庆大霉素免疫亲和柱的制备及测定

doi:10.7506/spkx1002-6300-200922042

食品科学 ›› 2009, Vol. 30 ›› Issue (22 ): 188-191.doi: 10.7506/spkx1002-6300-200922042

庆大霉素免疫亲和柱的制备及测定

李哲，胡拥明，张柳伟，刘丽强，陈伟，王利兵，胥传来*

江南大学食品学院

收稿日期:2009-07-08 出版日期:2009-11-15 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 胥传来* E-mail:xcl@jiangnan.edu.cn

Preparation of Immunoaffinity Column for Separation and Indrect ELISA Determination of Gentamycin

LI Zhe，HU Yong-ming，ZHANG Liu-wei，LIU Li-qiang，CHEN Wei，WANG Li-bing，XU Chuan-lai*

(School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China)

Received:2009-07-08 Online:2009-11-15 Published:2010-12-29
Contact: XU Chuan-lai* E-mail:xcl@jiangnan.edu.cn

摘要/Abstract

摘要：

建立庆大霉素残留的间接竞争ELISA 检测方法及其用于样品处理的免疫亲和柱的制备。结果表明：ELISA方法的IC50 为3.8ng/ml，线性范围为0.1～25ng/ml(R2 ＝ 0.99)，检测限为0.1ng/ml；用该抗体做的免疫亲和柱使用条件进行了探索，表明当洗脱液为70% 甲醇- 磷酸盐缓冲液(7:3，V/V)，体积为5ml 时，可以达到最佳的洗脱；利用庆大霉素标准品建立了HPLC 测定的标准曲线，测得吸附率均在90% 以上，回收率均在60% 以上，可以重复使用大约5 次左右，说明该免疫亲和柱的灵敏性和可靠性。

关键词: 庆大霉素, 多克隆抗体, 间接竞争酶联免疫法, 免疫亲和柱

Abstract:

Gentamycin residues were analyzed through indrect ELISA method, and immunoaffinity columns specific to gentamycin was prepared for its separation. The optimal ELISA for detecting gentamycin in swine tissues was studied. The IC50 for gentamycin was 3.8 ng/ml. The linear range was 0.1～25 ng/ml (R2=0.99) with a detection limit of 0.1 ng/ml. The immunoaffinity column was prepared using such antibody, and could be eluted with 5ml methanol/PBS (7:3, V/V) solution. The rate of adsroption to gentamycin was more than 90% and recovery more than 60%, could be repeatedly used for about 5 times.

Key words: gentamycin, polyclonal antibody, indirect competitive-ELISA, immunoaffinity column

中图分类号:

R978.12

李哲，胡拥明，张柳伟，刘丽强，陈伟，王利兵，胥传来*. 庆大霉素免疫亲和柱的制备及测定[J]. 食品科学, 2009, 30(22 ): 188-191.

LI Zhe，HU Yong-ming，ZHANG Liu-wei，LIU Li-qiang，CHEN Wei，WANG Li-bing，XU Chuan-lai*. Preparation of Immunoaffinity Column for Separation and Indrect ELISA Determination of Gentamycin[J]. FOOD SCIENCE, 2009, 30(22 ): 188-191.

[1]	张彪，黄娜，张万利，王硕，生威. 基于上转换纳米材料与磁分离的荧光免疫分析方法检测食品中酪胺[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 270-275.
[2]	靳登鹏，周雄，刘焕，杨娇，黄卓权，卜玲玲，柯倩华，柳春红. 基于免疫亲和层析和ProteoMiner处理的母乳乳清蛋白质组学分析[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 54-60.
[3]	吴宇，叶金，李丽，李森，轩志宏，崔华，刘洪美，王松雪，马海华，张峰，何建洪. 免疫亲和柱全自动净化-超高效液相色谱-串联质谱-全碳标记内标法精确测定粮油中玉米赤霉烯酮[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 267-272.
[4]	赵建华，李浩霞，尹跃，王亚军，李彦龙，樊云芳，安巍，曹有龙. 枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2019, 40(10): 77-83.
[5]	戴杰雨，姜永华，张玉洁，王豪杰，刘潇然，刘翠华，任小林. 苹果转录因子MdHB1的原核表达与多克隆抗体制备[J]. 食品科学, 2018, 39(8): 69-76.
[6]	王向阳，顾双，杨玲. 橘霉素免疫牛蛙肌肉蛋白柱的制备及其吸附橘霉素作用分析[J]. 食品科学, 2018, 39(22): 159-165.
[7]	王强，王旭峰，赵东豪，黎智广，蔡楠，关婉琪，黄珂，李刘冬. 免疫亲和柱净化-UPLC-MS/MS测定鱼虾肉中的3 种氨基糖苷类抗生素[J]. 食品科学, 2018, 39(20): 326-331.
[8]	朱帆，李焕婷，王弘，杨金易，徐振林，雷红涛，肖治理，孙远明，沈玉栋. 间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测番茄酱和果汁中异细交链孢菌酮酸[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 250-254.
[9]	王静，马宁宁，宋洋. 杂环胺人工抗原的合成以及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 45-50.
[10]	张家宁，丁轲，韩涛，陈湘宁. 不同净化柱处理对小麦粉中4 种镰刀菌毒素的净化效果[J]. 食品科学, 2017, 38(14): 316-322.
[11]	李佩佩，张小军，严忠雍，陈思，伦丽丽，高学慧，刘文静. 免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-串联质谱检测鱼虾中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸[J]. 食品科学, 2016, 37(24): 257-261.
[12]	丁承超，谢曼曼，曾海娟，刘箐. 弧菌外膜蛋白Ompk基因序列分析及其多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2016, 37(23): 141-146.
[13]	张家宁，丁轲，韩涛，陈湘宁. 以聚苯乙烯-二乙烯苯为载体的多目标免疫亲和柱的制备及应用[J]. 食品科学, 2016, 37(20): 172-176.
[14]	王男男，李岩松，孟星宇，周玉*，乔斌，孙宇，胡盼，卢士英，任洪林，柳增善. 芴完全抗原和多克隆抗体制备与鉴定[J]. 食品科学, 2015, 36(9): 108-112.
[15]	黎睿，谢刚*，王松雪. 高效液相色谱法同时检测粮食中常见8 种真菌毒素的含量[J]. 食品科学, 2015, 36(6): 206-210.

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