绿色木霉β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

doi:10.7506/spkx1002-6630-201405030

食品科学

绿色木霉β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

刘颖，韩春然，张帅，张玮玮，窦博鑫

哈尔滨商业大学食品工程学院，黑龙江哈尔滨 150076

出版日期:2014-03-15 发布日期:2014-04-04

Separation, Purification and Enzymatic Properties of β-Glucosidase from Tridchoderma viride

LIU Ying, HAN Chun-ran, ZHANG Shuai, ZHANG Wei-wei, DOU Bo-xin

College of Food Engineering, Harbin University of Commerce, Harbin 150076, China

Online:2014-03-15 Published:2014-04-04

摘要/Abstract

摘要：

针对绿色木霉AS3.3711产生的β-葡萄糖苷酶组分，先后运用包括乙酸铵沉淀、透析、Sephadex G-150葡聚糖凝胶柱层析在内的一系列分离纯化技术对该纤维素酶进行纯化，得到β-葡萄糖苷酶纯化组分，并对该酶的酶学性质进行研究。纯化后酶液的蛋白质量浓度为8.12 mg/mL、酶活力为4.08 U/mL，纯化倍数达到18.48，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）测定分子质量为66.0 kD。绿色木霉β-葡萄糖苷酶在酸性条件下稳定性良好，最适pH值为5.0；在温度60～70 ℃能长时间保持较高酶活力，最适反应温度为60 ℃。金属离子中，Ca2+、Mg2+、K+对绿色木霉AS3.3711 β-葡萄糖苷酶活力起到促进作用，Ca2+促进作用最强；而Zn2+、Fe3+对该酶有抑制作用，Ag+、Cu2+、Hg2+重金属离子使β-葡萄糖苷酶几乎丧失了全部活性。

关键词: 绿色木霉, &beta, -葡萄糖苷酶, 分离纯化, 酶学性质

Abstract:

An extracellular β-glucosidase produced by Trichoderma viride AS3.3711 was separated and purifiedby ammonium acetate precipitation, dialysis and Sephadex G-150 column chromatography. The results of enzymecharacterization showed that the protein concentration of the purified enzyme solution was 8.12 mg/mL, and the β-glucosidaseactivity was 4.08 U/mL, with a purification factor of 18.48. Its molecular weight was 66.0 kD. The β-glucosidase fromTrichoderma viride displayed a strong stability under acidic conditions and its optimum pH value was 5.0. In the range of60–70 ℃, it could still maintain a high enzyme activity for a long time with an optimum reaction temperature of 60 ℃.Some metal ions including Ca2+, Mg2+ and K+ improved its activity with Ca2+ having the strongest effect. However, Zn2+ andFe3+ inhibited the enzyme. Heavy metal ions such as Ag+, Cu2+ and Hg2+ almost totally inactivated its activity.

Key words: Tridchoderma viride, β-glucosidase, separation and purification, enzymatic properties

刘颖，韩春然，张帅，张玮玮，窦博鑫. 绿色木霉β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201405030.

LIU Ying, HAN Chun-ran, ZHANG Shuai, ZHANG Wei-wei, DOU Bo-xin. Separation, Purification and Enzymatic Properties of β-Glucosidase from Tridchoderma viride[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201405030.

[1]	项婷，夏琛，刘健华，王超然，沈建福. 蛹虫草中新化合物的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性[J]. 食品科学, 2021, 42(8): 235-242.
[2]	王伟，李津津，迟海. 解淀粉芽孢杆菌素Amylocyclicin W5的纯化及其抑菌机理[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 29-34.
[3]	杨蒙，薛正莲，甘玉飞，周杰，王洲，刘艳. 辅助蛋白基因的剪接对磷脂酶A1酶活的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 104-110.
[4]	石嘉怿，张冉，梁富强，程玉鑫，张太. 谷物植物化学物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选及其分子机制[J]. 食品科学, 2021, 42(5): 9-16.
[5]	胡晓，周雅，陈星星，李来好，杨贤庆，陈胜军，吴燕燕，杨少玲. 罗非鱼肌浆蛋白源抗氧化肽的制备、分离纯化及其体外抗氧化活性[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 63-70.
[6]	林晓彤，董良波，郑俊威，王斌，潘力. 亮氨酸氨肽酶LapA在无孢黑曲霉中的重组表达优化及酶学性质[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 90-96.
[7]	李钰景，孙丽平，庄永亮. 红毛丹果皮中老鹳草素的分离纯化及其热稳定性[J]. 食品科学, 2021, 42(15): 44-49.
[8]	高兆建，丁飞鸿，陈欢，耿云龙，赵宜峰. 产黄青霉抗真菌几丁质酶的纯化及特性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 129-136.
[9]	沙玉欢，毛晓英，吴庆智，张建，程卫东. 核桃分心木黄酮物质的组分及其抗氧化性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 91-98.
[10]	崔晓颖，彭新颜，贺红军，张敏，张晓彤. 芋头多酚氧化酶的分离纯化与酶学特性[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 107-115.
[11]	刘静波，王子秦，于一丁，张婷，刘博群. 豆粕血管紧张素转化酶抑制肽的结构鉴定及作用机制解析[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 123-129.
[12]	高兆建，胡鑫强，宋玉林，丁飞鸿，赵宜峰，陈腾. 解淀粉芽孢杆菌I型耐热普鲁兰酶的纯化及酶特性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 130-137.
[13]	王思琪，胡彦波，翟丽媛，石曾卉，赵珺. 豆渣可溶酸性多糖的分离纯化及结构解析[J]. 食品科学, 2021, 42(10): 52-57.
[14]	陈宏，章骞，陈玉磊，翁凌，张凌晶，谢少浩，刘光明，曹敏杰. 利用牡蛎制备DPP-IV抑制肽及其活性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(10): 120-126.
[15]	李晨，高柳芳，崔晓东，韩宇航，朱丹旭，李娇. 草鱼胰蛋白酶的亲和纯化及酶学性质[J]. 食品科学, 2021, 42(10): 178-183.

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