黄曲霉毒素B1降解酶的分离纯化及其酶学特性

doi:10.7506/spkx1002-6630-201419034

食品科学

黄曲霉毒素B1降解酶的分离纯化及其酶学特性

杨文华，李海星，刘晓华，曹郁生

食品科学与技术国家重点实验室，南昌大学中德联合研究院，江西南昌 330047

出版日期:2014-10-15 发布日期:2014-10-17

Purification and Characteristics of an Aflatoxin B1-Degrading Enzyme from Pseudomonas stutzeri F4

YANG Wen-hua, LI Hai-xing, LIU Xiao-hua, CAO Yu-sheng

State Key Laboratory of Food Science and Technology, Sino-German Joint Research Institute,Nanchang University, Nanchang 330047, China

Online:2014-10-15 Published:2014-10-17

摘要/Abstract

摘要：

施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri）F4能产生黄曲霉毒素B1的降解酶（aflatoxin B1-degrading enzyme，ADE），本实验通过3 步法提取纯化ADE，即包括硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析和SephadexG-100凝胶过滤层析。结果表明，通过以上纯化方法，ADE的回收率为56%，纯化的ADE比活力为6.4×104 U/mg，纯化了123 倍。利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得ADE分子质量约为24 kD；ADE与AFB1反应的最适温度和pH值分别为30 ℃和6.0；Cu2+对ADE酶活性有抑制作用；利用双倒数作图法测得ADE表观Km值为5.61×10-5 mol/L。

关键词: 施氏假单胞菌F4, 黄曲霉毒素B1降解酶, 分离纯化, 特性

Abstract:

Aflatoxin B1 (AFB1)-degrading enzyme (ADE) was purified from Pseudomonas stutzeri F4 by a three-step
procedure including ammonium sulfate fractional precipitation and chromatography on DEAE-Sepharose and Sephadex
G-100. A total of 123-fold purification of ADE with a recovery of 56% and an ultimate specific activity of 6.4 × 104 U/mg
were achieved. The apparent molecular mass of ADE was estimated to be about 24 kD by SDS-PAGE. The ADE displayed
the highest degradation activity for AFB1 at 30 ℃ and pH 6.0. Cu2+ exhibited strong inhibitory activity with an apparent Km
of 5.61 × 10-5 mol/L as indicated by the double-reciprocal plot.

Key words: Pseudomonas stutzeri F4, aflatoxin B1(AFB1)-degrading enzyme, purification, characteristics

中图分类号:

Q814.1

杨文华，李海星，刘晓华，曹郁生. 黄曲霉毒素B1降解酶的分离纯化及其酶学特性[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201419034.

YANG Wen-hua, LI Hai-xing, LIU Xiao-hua, CAO Yu-sheng. Purification and Characteristics of an Aflatoxin B1-Degrading Enzyme from Pseudomonas stutzeri F4[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201419034.

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