环介导等温扩增法快速检测阪崎肠杆菌

doi:10.7506/spkx1002-6630-201022070

食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (22): 322-325.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201022070

环介导等温扩增法快速检测阪崎肠杆菌

马寅众¹，陈江源²，房国梁¹，李琦¹，李睿¹，周帼萍¹，刘志国^{1 ,*}

1.武汉工业学院生物与制药工程学院
2.江汉大学卫生职业技术学院

收稿日期:2010-06-30 修回日期:2010-10-11 出版日期:2010-11-25 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 刘志国 E-mail:zhiguo_l@126.com
基金资助:
武汉市科技局对外科技合作与交流计划项目(201070934341)；武汉工业学院研究生创新基金重点项目(09cx002

Rapid Detection of Enterobacter sakazakii by LAMP

MA Yin-zhong1，CHEN Jiang-yuan2，FANG Guo-liang1，LI Qi1，LI Rui1，ZHOU Guo-ping1，LIU Zhi-guo1,*

(1. School of Biology and Pharmaceutical Engineering, Wuhan Polytechnic University, Wuhan 430023, China；
2. School of Health Science, Jianghan University, Wuhan 430016, China)

Received:2010-06-30 Revised:2010-10-11 Online:2010-11-25 Published:2010-12-29
Contact: LIU Zhi-guo1 E-mail:zhiguo_l@126.com

摘要/Abstract

摘要：

目的：研究阪崎肠杆菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification，简称LAMP)方法，实现对食品中阪崎肠杆菌的快速检测。方法：针对阪崎肠杆菌16S rRNA 基因(16S rDNA)及外膜蛋白A(OmpA)基因设计LAMP 引物，扩增后通过电泳或加入显色剂SYBR-GREEN Ⅰ检测。结果：LAMP 法能有效特异地检测出阪崎肠杆菌；以16S rRNA 引物检测阪崎肠杆菌的最低检出限为32CFU/mL，用OmpA 引物检测阪崎肠杆菌的最低检出限达3CFU/mL，扩增产物加入SYBR-GREEN Ⅰ在紫外条件下可见荧光，与电泳检测具有同样的灵敏度。结论：LAMP 法可实现对阪崎肠杆菌的快速检测，在食品检测中具有广阔的应用前景。

关键词: 阪崎肠杆菌, 环介导等温扩增, 快速检测

Abstract:

Objective: To develop a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method for rapid detection of Enterobacter sakazakii in food. Methods: LAMP primers were designed on the basis of 16S rRNA gene (16S rDNA) and outer membrane protein A gene (OmpA) in Enterobacter sakazakii. The LAMP products were evaluated by electrophoresis or SYBR-GREEN I. Results: The detection limit of Enterobacter sakazakii by LAMP assay was 32 CFU/mL using 16S rRNA primers or 3 CFU/mL using OmpA primers. The similar detection sensitivity of LAMP products using SYBR-GREEN I and electrophoresis was observed. Conclusion: LAMP method was effective and sensitive for rapidly detecting Enterobacter sakazakii, which will have a broad application prospect in food.

Key words: Enterobacter sakazakii, loop-mediated isothermal amplification, detection

中图分类号:

Q93.3

马寅众1，陈江源2，房国梁1，李琦1，李睿1，周帼萍1，刘志国1,*. 环介导等温扩增法快速检测阪崎肠杆菌[J]. 食品科学, 2010, 31(22): 322-325.

MA Yin-zhong1，CHEN Jiang-yuan2，FANG Guo-liang1，LI Qi1，LI Rui1，ZHOU Guo-ping1，LIU Zhi-guo1,*. Rapid Detection of Enterobacter sakazakii by LAMP[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(22): 322-325.

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