三步沉淀法纯化鸡卵类黏蛋白

doi:10.7506/spkx1002-6630-201424014

食品科学

三步沉淀法纯化鸡卵类黏蛋白

王帅1，吴子健1,*，王素英1，刘建福1，张伟1，帖航1，荣强2

1.天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津市食品生物技术重点实验室，天津 300134；
2.天津市青年职业技术学院烹饪系，天津 300191

出版日期:2014-12-25 发布日期:2014-12-29
通讯作者: 吴子健
基金资助:
天津市应用基础与前沿技术研究计划面上项目（14JCYBJC30900）；天津市高等学校创新团队项目（TD12-5049）

Purification of Hen’s Egg Ovomucoid by Three-Step Precipitation

WANG Shuai1, WU Zi-jian1,*, WANG Su-ying1, LIU Jian-fu1, ZHANG Wei1, TIE Hang1, RONG Qiang2

1. Tianjin Key Laboratory of Food Biotechnology, College of Biotechnology and Food Science, Tianjin University of Commerce,
Tianjin 300134, China; 2. Cuisine Department, Tianjin Youth Professional Technology Institute, Tianjin 300191, China

Online:2014-12-25 Published:2014-12-29
Contact: WU Zi-jian

摘要/Abstract

摘要：

鸡卵类黏蛋白（hen’s egg ovomucoid，HOVM）是鸡蛋清中最重要的过敏原蛋白，探讨三步沉淀（一步三氯乙酸沉淀以及两步硫酸铵盐析沉淀）从鸡蛋清中提取并纯化HOVM的工艺条件，并利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）技术检测纯化效果。结果表明：用等体积去离子水稀释的鸡卵清液加入质量分数10%三氯乙酸去除大部分杂蛋白后，所得上清液加入硫酸铵至终饱和度50%，盐析沉淀进一步去除非HOVM的杂蛋白，上清液中最后再追加硫酸铵至终饱和度80%，离心所得沉淀再经过透析冻干即为高纯度的HOVM；HPLC（检测波长220 nm）检测所获HOVM的纯度为99.202%，此工艺条件下得到HOVM的提取率约为27.05%。

关键词: 鸡卵类黏蛋白, 三步沉淀, 盐析

Abstract:

Hen’s egg ovomucoid (HOVM) is the dominant allergenic protein from chicken egg white, and obtaining highpurity
HOVM is the prerequisite for understanding its structure and characteristics and reducing its allergenicity. This study
presented a three-step precipitation procedure (precipitation with 10% trichloroacetic acid (TCA) followed by two-step
fractional precipitation with ammonium sulfate) for purifying HOVM. The purification efficiency was evaluated by SDSPAGE
and HPLC. It was found that after most of the protein impurities in the 2-fold diluted egg white were removed by
adding 10% TCA, the centrifugal supernatant was added with ammonium sulfate to saturation (50%) for further removal
of non-HOVM proteins by salting-out. Finally, additional ammonium sulfate was added to the supernatant fraction until
saturation (80%). After centrifugation, the precipitation fraction was dialyzed and freeze-dried to obtain high-purity HOVM
product. HPLC analysis (at 220 nm) showed that the purity of the HOVM was 99.202%, with a yield of 27.05%.

Key words: hen’s egg ovomucoid, three-step precipitation, salting-out

中图分类号:

R392.1

王帅1，吴子健1,*，王素英1，刘建福1，张伟1，帖航1，荣强2. 三步沉淀法纯化鸡卵类黏蛋白[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201424014.

WANG Shuai1, WU Zi-jian1,*, WANG Su-ying1, LIU Jian-fu1, ZHANG Wei1, TIE Hang1, RONG Qiang2. Purification of Hen’s Egg Ovomucoid by Three-Step Precipitation[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201424014.

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