长白山林蛙输卵管糖蛋白多抗制备及应用研究

doi:10.7506/spkx1002-6630-201023029

食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (23): 123-127.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201023029

长白山林蛙输卵管糖蛋白多抗制备及应用研究

陈亮¹，兰海楠²，郑鑫²，刘景圣¹,*

1.吉林农业大学食品科学与工程学院
2.吉林农业大学动物科学技术学院

收稿日期:2010-05-26 修回日期:2010-11-10 出版日期:2010-12-15 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 刘景圣 E-mail:liujs1007@vip.sina.com.cn
基金资助:
国家自然科学基金项目(30671536)

Preparation and Application of Polyclonal Antibodies against Oviduct Glucoprotein in Rana Chensinensis Changbaishanensis

CHEN Liang1，LAN Hai-nan2，ZHENG Xin2，LIU Jing-sheng1,*

1. College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China；
2. College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China

Received:2010-05-26 Revised:2010-11-10 Online:2010-12-15 Published:2010-12-29
Contact: LIU Jing-sheng E-mail:liujs1007@vip.sina.com.cn

摘要/Abstract

摘要：

针对长白山林蛙输卵管糖蛋白制备特异性多克隆抗体。将新鲜林蛙输卵管蛋白粗提液经Sepharose Fast Flow阴离子交换柱和Sephadex G-100凝胶层析柱获得纯化的输卵管糖蛋白组分。以纯化输卵管糖蛋白免疫新西兰大白兔，制备多抗血清，采用辛酸- 饱和硫酸铵法对多抗进行纯化并鉴定。结果表明：纯化后的多抗ELISA 效价为1:64000，纯化多抗具有较高的敏感性和特异性，效价较高。利用制备的多抗对长白山林蛙输卵管分泌细胞进行免疫组织化学定位，为分泌细胞培养产物中输卵管糖蛋白进行检测提供研究条件。

关键词: 长白山林蛙, 输卵管糖蛋白, 抗体, 免疫组化

Abstract:

In order to prepare specific polyclonal antibodies against oviduct glucoprotein (OGP) in Rana Chensinensis Changbaishanensis, the crude fresh OGP-rich extract was purified by Sepharose fast flow anion exchange column and Sephadex G-100 gel column chromatography, and New-Zealand albino rabbits were immunized with the purified OGP for the generation of polyclonal antisera. The purification and identification of the polyclonal antisera obtained were performed using the caprylic acid-saturated ammonium sulfate method. The titer of the purified polyclonal antibodies was measured by enzyme linked immunosorbent assay to be 1:64000, which were characterized by high sensitivity, specificity and titer. Moreover, the polyclonal antibodies prepared in this study were used for the immunohistochemical localization and detection of OGP secreting cells in the oviduct of Rana Chensinensis Changbaishanensis, which was expected to lay an experimental foundation for determining OGP in the culture product of OGP secreting cells.

Key words: Rana chensinensis Changbaishanensis, oviduct glucoprotein, antibody, immunohistochemistry

中图分类号:

陈亮1，兰海楠2，郑鑫2，刘景圣1,*. 长白山林蛙输卵管糖蛋白多抗制备及应用研究[J]. 食品科学, 2010, 31(23): 123-127.

CHEN Liang1，LAN Hai-nan2，ZHENG Xin2，LIU Jing-sheng1,*. Preparation and Application of Polyclonal Antibodies against Oviduct Glucoprotein in Rana Chensinensis Changbaishanensis[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(23): 123-127.

[1]	王晓瑞，邱红玲，王寿利，朱海华，周莉，平洋，谭静，王永，王慧. 抗副溶血弧菌OMPK单克隆抗体的制备及其ELISA双抗体夹心检测方法建立[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 319-325.
[2]	张彪，黄娜，张万利，王硕，生威. 基于上转换纳米材料与磁分离的荧光免疫分析方法检测食品中酪胺[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 270-275.
[3]	靳登鹏，周雄，刘焕，杨娇，黄卓权，卜玲玲，柯倩华，柳春红. 基于免疫亲和层析和ProteoMiner处理的母乳乳清蛋白质组学分析[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 54-60.
[4]	杨武英，王弘，洪艳平，王丹，徐振林，沈玉栋，柯法钧，陈薪竹，孙远明. 呋喃它酮代谢物单链抗体制备和酶联免疫分析方法[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 251-258.
[5]	谭庶，杨金易，许吉华，沈玉栋，曾道平，苏晓娜，钟翠丽，许小炫，孙远明. 鸡肉中金刚烷胺间接竞争ELISA检测方法的建立[J]. 食品科学, 2020, 41(10): 304-310.
[6]	江东健，罗秀儿，何庆华. 基于噬菌体展示纳米抗体的绿色免疫PCR检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 256-261.
[7]	邱涛涛，徐振林，甘庆庆，王兰腾，沈兴，李向梅，孙远明，雷红涛. 卵黄抗体体内代谢及中和毒素研究进展[J]. 食品科学, 2019, 40(5): 303-308.
[8]	王丽威，刘金，武俊瑞，乌日娜，岳喜庆. 抗牛免疫球蛋白G单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 110-116.
[9]	刘蓓蓓，曹林. 基于量子点建立铅镉快速串联检测方法[J]. 食品科学, 2019, 40(18): 335-341.
[10]	王淑娟，刘程，方水琴，田亚晨，董庆利，王翔，许东坡，刘箐,. 基于钴金属有机骨架材料（ZIF-67）催化性能的牛奶中大肠杆菌O157:H7快速定量检测[J]. 食品科学, 2019, 40(18): 323-328.
[11]	贾胜男，杨方，臧金红，夏文水，姜启兴，许艳顺，于沛沛. 骨架蛋白降解对冰鲜草鱼质构的影响[J]. 食品科学, 2019, 40(13): 1-7.
[12]	赵建华，李浩霞，尹跃，王亚军，李彦龙，樊云芳，安巍，曹有龙. 枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2019, 40(10): 77-83.
[13]	王嘉怡，潘姝璇，夏陈，邓海云，吕晓华，陈建. 发芽糙米米糠营养成分和γ-氨基丁酸分析及缓解体力疲劳功效[J]. 食品科学, 2019, 40(1): 177-182.
[14]	戴杰雨，姜永华，张玉洁，王豪杰，刘潇然，刘翠华，任小林. 苹果转录因子MdHB1的原核表达与多克隆抗体制备[J]. 食品科学, 2018, 39(8): 69-76.
[15]	颜朦朦，佘永新，洪思慧，张超，曹晓林，王猛强，王珊珊，郑鹭飞，金茂俊，邵华，金芬，刘海金，王静. 基于不同识别元件的表面等离子体共振技术在食品安全检测中的研究进展[J]. 食品科学, 2018, 39(23): 263-271.

长白山林蛙输卵管糖蛋白多抗制备及应用研究

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