李亚楠1,王 瑞1,李 涛2,王云贵3,黄登宇1,*
LI Yanan1, WANG Rui1, LI Tao2, WANG Yungui3, HUANG Dengyu1,*
摘要:
建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度进行方法学评价。结果表明,经优化,最佳反应条件为抗体稀释度1∶4 000,酶标抗原稀释度1∶80,包被条件为37 ℃ 2 h后4 ℃过夜,封闭液为1%牛血清白蛋白,竞争反应1 h。该方法的线性检测范围为0.030~10.595 ng/mL,IC50为0.559 ng/mL;加标回收率为84.9%~103.4%,批内变异系数为3.4%~7.8%,批间变异系数为4.7%~11.8%;除与呋喃妥因原药交叉反应率为36.2%,与其他结构类似物及衍生化试剂交叉反应率均小于0.1%。该方法灵敏、准确,可用于动物组织中呋喃妥因代谢物的快速筛查。
中图分类号: