双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用

doi:10.7506/spkx1002-6630-201723027

食品科学 ›› 2017, Vol. 38 ›› Issue (23): 171-177.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201723027

双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用

郑媛媛1，丁国芳1,2,*，杨最素1，余方苗1，贾盈露1，吴宗泽1，陈锐1

1.浙江海洋大学食品与医药学院，浙江省海洋生物医用制品重点工程技术研究中心，浙江舟山 316022；2.浙江省海洋水产研究所，浙江舟山 316021

出版日期:2017-12-15 发布日期:2017-12-07
基金资助:
国家自然科学基金青年科学基金项目（81001393）；2015年度国家星火计划项目（2015GA700044）；国家海洋局重大计划项目（2015862）；浙江省科技厅重大科技专项计划项目（2013C03036）；浙江省自然科学基金项目（LS15H30001）；浙江省自然科学基金青年资金项目（LQ16H300001）；舟山市公益类科技项目（2015C31012）

Enzymatic Preparation and Antithrombotic Activity of Anticoagulant Peptides from Perinereis aibuhitensis

ZHENG Yuanyuan1, DING Guofang1,2,*, YANG Zuisu1, YU Fangmiao1, JIA Yinglu1, WU Zongze1, CHEN Rui1

1. Engineering Research Centers of Marineorganisms Medical Products, School of Food and Medicine, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316022, China; 2. Marine Fisheries Research Institute of Zhejiang Province, Zhoushan 316021, China

Online:2017-12-15 Published:2017-12-07

摘要/Abstract

摘要： 目的：探讨双齿围沙蚕抗凝血肽（anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis，PAAP）的制备及其抗血栓作用。方法：以抗凝活力为检测指标，筛选最佳酶对沙蚕进行酶解。酶解产物经超滤、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱法分离纯化，得到具有最强抗凝活力的沙蚕寡肽，将此肽命名为PAAP并测定其急性毒性作用。采用角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓形成实验、三氯化铁所致的大鼠动脉血栓形成实验及二磷酸腺苷（adenonisine disphosphate，ADP）诱导的血小板聚集实验，研究PAAP的抗血栓作用。结果：选取碱性蛋白酶作为最佳酶对沙蚕进行酶解，经过分离纯化后得到一条氨基酸序列：脯氨酸-缬氨酸-谷氨酸-精氨酸-赖氨酸（Pro-Val-Glu-Arg-Lys）。经测定，该寡肽的体外抗凝活力可达（1 320.0±20.3）U/g。PAAP的最大耐受量为 11.0 g/（kg·d）且未出现小鼠异常及死亡现象，体内实验表明PAAP对小鼠尾部血栓的形成、大鼠动脉血栓的形成及ADP诱导的血小板聚集均有明显抑制作用。结论：从双齿围沙蚕中提取出的抗凝肽PAAP具有抗血栓作用。

关键词: 双齿围沙蚕, 抗凝血肽, 碱性蛋白酶, 分离纯化, 抗血栓

Abstract: The present study was intended to investigate the enzymatic preparation and antithrombotic activity of anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis (PAAP). The optimum enzyme was determined based on anticoagulant activity. Ultrafiltration, anion-exchange chromatography, gel chromatography and reversed phase high-performance liquid chromatography were used sequentially to separate and purify peptides with the strongest anticoagulant activity from the protein hydrolysate of Perinereis aibuhitensis, named as PAAP. Then, the acute toxicity of PAAP was determined. Furthermore, the antithrombotic activity of PAAP was observed by carrageenan-induced tail thrombosis in mice, FeCl3-induced arterial thrombosis in rats and platelet aggregation induced by adenosine diphosphate (ADP). Alkaline protease was selected as the optimal protease to digest Perinereis aibuhitensis. An anticoagulant peptide was then obtained after separation and purification, and identified as Pro-Val-Glu-Arg-Lys. The anticoagulant activity of PAAP could reach up to (1 320.0 ± 20.3) U/g. The maximum tolerance dose of PAAP was 11.0 g/(kg·d) without the occurrence of abnormality and death in mice. The in vivo experiments also showed that PAAP could prevent the formation of carrageenan-induced tail thrombosis in mice, FeCl3-induced arterial thrombosis in rats and platelet aggregation induced by ADP. Thus PAAP has an antithrombotic effect.

Key words: Perinereis aibuhitensis, anticoagulant peptides, alkaline protease, separation and purification, antithrombosis

中图分类号:

R282.77

郑媛媛，丁国芳，杨最素，余方苗，贾盈露，吴宗泽，陈锐. 双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用[J]. 食品科学, 2017, 38(23): 171-177.

ZHENG Yuanyuan, DING Guofang, YANG Zuisu, YU Fangmiao, JIA Yinglu, WU Zongze, CHEN Rui. Enzymatic Preparation and Antithrombotic Activity of Anticoagulant Peptides from Perinereis aibuhitensis[J]. FOOD SCIENCE, 2017, 38(23): 171-177.

[1]	项婷，夏琛，刘健华，王超然，沈建福. 蛹虫草中新化合物的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性[J]. 食品科学, 2021, 42(8): 235-242.
[2]	王伟，李津津，迟海. 解淀粉芽孢杆菌素Amylocyclicin W5的纯化及其抑菌机理[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 29-34.
[3]	胡晓，周雅，陈星星，李来好，杨贤庆，陈胜军，吴燕燕，杨少玲. 罗非鱼肌浆蛋白源抗氧化肽的制备、分离纯化及其体外抗氧化活性[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 63-70.
[4]	李钰景，孙丽平，庄永亮. 红毛丹果皮中老鹳草素的分离纯化及其热稳定性[J]. 食品科学, 2021, 42(15): 44-49.
[5]	高兆建，丁飞鸿，陈欢，耿云龙，赵宜峰. 产黄青霉抗真菌几丁质酶的纯化及特性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 129-136.
[6]	沙玉欢，毛晓英，吴庆智，张建，程卫东. 核桃分心木黄酮物质的组分及其抗氧化性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 91-98.
[7]	崔晓颖，彭新颜，贺红军，张敏，张晓彤. 芋头多酚氧化酶的分离纯化与酶学特性[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 107-115.
[8]	刘静波，王子秦，于一丁，张婷，刘博群. 豆粕血管紧张素转化酶抑制肽的结构鉴定及作用机制解析[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 123-129.
[9]	高兆建，胡鑫强，宋玉林，丁飞鸿，赵宜峰，陈腾. 解淀粉芽孢杆菌I型耐热普鲁兰酶的纯化及酶特性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 130-137.
[10]	王思琪，胡彦波，翟丽媛，石曾卉，赵珺. 豆渣可溶酸性多糖的分离纯化及结构解析[J]. 食品科学, 2021, 42(10): 52-57.
[11]	陈宏，章骞，陈玉磊，翁凌，张凌晶，谢少浩，刘光明，曹敏杰. 利用牡蛎制备DPP-IV抑制肽及其活性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(10): 120-126.
[12]	李芳芳，卫莹，刘雪，沈明花. 榆干离褶伞溶栓酶对大鼠动脉血栓的抑制作用[J]. 食品科学, 2021, 42(1): 180-186.
[13]	王馨雨，杨绿竹，王婷，王蓉蓉，刘洁，单杨，张群，丁胜华. 植物多酚氧化酶的生理功能、分离纯化及酶促褐变控制的研究进展[J]. 食品科学, 2020, 41(9): 222-237.
[14]	张文敏，张健，周浩纯，赵迪，李赫，刘新旗，肖林. 亚麻籽粕制备小分子抗氧化活性肽[J]. 食品科学, 2020, 41(8): 36-44.
[15]	刘子毅，顾丰颖，王博伦，张帆，刘昊，王锋. 超高压协同碱性蛋白酶制备玉米黄粉ACE抑制肽[J]. 食品科学, 2020, 41(4): 222-228.

双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用

Enzymatic Preparation and Antithrombotic Activity of Anticoagulant Peptides from Perinereis aibuhitensis

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