毛 磊,徐 慧,田迎樱,徐 杰,王玉明,王静凤*,薛长湖
MAO Lei, XU Hui, TIAN Yingying, XU Jie, WANG Yuming, WANG Jingfeng*, XUE Changhu
摘要:
目的:研究叶瓜参长链碱(long-chain base from the sea cucumber Cucumaria frondosa,Cf-LCB)对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用,并探讨其作用机制。方法:以四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测Cf-LCB对3T3-L1前脂肪细胞增殖活性的影响;采用传统鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,分别采用油红O染色和甘油三酯(triglycerides,TG)含量测定法评价其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响;反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(quantity real-time reverse transcript polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测脂肪细胞分化关键基因CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors gamma,PPARγ)以及WNT/β-catenin通路关键基因WNT10b(wingless-type MMTV integration site family members)、卷曲蛋白1(frizzled protein1,FZ1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LDL-receptor-related protein6,LRP6)和β-连环蛋白(β-catenin)的mRNA表达水平;Western blotting法检测WNT/β-catenin通路关键基因LRP6和β-catenin的蛋白表达量。结果:Cf-LCB能显著抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖;抑制3T3-L1细胞脂滴形成以及C/EBPα和PPARγ mRNA表达;显著上调WNT/β-catenin通路关键基因FZ1、LRP6和β-catenin mRNA表达,对WNT10b的表达无影响;显著促进LRP6和β-catenin的蛋白表达,提高核内β-catenin含量。结论:Cf-LCB能够显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,其作用机制与激活WNT/β-catenin通路有关。
中图分类号: