双抗夹心ELISA方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

doi:10.7506/spkx1002-6630-201024058

食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (24): 272-276.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201024058

双抗夹心ELISA方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

段霞¹，黄欣²，黄岭芳¹，魏华¹，赖卫华^1,*

1.南昌大学食品科学与技术国家重点实验室
2.南昌市西湖区疾病预防控制中心

收稿日期:2010-08-10 修回日期:2010-11-15 出版日期:2010-12-25 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 赖卫华 E-mail:talktolaiwh@163.com
基金资助:
科技部中小企业创新基金项目(10C26223601934)

Detection of Listeria monocytogenes in Food by Sandwich ELISA

DUAN Xia1，HUANG Xin2，HUANG Ling-fang1，WEI Hua1，LAI Wei-hua1,*

1. State Key Laboratory of Food Science and Technology, Nanchang University, Nanchang 330047, China ；
2. Nanchang Xihu District Center for Disease Control and Prevention, Nanchang 330025, China

Received:2010-08-10 Revised:2010-11-15 Online:2010-12-25 Published:2010-12-29
Contact: LAI Wei-hua E-mail:talktolaiwh@163.com

摘要/Abstract

摘要：

采用0.5% 福尔马林灭活的单核细胞增生李斯特氏菌作为免疫原免疫日本大耳兔，获得抗单核细胞增生李斯特氏菌多克隆抗体，并以此多克隆抗体作为捕获抗体，以抗单核细胞增生李斯特氏菌Internalin A(InlA)单克隆抗体作为检测抗体，建立快速、特异的检测该菌的双抗夹心ELISA 方法。结果表明：该方法对单核细胞增生李斯特氏菌纯培养液的最低检测量为1.7 × 105CFU/mL。在检测食品样品的实验中，食品样本对本方法干扰较小，运用选择性增菌液进行前增菌可提高该方法的准确性。

关键词: 单核细胞增生李斯特氏菌, 多克隆抗体, 单克隆抗体, 双抗夹心ELISA 方法

Abstract:

A rapid, specific and sensitive sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed to detect L. monocytogenes in food samples, which using polyclonal antibody as the capture antibody and anti-Internalin monoclonal antibody as the detection antibody. Anti-Listeria monocytogenes polyclonal antibody was prepared by using 0.5% formalin inactivated L. monocytogenes as antigen and Japanese rabbits as the host animal. The detection limit was 1.7×105 CFU/mL in pure culture. Results showed that food samples had limited interference to the detection, while pre-enrichment using selective enrichment broth could significantly increase the detection limit and sensitivity.

Key words: Listeria monocytogenes, polyclonal antibody, monoclonal antibody, double-antibody sandwich ELISA

中图分类号:

TS207.3

段霞1，黄欣2，黄岭芳1，魏华1，赖卫华1,*. 双抗夹心ELISA方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌[J]. 食品科学, 2010, 31(24): 272-276.

DUAN Xia1，HUANG Xin2，HUANG Ling-fang1，WEI Hua1，LAI Wei-hua1,*. Detection of Listeria monocytogenes in Food by Sandwich ELISA[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(24): 272-276.

[1]	王晓瑞，邱红玲，王寿利，朱海华，周莉，平洋，谭静，王永，王慧. 抗副溶血弧菌OMPK单克隆抗体的制备及其ELISA双抗体夹心检测方法建立[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 319-325.
[2]	苑宁，张蕴哲，张海娟，于泽，卢鑫，张伟. 可视化跨越式滚环扩增技术检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌[J]. 食品科学, 2021, 42(16): 239-245.
[3]	张彪，黄娜，张万利，王硕，生威. 基于上转换纳米材料与磁分离的荧光免疫分析方法检测食品中酪胺[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 270-275.
[4]	靳登鹏，周雄，刘焕，杨娇，黄卓权，卜玲玲，柯倩华，柳春红. 基于免疫亲和层析和ProteoMiner处理的母乳乳清蛋白质组学分析[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 54-60.
[5]	谭庶，杨金易，许吉华，沈玉栋，曾道平，苏晓娜，钟翠丽，许小炫，孙远明. 鸡肉中金刚烷胺间接竞争ELISA检测方法的建立[J]. 食品科学, 2020, 41(10): 304-310.
[6]	王丽威，刘金，武俊瑞，乌日娜，岳喜庆. 抗牛免疫球蛋白G单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 110-116.
[7]	刘蓓蓓，曹林. 基于量子点建立铅镉快速串联检测方法[J]. 食品科学, 2019, 40(18): 335-341.
[8]	孙菀霞，金玉琴，戴颖秀，肖建伟，王翔，董庆利. 零膨胀模型在散装熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌定量暴露评估中的应用[J]. 食品科学, 2019, 40(11): 49-54.
[9]	赵建华，李浩霞，尹跃，王亚军，李彦龙，樊云芳，安巍，曹有龙. 枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2019, 40(10): 77-83.
[10]	戴杰雨，姜永华，张玉洁，王豪杰，刘潇然，刘翠华，任小林. 苹果转录因子MdHB1的原核表达与多克隆抗体制备[J]. 食品科学, 2018, 39(8): 69-76.
[11]	江荣花，苏亮，任鹏程，孙琳珺，王翔，刘箐，董庆利. 低温乳化香肠加工过程中单核细胞增生李斯特氏菌的限量标准建议[J]. 食品科学, 2018, 39(22): 276-282.
[12]	谢曼曼，李建武，王广彬，曾海娟，翟绪昭，丁承超，刘武康，刘箐. 副溶血性弧菌单克隆抗体的制备及特性鉴定[J]. 食品科学, 2017, 38(8): 63-68.
[13]	李杰，丁承超，翟续昭，王广彬，刘武康，谢曼曼，曾海娟，王淑娟，孙静娟，董庆利，刘箐. 弧菌外膜蛋白OmpK单克隆抗体的制备及其特性[J]. 食品科学, 2017, 38(6): 111-116.
[14]	王静，马宁宁，宋洋. 杂环胺人工抗原的合成以及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 45-50.
[15]	朱帆，李焕婷，王弘，杨金易，徐振林，雷红涛，肖治理，孙远明，沈玉栋. 间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测番茄酱和果汁中异细交链孢菌酮酸[J]. 食品科学, 2017, 38(4): 250-254.

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