食品科学 ›› 2020, Vol. 41 ›› Issue (24): 295-303.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20190628-369
张敏,张先舟,李聪,高浩,刘健慧,田益玲,马雯,李英军,檀建新
出版日期:
2020-12-25
发布日期:
2020-12-28
基金资助:
ZHANG Min, ZHANG Xianzhou, LI Cong, GAO Hao, LIU Jianhui, TIAN Yiling, MA Wen, LI Yingjun, TAN Jianxin
Online:
2020-12-25
Published:
2020-12-28
摘要: 建立一种高灵敏的快速检测黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。基于氧化石墨烯(graphene oxide,GO)通过π-π共轭吸附单链寡核苷酸(single-strand DNA,ssDNA),对已结合靶标的ssDNA吸附能力较弱的特性,设计针对AFB1核酸适配体的筛选方案。经过10 轮筛选,共获得45 条ssDNA序列。挑选具有代表性的6 条序列进行亲和力分析实验,其解离常数Kd分别为16.29、27.88、18.54、23.11、47.94、22.31 nmol/L。选用亲和力较高的AFB-5、AFB-8进行特异性实验,结果显示所筛选的适配体能特异性吸附AFB1。最后利用适配体AFB-8作为识别元件建立了基于纳米金比色检测AFB1的方法。在优化的检测条件下,AFB1质量浓度与A520 nm值有良好的线性关系,其回归方程为y=-0.007 09x+0.461 42(R2=0.997 9),线性范围为0.025~10 ng/mL,检出限为0.025 ng/mL。通过特异性实验和对大米样品加标回收实验,加标回收率为83.36%~105.74%,证明本方法的可行性。
中图分类号:
张敏,张先舟,李聪,高浩,刘健慧,田益玲,马雯,李英军,檀建新. 黄曲霉毒素B1核酸适配体筛选和检测方法的建立[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 295-303.
ZHANG Min, ZHANG Xianzhou, LI Cong, GAO Hao, LIU Jianhui, TIAN Yiling, MA Wen, LI Yingjun, TAN Jianxin. Screening of Aptamers for Aflatoxin B1 and Establishment of a Method for Aflatoxin B1 Detection[J]. FOOD SCIENCE, 2020, 41(24): 295-303.
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