4.60、4.56(lg(CFU/g)),明显低于曾令彬等 [16]实验中腊鱼成品中的微生物数量,可能与原料鱼的品种、腌制工艺参数不同有关。王慧敏等 [17]通过分析冷藏温度对鲜活鲈鱼的品质影响,结果显示,随着贮藏时间的延长,细菌总数迅速增加,15 d时超过7(lg(CFU/g)),同时,产H 2S菌、假单胞菌、肠杆菌和乳酸菌数量的增长趋势与细菌总数的变化具有相似的增长趋势,在4 ℃条件冷藏15 d时,H 2S菌、假单胞菌、肠杆菌、乳酸菌数量分别为7.59、6.05、5.78、5.90(lg(CFU/g))。

由表3可知,风干鲈鱼在4 ℃冷藏2 周时,对照组和500 mg/kg八角茴香提取物处理组中菌落总数分别为7.48、5.75(lg(CFU/g)),添加八角茴香提取物腌制的风干鲈鱼中菌落总数值要略低于鲜活鲈鱼。魏延玲等 [18]研究发现阿魏酸能显著抑制风干鲈鱼加工及贮藏过程中微生物的生长,4 ℃条件贮藏3 周时,对照组、200 mg/kg阿魏酸处理组中菌落总数分别为7.67、5.54(lg(CFU/g)),相应地在贮藏3 周时,风干鲈鱼对照组和500 mg/kg八角茴香提取物处理组中菌落总数分别为7.82、6.19(lg(CFU/g)),相对于阿魏酸,八角茴香提取物的抑菌作用要稍弱。

八角茴香提取物能够显著(P<0.05)减少菌落总数、金黄色葡萄球菌数和肠杆菌数,但对乳酸菌的抑制作用不显著(P>0.05)。殷燕等 [19]关于八角茴香提取物在4 ℃冷藏过程中对调理猪肉饼抑菌效果的研究显示,在冷藏10 d时,对照组、0.03%、0.06%、0.09%八角茴香处理组样品中菌落总数分别为6.07、5.90、5.72、5.64(lg(CFU/g))。目前,大部分的研究报道认为八角茴香提取物对大肠杆菌、沙门氏菌、绿脓假单胞菌等革兰氏阴性菌及金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌都具有抑制作用。Benmalek等 [20]研究发现八角茴香中的黄酮醇、花青素等活性物质可以通过抑制某些位于细胞外及细胞内相关酶类如脱氢酶的活性,从而抑制细菌新陈代谢,阻碍其生长所必需化合物的合成,另外,还可以通过螯合某些与酶促反应相关的重金属,最终抑制细菌的生长繁殖。Qiu Jiazhang等 [21]通过微量液基稀释法,结果显示茴香精油对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌作用,同时它还可以降低α-毒素、葡萄球菌肠毒素等金黄色葡萄球菌外毒素的表达。Liu Yunning等 [22]研究认为八角茴香对大肠杆菌具有抑制效应。八角茴香提取物的抑菌作用和它含有的挥发性活性成分有关,其中茴香脑是抑菌的主要活性物质 [23]。茴香脑可能是通过蛋白质变性破坏肠杆菌的细胞膜,抑制肠杆菌的氨基酸脱羧酶活性,从而达到抑制生物胺形成的目的。但是Benmalek等 [20]却认为八角茴香对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌具有抑制作用但对大肠杆菌等革兰氏阴性菌却不具有抑制效应,这主要与细菌细胞壁的组织结构有关,革兰氏阴性菌细胞壁中富含的脂多糖形成了一道屏障,阻碍活性分子的渗透,而革兰氏阳性菌不存在这样的结构。由于八角茴香提取物在食品中的应用研究极少,其次,关于八角茴香具体的抑菌机制几乎没有相关报道,因此,想要解释其中的原因还需要进一步更深入的研究探讨。

2.3 八角茴香提取物添加量对风干鲈鱼加工及贮藏过程中生物胺含量的影响

由图2可知,风干鲈鱼加工贮藏过程中共检测出5 种生物胺,分别为腐胺、尸胺、组胺、酪胺和苯乙 胺,八角茴香提取物对上述5 种生物胺及总生物胺均具有显著(P<0.05)的抑制作用。总生物胺含量呈先增加后减少的趋势,在贮藏2 周时总生物胺达到最大值,其中300 mg/kg处理组总生物胺含量最低,为283.97 mg/kg,相对对照组下降了29.01%。在检出的5 种生物胺中,尸胺含量最高,腐胺次之,其次为酪胺、组胺和苯乙胺。腐胺、尸胺在贮藏后期含量下降,可能与此过程中肠杆菌的减少有关,研究表明肠杆菌是腐胺、尸胺产生的主要微生物 [24],肠杆菌具有氨基酸脱羧酶活性,其产生的脱羧酶能够促进氨基酸脱羧,推动生物胺的大量积累 [25]。组胺、酪胺在加工贮藏过程中呈增加趋势,随着八角茴香提取物添加量的增加,组胺及酪胺含量显著(P<0.05)降低。腌制结束时各组均无组胺检出,对照组及100 mg/kg处理组在风干成熟结束时有组胺检出,而300、500 mg/kg处理组则在贮藏1 周时才有组胺检出。相对于腐胺、尸胺、组胺、酪胺而言,苯乙胺含量较低,一直维持在7 mg/kg以下。魏延玲等 [18]研究发现KCl部分替代NaCl能够有效控制风干鲈鱼成品中总生物胺含量,当KCl替代比例为20%时,风干鲈鱼成品中总生物胺含量达到最低值,为192.17 mg/kg,相对对照组(518.04 mg/kg)降低了62.90%。风干结束时300 mg/kg八角茴香提取物鲈鱼成品中总生物胺含量为141.02 mg/kg,相对对照组(233.69 mg/kg)降低了39.66%。魏延玲等 [26]研究了0、50、100、150、200 mg/kg的阿魏酸处理组对风干鲈鱼加工及贮藏过程中生物胺的抑制效应,结果显示,阿魏酸能够明显抑制腐胺、尸胺、组胺、酪胺的生成,但对亚精胺的生成具有促进作用,4 ℃条件下贮藏3 周时,200 mg/kg阿魏酸处理组中总生物胺含量为330.08 mg/kg,相对对照组下降了25.48%。由图2可知,贮藏结束时,300 mg/kg八角茴香提取物处理组样品中总生物胺含量为260.69 mg/kg,相对对照组下降了30.74%。

适量的生物胺对人体是有益的,具有促进生长和代谢、增强肠道免疫系统、控制血压、消除自由基等生理作用,但是如果摄入过多的生物胺则会对机体产生毒性作用,出现如头痛、脑出血、高血压、皮疹、发热、呼吸困难、肿胀、腹泻、呕吐等中毒症状。就毒性而言,组胺的毒性最大,其次为酪胺。Parente等 [27]报道口服8~40 mg组胺会产生轻微中毒症状,40~100 mg会产生中等中毒症状,超过100 mg会产生严重中毒症状。口服酪胺超过100 mg会引起偏头痛,超过1 080 mg会引起中毒性肿胀。Sandler等 [28]报道口服3 mg苯乙胺会引起偏头痛,达到1 000 mg/kg时则对人体健康具有极大的危害。由于生物胺的毒性作用因人而异,它与肠道的解毒功能、胺类氧化酶的存在等诸多因素有关,因此很难以统一标准来衡量生物胺的毒性阈值。欧美及我国对部分水产品中组胺含量做了限量要求:美国食品药品监督管理局要求进口水产品组胺含量不得超过50 mg/kg;欧盟规定鲭科、鲱科类腌制鱼中组胺含量不得超过200 mg/kg [29];其他食品中组胺不得超过100 mg/kg,酪胺不得超过100~800 mg/kg,苯乙胺含量应控制在30 mg/kg以下;我国国家标准规定腌渍鲐鱼、腌渍金枪鱼中组胺不得超过1 000 mg/kg;其他腌渍鱼组胺含量不得超过300 mg/kg [30]。尽管腐胺、尸胺没有直接的毒性作用,但是由于生物胺毒性的协同作用,在一定条件下能够增强组胺和酪胺的毒性。

目前,已有一些关于金枪鱼、沙丁鱼、鲑鱼、大西洋鲱鱼、雀鳝鱼等海水鱼中生物胺生成情况的研究 [31-32],然而对于淡水鱼(特别是腌制水产品)中生物胺的国内外研究报道很少,腌制水产品中生物胺的控制方法主要分为3 种:物理控制方法、生物控制方法和化学控制方法。Hwang等 [33]研究发现晒干、35 ℃热风干燥、55 ℃热风干燥和冷风干燥4 种干燥方法均能够使不同食盐质量浓度的遮目鱼中组胺含量低于19 mg/kg。一些天然植物提取物可以通过抑制具有氨基酸脱羧酶活性的微生物生长从而有效抑制水产品中的生物胺含量。如大蒜提取物对发酵凤尾鱼中生物胺具有显著的抑制作用,红辣椒、姜、肉桂、丁香等香辛料也能在一定程度上降低生物胺的含量,其中肉桂和丁香主要对组胺和酪胺的抑制作用较为明显 [34]。Mah等 [35]研究发现蔗糖、葡萄糖、山梨醇、乳酸、谷氨酸、柠檬酸、山梨酸等食品添加剂对腌制发酵凤尾鱼中生物胺均具有明 显的抑制作用。因此,寻找一种能够有效降低腌制水产品中生物胺的方法可能将成为今后的研究重点。

3 结 论

八角茴香提取物对风干鲈鱼加工及贮藏过程中的水分含量、pH值变化无显著差异(P>0.05)。八角茴香提取物能够显著(P<0.05)抑制菌落总数和肠杆菌及金黄色葡萄球菌的生长繁殖,对乳酸菌的抑制作用不显著(P>0.05)。在加工及贮藏过程中菌落总数、金黄色葡萄球菌数呈上升趋势,乳酸菌数和肠杆菌数呈先上升后下降趋势,在贮藏2 周时乳酸菌数达到最大值,在贮藏1 周时肠杆菌数达到最大值。同时,八角茴香提取物能够显著(P<0.05)抑制腐胺、尸胺、组胺、酪胺、苯乙胺及总生物胺的生成。就含量而言,尸胺含量最高,腐胺次之,其次为酪胺、组胺,苯乙胺含量较低,一直维持在7 mg/kg以下;就毒性而言,组胺的毒性最大,其次为酪胺。在风干鲈鱼加工及贮藏过程中,腐胺、尸胺、苯乙胺含量呈先上升后下降趋势,贮藏2 周时达到最大值,其中300 mg/kg处理组对于腐胺、尸胺的抑制效果最好,500 mg/kg次之;组胺、酪胺含量呈上升趋势,随着八角茴香提取物添加量的增加,组胺及酪胺含量显著(P<0.05)降低;总生物胺含量呈先增加后减少趋势,贮藏2 周时达到最大值,其中300 mg/kg处理组总生物胺含量最低,为283.97 mg/kg,相对于对照组(400.01 mg/kg)下降了29.01%。

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Inhibition of Microorganisms and Biogenic Amines Formation in Dry-Cured Perch by Star Anise Extract

YANG Rongrong, WANG Yongli, ZHANG Jianhao*
(National Central of Meat Quality and Safety Control, College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)

Abstract:Fresh perch was dry salted with the addition of star anise extract at different concentrations (0, 100, 300, and 500 mg/kg). The inhibition of microbial growth and biogenic amine formation during the processing and storage of drycured perch was studied. The results showed that the star anise extract significantly reduced total plate count, the numbers of Enterobacteriaceae and Staphylococcus aureus compared to the control (P < 0.05), but the inhibitory effects on lactic acid bacteria were not significant (P > 0.05). Five biogenic amines were detected during the processing and storage of drycured perch, including putrescine, cadaverine, histamine, tyramine and phenethylamine. The star anise extract had significant inhibitory effect on these biogenic amines. The total content of biogenic amines increased first, reaching a maximum after storage for two weeks, and then decreased. The treatment with 300 mg/kg star anise extract gave the lowest content of biogenic amines, (283.97 mg/kg), which was reduced by 29.01% compared with the control.

Key words:dry-cured perch; star anise extract; biogenic amines; microorganism

DOI:10.7506/spkx1002-6630-201602040

中图分类号:TS251.5

文献标志码:A

文章编号:1002-6630(2016)02-0225-07

引文格式:

杨蓉蓉, 王永丽, 章建浩. 八角茴香提取物对风干鲈鱼加工贮藏过程中生物胺及微生物的抑制效应[J]. 食品科学, 2016, 37(2): 225-231. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201602040. http://www.spkx.net.cn

YANG Rongrong, WANG Yongli, ZHANG Jianhao. Inhibition of microorganisms and biogenic amines formation in drycured perch by star anise extract[J]. F ood Science, 2016, 37(2): 225-231. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201602040. http://www.spkx.net.cn

收稿日期:2015-04-13

基金项目:“十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAD28B01);公益性行业(农业)科研专项(201303082-2);江苏省苏北科技发展计划项目(BC2013415);淮安市科技计划项目(HAN2014030)

作者简介:杨蓉蓉(1990—),女,硕士研究生,研究方向为畜产品加工与质量控制。E-mail:2013108053@njau.edu.cn

*通信作者:章建浩(1961—),男,教授,博士,研究方向为畜产品加工与质量控制。E-mail:nau_zjh@njau.edu.cn