从毕赤酵母中提取外源重组蛋白的超声破碎条件及优化

doi:10.7506/spkx1002-6630-201210012

食品科学 ›› 2012, Vol. 33 ›› Issue (10): 57-60.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201210012

从毕赤酵母中提取外源重组蛋白的超声破碎条件及优化

戴佳锟1,2,3，李燕4，马齐1,2，关正君3，张超3，张艳婷3，赵荣荣3，尉亚辉3,*

1.陕西省科学院酶工程研究所 2.陕西省酶工程技术中心 3.西北大学生命科学学院，西部资源生物与现代生物技术省部共建重点实验室 4.陕西省微生物研究所

出版日期:2012-05-25 发布日期:2012-05-07
基金资助:
陕西省科学院科技计划项目(2011K-17)；西北大学自主创新类项目(10YZZ36)

Optimization of Ultrasonic Treatment for Recovery of Recombinant Protein from Pichia pastoris

DAI Jia-kun1,2,3，LI Yan4，MA Qi1,2，GUAN Zheng-jun3，ZHANG Chao3，ZHANG Yan-ting3， ZHAO Rong-rong3，WEI Ya-hui3,*

(1. Institute of Enzyme Engineering, Shaanxi Academy of Sciences, Xi，an 710600, China ；2. Enzyme Engineering Technology Center of Shaanxi, Xi，an 710600, China ；3. Key Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Western China, College of Life Science, Northwest University, Xi，an 710069, China；4. Shaanxi Provincial Institute of Microbiology, Xi，an 710043, China)

Online:2012-05-25 Published:2012-05-07

摘要/Abstract

摘要： 建立适用于从毕赤酵母菌中提取外源重组蛋白的超声破碎方法。采用Western Blotting免疫印记技术检测从毕赤酵母菌中提取的外源人脂联素蛋白活性，并以外源人脂联素蛋白活性作为考察指标，采用单因素和L9(33)正交试验设计，对超声破碎条件进行优化。结果表明：在外源人脂联素蛋白活性最高的情况下，超声破碎条件为超声破碎功率450W、时间25min、时间间隔(工作时间:间歇时间)10:10(s/s)，此时细胞破碎率为(67.8±2.1)%。若在超声破碎时添加1mmol/L PMSF，虽对细胞破碎率并无显著影响，但外源人脂联素蛋白活性将会明显增高。

关键词: 毕赤酵母, 超声破碎法, 人脂联素蛋白, Western Blotting免疫印记技术

Abstract: In order to establish an appropriate ultrasonic treatment method for the recovery of recombinant protein from Pichia pastoris, the activity of human-adiponectin recombinant protein was evaluated by Western Blotting analysis. A L9(33) orthogonal array design based on single-factor tests was employed to optimize the conditions for ultrasonic treatment. The results showed that the optimal ultrasonic treatment conditions were ultrasonic power of 450 W, ultrasonic treatment time of 25 min and ultrasonic treatment interval of 10 s. Under the optimal ultrasonic treatment conditions, the breaking rate of cell walls was (67.8 ± 2.1)%. The activity of human-adiponectin recombinant protein could be significantly improved by adding 1 mmol/L of PMSF although the addition of PMSF had no effect on breaking rate of cell walls.

Key words: Pichia pastoris, ultrasonication, human-adiponectin protein, Western Blotting analysis

中图分类号:

Q819

戴佳锟,，李燕，马齐，关正君，张超，张艳婷，赵荣荣，尉亚辉. 从毕赤酵母中提取外源重组蛋白的超声破碎条件及优化[J]. 食品科学, 2012, 33(10): 57-60.

DAIJia-kun,，LIYan，MAQi，GUANZheng-jun，ZHANGChao，ZHANGYan-ting，ZHAORong-rong，WEIYa-hui. Optimization of Ultrasonic Treatment for Recovery of Recombinant Protein from Pichia pastoris[J]. FOOD SCIENCE, 2012, 33(10): 57-60.

[1]	甄红敏，华晓晗，马俊文，温永平，李延啸，闫巧娟，江正强. 产黄青霉β-甘露聚糖酶的高效表达、性质及应用[J]. 食品科学, 2021, 42(8): 98-105.
[2]	刘月，高云云，李珊，李王强，李宝坤，卢士玲，蒋彩虹，王庆玲，董娟，李宇辉. 山羊乳-FOS/GOS库德毕赤酵母DS8-1微胶囊的制备及体外评价[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 94-103.
[3]	黄琳，马杰莹，王爽，王楠，MORADANA GAMAGE Rasadi Sajeewa Rajakaruna，路福平，刘逸寒. Streptomyces septatus磷脂酶D在毕赤酵母中的重组表达及酶学性质分析[J]. 食品科学, 2020, 41(8): 100-107.
[4]	王儒昕，韩琴，陈园园，吴菁，闫达中，刘军，李鑫. 共表达分子伴侣PDI和转录因子Aft1对毕赤酵母表达人溶菌酶的影响[J]. 食品科学, 2020, 41(10): 124-130.
[5]	程功，焦思明，冯翠，贾培媛，任立世，杜昱光. 毕赤酵母表达解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶及其水解制备可控结构壳寡糖[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 73-78.
[6]	田理刚，彭茹，姚世响，邓丽莉，曾凯芳. 膜醭毕赤酵母和壳聚糖复合处理对柑橘果实炭疽病的诱导抗病性[J]. 食品科学, 2019, 40(7): 228-237.
[7]	朱宁，于宁，朱月，韦玉龙，张嘉颖，孙爱东. 基于转录组研究MPEF对毕赤酵母的致死机理[J]. 食品科学, 2019, 40(4): 130-137.
[8]	赵鲁宁，周秋阳，杨慧慧，郑鸿儒，温新宇，孙卫红. 季也蒙毕赤酵母Y35-1菌株对枇杷采后炭疽病的抑菌效果及保鲜作用[J]. 食品科学, 2019, 40(4): 170-177.
[9]	张鸿雁，王文军，邓丽莉，姚世响，曾凯芳. 膜醭毕赤酵母真空干燥制剂对热环境耐受力的提高[J]. 食品科学, 2019, 40(10): 112-120.
[10]	吴敏，张宇馨，胡雪芹，张洪斌. 棘孢青霉右旋糖酐酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达[J]. 食品科学, 2018, 39(18): 73-80.
[11]	易晓男，任清华，程炜，孙姜，齐斌，王立梅. 高产β-葡萄糖苷酶工程菌株的构建及其在2,6-二甲氧基对苯醌发酵制备中的应用[J]. 食品科学, 2017, 38(8): 69-73.
[12]	赵一洁，唐毅，王威浩，姚世响，邓丽莉，曾凯芳. 蜜橘酸腐病病原菌的分离鉴定以及不同抑菌剂处理对其控制效果[J]. 食品科学, 2017, 38(7): 230-237.
[13]	曾静，郭建军，袁林. N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶ApkA酶学性质的影响[J]. 食品科学, 2017, 38(6): 48-54.
[14]	李婷，陈景桦，马得草，王星晨，陶永胜,. 优选非酿酒酵母与酿酒酵母在模拟葡萄汁发酵中生长动力学及酯酶活性分析[J]. 食品科学, 2017, 38(22): 60-66.
[15]	黄钦耿，梁玲，陈巧红，吴松刚，黄建忠. 小菜蛾moricin在毕赤酵母中的表达及抑菌活性分析[J]. 食品科学, 2017, 38(16): 36-42.

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