黑曲霉H1-9b 葡萄糖氧化酶的分离纯化及部分性质研究

doi:10.7506/spkx1002-6630-201103042

食品科学 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (3 ): 181-185.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201103042

黑曲霉H1-9b 葡萄糖氧化酶的分离纯化及部分性质研究

苏茉，高亚朋，梁建荣，黄洁，唐云明*

西南大学生命科学学院，重庆市甘薯工程研究中心，三峡库区生态环境教育部重点实验室，重庆 400715

收稿日期:2010-04-22 修回日期:2011-01-10 出版日期:2011-02-15 发布日期:2011-01-13
基金资助:
重庆市科学技术委员会科技攻关项目(CSCT2004AC1012)

Isolation, Purification and Some Properties of Glucose Oxidase from Aspergillius niger H1-9b

SU Mo，GAO Ya-peng，LIANG Jian-rong，HUANG Jie，TANG Yun-ming

Key Laboratory of Eco-environments in Three Gorges Reservoir Region, Ministry of Education,
Chongqing Sweetpotato Engineering Research Center, School of Life Science, Southwest University, Chongqing 400715, China

Received:2010-04-22 Revised:2011-01-10 Online:2011-02-15 Published:2011-01-13

摘要/Abstract

摘要： 采用研磨法破碎黑曲霉H1-9b 菌丝体，经pH5.7 磷酸缓冲液抽提获得粗酶液，粗酶液经DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200 凝胶过滤层析，得到葡萄糖氧化酶纯品。该酶的比活力为30569.7U/mg，回收率为30.2%，提纯倍数为41.4 倍，分子质量为94.1kD，为单亚基酶。该酶最适温度为37℃，最适pH 值为5.7，在30～40℃温度范围内稳定性较好，在pH4.0～8.0 范围内活性稳定。以不同浓度葡萄糖为底物在最适条件下测得该酶K_m值为30.69mmol/L，V_max为21.88μmol/L。Ag^+、Cu²⁺、Zn²⁺ 对该酶活性有较大抑制作用。结果表明，该酶稳定性较好，有一定的应用价值。

关键词: 黑曲霉, 葡萄糖氧化酶, 分离, 纯化, 性质

Abstract: Glucose oxidase (GOD), an H₂O₂-producing enzyme, was isolated and purified from Aspergillius niger H1-9b through electrophoretic homogeneity, ion-exchange chromatography on DEAE-Sepharose column and Superdex-200 gel filtration chromatography. The purified GOD had a molecular weight of 94.1 kD as a monomer. The specific activity of GOD was 30569.7 U/mg with recovery rate of 30.2% and purification fold of 41.4. The optimal reaction pH and temperature of GOD were 5.7 and 37 ℃, respectively. The GOD displayed an excellent stability under the conditions of 30－40 ℃ and pH 4.0－8.0. The kinetic parameters such as K_m and V_max were 30.69 mmol/L and 21.88μmol/L while using glucose as the substrate. Obvious inhibitory effects of Ag⁺, Cu²⁺ and Zn²⁺ on the activity of GOD were observed. Therefore, glucose oxidase from Aspergillius niger H1-9b will have wide applications due to its excellent thermostability and stability in wide pH range.

Key words: Aspergillius niger H1-9b, glucose oxidase, isolation, purification, property

中图分类号:

Q946.5

苏茉，高亚朋，梁建荣，黄洁，唐云明. 黑曲霉H1-9b 葡萄糖氧化酶的分离纯化及部分性质研究[J]. 食品科学, 2011, 32(3 ): 181-185.

SU Mo，GAO Ya-peng，LIANG Jian-rong，HUANG Jie，TANG Yun-ming. Isolation, Purification and Some Properties of Glucose Oxidase from Aspergillius niger H1-9b[J]. FOOD SCIENCE, 2011, 32(3 ): 181-185.

[1]	项婷，夏琛，刘健华，王超然，沈建福. 蛹虫草中新化合物的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性[J]. 食品科学, 2021, 42(8): 235-242.
[2]	王伟，李津津，迟海. 解淀粉芽孢杆菌素Amylocyclicin W5的纯化及其抑菌机理[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 29-34.
[3]	张启月，张士凯，郗良卿，杜海云，吴澎. 不同提取方法对樱桃酒渣水溶性膳食纤维结构、理化与功能性质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 98-105.
[4]	闫世长，徐静雯，武利春，孙禹凡，齐宝坤，李杨. 超声复合碱处理对大豆分离蛋白乳化性影响及其对表没食子儿茶素没食子酸酯保护作用[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 134-141.
[5]	王丽波，高婧宇，李腾飞，李莲玉，刘博，张洪龑，杨昱，徐雅琴. 硒化蒲公英多糖的制备、结构表征及益生菌促增殖活性[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 169-175.
[6]	翟一潭，柏玉香，李晓晓，王禹，邱立忠，卞希良，金征宇. 酶法改性淀粉颗粒的研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 319-328.
[7]	王存堂，高增明，姜辰昊，孔保华. 茶叶乙醇提取物对蜡质玉米淀粉回生性质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 53-60.
[8]	鲁振杰，李娟，陈正行，李诚，李亚男. 麦麸阿拉伯木聚糖的羧甲基化改性及理化性质表征[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 61-67.
[9]	杨蒙，薛正莲，甘玉飞，周杰，王洲，刘艳. 辅助蛋白基因的剪接对磷脂酶A1酶活的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 104-110.
[10]	裴紫薇，杨杰，张磊，周爽，赵云峰，陈达炜，苗虹，方从容. 载气类型对气相色谱法分离顺-反脂肪酸异构体的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 200-205.
[11]	吴晓娟，吴伟. 米糠酸败诱导的蛋白质氧化对米糠清蛋白界面性质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 8-15.
[12]	周一鸣，杜丽娜，李云龙，周小理，陈智东. 高静水压和热处理对荞麦蛋白功能性质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(5): 77-83.
[13]	弓敏，马艳秋，王瑞红，迟媛，迟玉杰. 鸡蛋壳表面典型菌株的分离鉴定及其对全蛋液致腐能力分析[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 153-160.
[14]	魏晨业，包晓玮，王娟，何梦梦，曾兰君，张亚涛. 沙棘多糖分离纯化及抗氧化活性[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 227-232.
[15]	吴晓娟，王晓婵，张佳妮，沈佳丽，李依，金曼芹，吴伟. pH值碱性偏移结合热处理对米糠蛋白结构和功能性质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 23-30.

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