卡那霉素酶联免疫检测方法的建立及检测条件的优化

doi:10.7506/spkx1002-6630-200918082

食品科学 ›› 2009, Vol. 30 ›› Issue (18 ): 350-355.doi: 10.7506/spkx1002-6630-200918082

卡那霉素酶联免疫检测方法的建立及检测条件的优化

刘丽强，华朱鸣，许定花，陈伟，胥传来*

江南大学食品学院

收稿日期:2009-05-26 出版日期:2009-09-15 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 胥传来 E-mail:xcl@jiangnan.edu.cn

Development and Optimization of ELISA Detection of Kanamycin

LIU Li-qiang，HUA Zhu-ming，XU Ding-hua，CHEN Wei，XU Chuan-lai*

School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China

Received:2009-05-26 Online:2009-09-15 Published:2010-12-29
Contact: XU Chuan-lai E-mail:xcl@jiangnan.edu.cn

摘要/Abstract

摘要：

制备卡那霉素的多克隆抗体，建立了间接竞争ELISA 方法，并对间接ELISA 检测方法进行条件优化。结果表明：最佳实验条件是以PBS(0.01mol/L、pH7.4)作为包被液，以碳0.05mol/L pH9.6 酸缓冲液加0.1% 的酪蛋白封闭酶标板；最佳的抗体稀释液配方是PBST 溶液加4% 的聚乙二醇6000，溶液选取pH8.5 为佳，二抗稀释度选择1:3000，标准品稀释液则选择0.01mol/L pH7.4 的PBS 溶液。最终，卡那霉素的IC50 值为9.9ng/ml，最低检测限为1.0ng/ml，检测的线性范围为1～500ng/ml。

关键词: 卡那霉素, ELISA, 抗体, 直接竞争, 间接竞争

Abstract:

Indirect competitive ELISA was adopted to develop a rapid and specific assay capable of detecting kanamycin. The optimal working conditions were as follows: coating buffer, 0.01 mol/L PBS solution at pH 7.4; confining buffer, 0.05 mol/L carbonate-bicarbonate buffer containing 0.1% casein solution; antibody dilution buffer, PBST buffer containing 4% polyethylene glycol 6000 at pH 8.5; dilution of secondary antibody, 1:3000; and standard dilution buffer, the same to coating buffer. The IC50 of kanamycin was 9.9 ng/ml, the detection limit 1.0 ng/ml, and the linear detection range 1－200 ng/ml.

Key words: kanamycin, ELISA, antibody, direct competition, indirect competition

中图分类号:

R155.1

刘丽强，华朱鸣，许定花，陈伟，胥传来*. 卡那霉素酶联免疫检测方法的建立及检测条件的优化[J]. 食品科学, 2009, 30(18 ): 350-355.

LIU Li-qiang，HUA Zhu-ming，XU Ding-hua，CHEN Wei，XU Chuan-lai*. Development and Optimization of ELISA Detection of Kanamycin[J]. FOOD SCIENCE, 2009, 30(18 ): 350-355.

[1]	王晓瑞，邱红玲，王寿利，朱海华，周莉，平洋，谭静，王永，王慧. 抗副溶血弧菌OMPK单克隆抗体的制备及其ELISA双抗体夹心检测方法建立[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 319-325.
[2]	张彪，黄娜，张万利，王硕，生威. 基于上转换纳米材料与磁分离的荧光免疫分析方法检测食品中酪胺[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 270-275.
[3]	杨武英，王弘，洪艳平，王丹，徐振林，沈玉栋，柯法钧，陈薪竹，孙远明. 呋喃它酮代谢物单链抗体制备和酶联免疫分析方法[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 251-258.
[4]	靳登鹏，周雄，刘焕，杨娇，黄卓权，卜玲玲，柯倩华，柳春红. 基于免疫亲和层析和ProteoMiner处理的母乳乳清蛋白质组学分析[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 54-60.
[5]	谭庶，杨金易，许吉华，沈玉栋，曾道平，苏晓娜，钟翠丽，许小炫，孙远明. 鸡肉中金刚烷胺间接竞争ELISA检测方法的建立[J]. 食品科学, 2020, 41(10): 304-310.
[6]	江东健，罗秀儿，何庆华. 基于噬菌体展示纳米抗体的绿色免疫PCR检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 256-261.
[7]	邱涛涛，徐振林，甘庆庆，王兰腾，沈兴，李向梅，孙远明，雷红涛. 卵黄抗体体内代谢及中和毒素研究进展[J]. 食品科学, 2019, 40(5): 303-308.
[8]	王丽威，刘金，武俊瑞，乌日娜，岳喜庆. 抗牛免疫球蛋白G单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 110-116.
[9]	王淑娟，刘程，方水琴，田亚晨，董庆利，王翔，许东坡，刘箐,. 基于钴金属有机骨架材料（ZIF-67）催化性能的牛奶中大肠杆菌O157:H7快速定量检测[J]. 食品科学, 2019, 40(18): 323-328.
[10]	刘蓓蓓，曹林. 基于量子点建立铅镉快速串联检测方法[J]. 食品科学, 2019, 40(18): 335-341.
[11]	姚添淇，劳翠瑜，王士峰，胡桂平，张世伟. 糖皮质激素广谱特异性单克隆抗体的制备及其ic-ELISA方法的建立[J]. 食品科学, 2019, 40(14): 186-191.
[12]	赵建华，李浩霞，尹跃，王亚军，李彦龙，樊云芳，安巍，曹有龙. 枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 食品科学, 2019, 40(10): 77-83.
[13]	王嘉怡，潘姝璇，夏陈，邓海云，吕晓华，陈建. 发芽糙米米糠营养成分和γ-氨基丁酸分析及缓解体力疲劳功效[J]. 食品科学, 2019, 40(1): 177-182.
[14]	戴杰雨，姜永华，张玉洁，王豪杰，刘潇然，刘翠华，任小林. 苹果转录因子MdHB1的原核表达与多克隆抗体制备[J]. 食品科学, 2018, 39(8): 69-76.
[15]	颜朦朦，佘永新，洪思慧，张超，曹晓林，王猛强，王珊珊，郑鹭飞，金茂俊，邵华，金芬，刘海金，王静. 基于不同识别元件的表面等离子体共振技术在食品安全检测中的研究进展[J]. 食品科学, 2018, 39(23): 263-271.

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