纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的表达

食品科学 ›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (5): 199-202.

纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的表达

黄磊, 谢玉娟, 李申, 李丹, 梁凤来, 刘如林

南开大学生命科学学院；南开大学生命科学学院天津300071；天津300071；

出版日期:2007-05-15 发布日期:2011-12-31

Molecular Clone and Expression of Nattokinase Gene in Escherichia coli and Bacillus subtilis

HUANG Lei, XIE Yu-Juan, LI Shen, LI Dan, LIANG Feng-Lai, LIU Ru-Lin

School of Life Science,Nankai University,Tianjin 300071,China

Online:2007-05-15 Published:2011-12-31

摘要/Abstract

摘要： 以纳豆芽孢杆菌HL-1全基因组DNA为模板,PCR分别扩增编码信号肽、前导肽及成熟肽的前纳豆激酶原基因序列(pre-pro-NK),编码前导肽、成熟肽的纳豆激酶原基因序列(pro-NK)和只编码成熟肽的纳豆激酶基因序列(NK),构建了大肠杆菌表达质粒pET28a-NK表达前纳豆激酶原基因及大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pHT315-NK表达纳豆激酶原基因和纳豆激酶基因,实现了纳豆激酶基因在大肠杆菌及枯草芽孢杆菌中的表达,并进行了活性分析。

关键词: 纳豆激酶基因, 大肠杆菌, 枯草芽孢杆菌, 表达

Abstract: Chromosome DNA was isolated from Bacillus subtilis(natto.var).Pre-pro-nk(encoding signal peptide,propeptide and mature peptide),pro-nk(encoding propeptide and mature peptide)and nk(encoding mature peptide)were then amplified from chromosome by PCR.The expression vector pET28a-nk and pHT315-nk was constructed and transformed into Escheri- chia coli and Bacillus subtilis to actively express nattokinase and be purified through ion-exchange chromatography.

Key words: nattokinase gene, Escherichia coli, Bacillus subtilis, active expression

黄磊, 谢玉娟, 李申, 李丹, 梁凤来, 刘如林. 纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的表达[J]. 食品科学, 2007, 28(5): 199-202.

HUANG Lei, XIE Yu-Juan, LI Shen, LI Dan, LIANG Feng-Lai, LIU Ru-Lin. Molecular Clone and Expression of Nattokinase Gene in Escherichia coli and Bacillus subtilis[J]. FOOD SCIENCE, 2007, 28(5): 199-202.

[1]	甘玉飞，薛正莲，周杰，王芳，王洲，刘艳. 黏质沙雷菌磷脂酶A1辅助蛋白S对表达宿主菌大肠杆菌抑制作用机制[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 45-51.
[2]	娄海伟，赵玉，赵逸，林俊芳，赵仁勇，叶志伟，郭丽琼. 蛹虫草转录组分析及类胡萝卜素生物合成相关基因的挖掘[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 150-156.
[3]	王婷，刘婵婵，任娟，荆蓉蓉，钱卫东. 亚硒酸钠促进多形汉逊酵母DL-1合成谷胱甘肽的转录组学分析[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 193-199.
[4]	范明，彭丽桃，闫等，范刚，杨书珍，李杰. VmaH和PMA在指状青霉中的表达及其作为潜在杀菌作用靶点的可能性[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 126-133.
[5]	宋媛，胡秋辉，苏安祥，裴斐，马高兴，马宁，杨文建. 转录组学解析茉莉酸甲酯对双孢蘑菇个体大小的影响机制[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 130-137.
[6]	江君，刘军，杨绍青，马帅，闫巧娟，江正强. 黄杆菌褐藻胶裂解酶的高效表达及其在褐藻寡糖制备中的应用[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 145-152.
[7]	门佳轩，熊博，郝亚男，李旋，刘益宁，谢希贤. 代谢工程优化大肠杆菌高效合成L-苯丙氨酸[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 114-120.
[8]	杨其乐，丁一峰，张宇，聂若男，李亚萌，王佳，王小红. 沙门氏菌噬菌体LPST144尾纤维gp38的序列分析及其结合活性[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 66-73.
[9]	贾园园，李祥，张振华，张闪，杨露露，唐存多. 重组大肠杆菌全细胞催化D,L-扁桃酸对映选择性制备L-苯甘氨酸[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 83-89.
[10]	孙悦，刘佳伊，陈璐，杜宏，白凤翎，吕欣然，张德福，郭晓华，励建荣. 抗耐药性大肠杆菌乳酸菌的筛选及抑菌机制[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 121-127.
[11]	林晓彤，董良波，郑俊威，王斌，潘力. 亮氨酸氨肽酶LapA在无孢黑曲霉中的重组表达优化及酶学性质[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 90-96.
[12]	赵乐，张晓桐，刘利军，谢水琪，靳奇文，孟祥晨. 氨基酸对植物乳杆菌KLDS1.0391生长及细菌素合成的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(18): 37-44.
[13]	张高川，何超永，王崇龙，王大慧，卫功元. 转录组测序分析氯化钠对普鲁兰生物合成的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(18): 45-50.
[14]	戚英伟，刘悬烁，丁毓端，姜永华，张玉洁，刘佳，蒋紫洮，任小林. 脱落酸处理对苹果成熟、乙烯合成及其信号转导基因表达的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(17): 225-232.
[15]	贺明阳，洪敏，王日葵，喻最新，朱莉，周炼，邓涂静. 宽皮柑橘浮皮时脱落酸积累变化及其代谢基因表达特征[J]. 食品科学, 2021, 42(17): 54-62.